Universidad Privada San Juan Bautista

Facultad de Ciencias de la Salud

Escuela Profesional de Medicina Humana
Ciclo I Semestre 2016-I

Curso de Biologa Molecular

Seminario 7:Complejo de Golgi y

Trfico Vesicular/ Lisosomas y
peroxisomas

Complejo de Golgi/
Regiones del Aparato de
Golgi (AG)
El aparato de Golgi tiene

dos caras principales:

Proximal al ncleo: Cis
Golgi Network (CGN).
Distal al ncleo: Trans
-Golgi Network (TGN).
La estabilidad y el
movimiento de las
vesculas del AG involucra
la participacin de
protenas tales como:
espectrina, ankirina y
actina.
En rojo se muestra al AG
marcado con anticuerpos

Compartimentalizacin molecular
del AG

Funciones del AG
Su funcin principal es la modificacin de
productos secretorios, aunque se pueden
especificar:
O-Glucosilacin de lpidos y protenas
Sulfatacin de productos secretorios.
Fosforilacin de lpidos y protenas.
Secrecin de protenas exportables.
De acuerdo a la etapa inicial o final de estos
procesos las enzimas responsables se van ubicar
en la cara cis o trans respectivamente.

Procesamiento de oligosacridos en los

compartimientos del AG

Todas las enzimas (glicosidasas y glicosil

transferasas), son protenas transmembranas

Procesamiento de oligosacridos en los

compartimientos del AG

Las dos clases de oligosacridos N-ligados

encontradas en proteinas maduras

Los oligosacridos complejos

son modificados y se les
aade nuevos azcares que
incluyen fucosa y cido
silico, (cido Nacetilneuroamnico, NANA).
Los oligosacridos ricos en
manosa, son procesados
pero no se les aade
azcares en el AG.
El que un oligosacrido sea
modificado o no depender
de la accesibilidad de las
enzimas a su estructura.

Procesamiento de los N-oligosacridos en el Golgi

 El procesamiento de los oligosacridos en el

AG sigue una ruta altamente coordinada.

En el AG se lleva a cabo otro tipo de glicosilacin

que involucra tambin un proceso complejo: Oglicosilacin.

O-glicosilacin de protenas

Los O-oligosacridos estn unidos

por enlace O-glucosdico al tomo
de oxgeno(O) de los aminocidos
Serina (Ser) o Treonina (Thr) de
una cadena polipptidica.
La O-glucosilacin comienza con la
unin de N-acetilgalactosamina
(GalNAc) o manosa (Man) a
residuos de Ser o Thr. Los residuos
de N-actilglucosamina, Gal, Fuc
o NANA son aadidos unos a uno
de
manera
secuencial
con
diferentes
tipos
de
enlaces,
resultando por ello en diferente Ooligosacridos (O-glicanos) con
estructura ramificada, compuesto
por
pocos
residuos
de
monosacridos.

En algunos casos, estos azcares sufren modificaciones

posteriores por la adicin de grupos fosfatos.

O-glicosilacin
Se confiere de manera
predominante a las
mucinas,
las
glicoprotenas
de
secreciones mucosas y
tambin
a
algunas
protenas
para
dar
origen
a
los
denominados
proteoglicanos.
Cul es la importancia
de la glicosilacin?

Asparagina

Papel del R.E. y A.G.

en Glicosilacin

Serina

de protenas.

Unin N.

Treonina

(N-Glicosilacin)

Unin O.

Hidroxilisina

(OGlicosilacin)
Hidroxiprolina
Becker,W.M. y col. 2000

Glucoprotena:
No cambia
Oligosacrido rico en manosa
Oligosacridos complejos

Glucosilacin Terminal
Protena
N-glucosilada

3 Glucosas
1 Manosa
Glucosidasas
Manosidasas

Pasos de la compartamentalizacin de Glucosilacin

y posterior Modificacin de Protenas
Biosntesis del oligosacarido por
glucosilacin -N
Adicin del nceo del oligosacarido a un residuo de asparagina

RE

CGN

Glucosil transferasas

Migracin a travs del AG

Glucansintetasas

Remocin de manosa
Segunda fosforilacin de
protenas lisosomales

Cisterna
media

Remocin de manosa
Adicin de N-acetilgalactosamina

Adicin de galactosamina
Adicin de ac. silico

TGN

Oligosacaridos de manosa

Adicin de N-acetilgalactosamina
a serina o treonina
Primer paso de fosforilacin de
protenas lisosomales

Adicin de ac. silico

Adicin de sulfato a tirosina

Oligosacaridos Complejos
Becker,W.M. y col. 2000

TRFICO VESICULAR
INTRACELULAR
2 RUTAS
GENERALES
EXOCITOSIS
RUTA DE SECRECIN BIOSINTTICA SECRETORA

LPIDOS
PROTENAS

ENDOCITOSIS
RUTA DE CAPTACIN DE NUTRIENTES

VITAMINAS
LPIDOS
COLESTEROL

CARBOHIDRATOS

HIERRO

ESTAS SE DAN POR LA PARTICIPACIN DEL SISTEMA DE

ENDOMEMBRANAS Y LA FORMACIN DE VESCULAS

Trfico vesicular a travs del

Sistema de Endomembranas
Antergrado

Retrgrado

Membrana
plasmtica

Granulos de
Secrecin

Endosomas

VESCULAS
INTRACELULARES
Componentes de
transporte
membranoso.
Molcula que
transporta: Carga
Tipos:
Esfricas
Tubulares irregulares

Se forman gracias a las

protenas de cubierta.

COP I
COP II
CLATRINAS
RETRMERO
Fuente: BOZZOLA, J.J. & RUSSELL, L.D. 1992 Electron
microscopy Jones and Bartlett Publishers International,

Protenas de cubierta
Clatrina
Es una de las ms
caracterizada.
Participan en el
trafico de la
membrana hacia el
intracelular y
viceversa
Protena principal:
clatrina.
Unidad fundamental:
Trisqueliones

Topologa del Trfico Vesicular

MEMBRANA CITOPLASMTICA

MITOCONDRIA

ENDOSOMA

LISOSOMA

APARATO DE GOLGI

RETICULO
ENDOPLASMTICO

Cmo se separan las vesculas de

los compartimientos de origen?
Dinamina

Fuente: ALBERTS, B. et al. 2002 Molecular Biology of the Cell 4th. Edition Garland Publishing, Inc., New York
& London.

Cmo se fusionan la vesculas con el

compartimiento de destino? Protenas
SNAREs

Fuente: ALBERTS, B. et al. 2002

Molecular Biology of the Cell 4th.
Edition Garland Publishing, Inc., New
York & London.
Fuente: KARP 2010 Cell and
Molecular Second Edition, ASM Press,
Washington,
D.C.
&
Sinauer
Associates,
Inc.,
Sunderland,
Massachusetts.

Transporte del RE al Golgi

Participacin de
COP II
Protenas
secretadas

Fuente: COOPER, G. M. 2000 The Cell - A Molecular Approach Second Edition, ASM Press, Washington, D.C. &
SinauerAssociates, Inc., Sunderland, Massachusetts.

Transporte del Golgi al RE

Participacin de COP I y
de los receptores
KDEL
Para protenas
Residentes del RE
Va del reciclaje

Fuente: COOPER, G. M. 2000 The Cell - A Molecular

Approach Second Edition, ASM Press, Washington, D.C.
& Sinauer Associates, Inc., Sunderland, Massachusetts

Transporte del Golgi hacia

otros compartimientos
Participacin de las
proteinas de cubierta
clatrinas

Fuente: COOPER, G. M. 2000 The Cell - A Molecular Approach Second Edition, ASM Press,
Washington, D.C. & Sinauer Associates, Inc., Sunderland, Massachusetts.

Vesculas recubiertas
involucradas en el trnsito
de protenas

Las protenas que van del Golgi

al lisosoma deben ser
marcadas

Fuente: COOPER, G. M. 2000 The Cell - A Molecular Approach Second Edition, ASM Press, Washington, D.C. &
Sinauer Associates, Inc., Sunderland, Massachusetts.

Marcaje de Protenas Lisosomales

Lafosforilacines
tambin
otras de las modificaciones posttraduccionales que ocurren en el
AG, siendo esencial para la
clasificacin y distribucin de
protenas desde el lumen del
Golgi a los lisosomas. As, el
procesamiento
del
Noligosacarido de las protenas
lisosomales
difiere
de
las
protenas secretadas y de la que
formaran parte de la membrana
plasmtica.
Las
protenas
destinadas a incorporarse a los
lisosomas,
en
vez
de
la
eliminacin de los tres residuos
de manosa, son modificadas
mediante una fosforilacin de la
manosa.

Trfico vesicular desde la

membrana al intracelular

PINOCITOSIS
PARTICIPACIN
DE PROTEINAS
DE CUBIERTA

ENDOCITOSIS

Fuente: COOPER, G. M. 2000

The Cell - A Molecular Approach
Second Edition, ASM Press,
Washington, D.C. & Sinauer
Associates, Inc., Sunderland,
Massachusetts.

LA ENDOCITOSIS
MEDIADA POR RECEPTOR

Secrecin
Las vesculas que brotan
de la cara trans portan
los productos acabados
destinados al medio
extracelular. La fusin de
dichas vesculas con la
membrana plasmtica
exocitosis- da como
resultado la secrecin o
exportacin de diversas
sustancias: enzimas,
hormonas, molculas de
la matriz extracelular o
de la pared celular,
anticuerpos y otras,
segn el tipo celular.

RUTAS SECRETORIAS
REGULADAS
Son propia de clulas secretoras
especializadas. En estos casos,
las vesculas se acumulan en el
polo secretor de la clula, como
grnulos de secrecin y la
exocitosis se realiza slo ante
seales muy especficas.

Por ejemplo, las clulas de

los islotes de Langerhans,
contiene grnulos de insulina
que
son
exocitados
en
respuesta a una elevacin de la
glicemia.
Requiere tambin un aumento
de la concentracin de calcio
citoslico.

Lisosomas
Organela ligada a la membrana que es
responsable por la degradacin de las
protenas y membranas en la clula.
Tambin ayuda a degradar materiales
ingeridos por la clula.
Funcin: digestin celular.

Descubrimiento de los
Lisosomas
De Duve y col 1949,
encontraron vesculas
con sustancias cidas de
densidad diferente a las
mitocondrias y
microsomas.
1954, Straus introduce el
concepto
funcin
digestiva, al encontrara
la
capacidad
de
la
organela para degradar
compuestos endocitados
por la clula.

Lisosomas
1960 Chon y col permitieron entender la
forma en que la organela participa en la
digestin del material fagocitado (neutrfilos y
macrfagos).
1883 Metchnikoff establece que la digestin
de partculas es realizada
por vesculas
digestivas de pH cido y que contienen
citasas. Hoy en da, la presencia de las
hidrolasas cidas en vacuolas que tienen
pH cido es requisito para
definir a un
Lisosoma.

Caractersticas de los
Lisosomas
Bioqumicamente
son vesculas que contienen enzimas
hidrolticas cuyo pH ptimo es cido ( 4,8 - 5,2) Actualmente
se han identificados hasta 50 hidrolasas cidas.
- Hidrolizan
casi cualquier
extracelular o intracelular.

tipo

de

partcula

biolgica

- La degradacin de macromolculas en sus componentes y la

transferencia de stos al citoplasma, permite a la clula su
reutilizacin para sntesis de nuevas macromolculas.
-

Lon organelos subcelulares , heterogneos, polimrficos.

- Son identificados con M. electrnica: y se les define como

vesculas formadas por membrana simple ,
tamao es
variable (0,2 a 2mm). Tincin citoqumicas (hidrolasas cidas).

Las enzimas del lisosoma

Las hidrolasas cidas
son enzimas hidrolticas
que estn activas en
condiciones cidas.
El lumen se mantiene a
un pH cido mediante la
accin de una bomba
de H+ situada en la
membrana.
El pH
alcalino del
citosol protege a la
clula
de
una
autoprotelisis.

Bomba ATPasa clase V

El pH del
compartimiento
lisosomal es
logrado por el
bombeo de
protones por medio
de una ATPasa del
tipo V .

Enzimas
lisosmicas
Se sintetizan en el RER y son

luego modificadas en el AG,

en donde se identifican y
distribuyen en los lisosomas
mediante seales nicas de
carbohidratos que se unen a
las protenas.
Las protenas que integran
la membrana lisosmica son
altamente glicosiladas, para
evitar ser degradadas por
las proteasas del lumen.

Hidrolasas cidas

GLICOSIDASAS: enzimas lisosomales involucradas en

degradacin de cadenas glicosdicas presentes en
glicoprotenas, esfingolpidos, glucgeno, o
mucopolisacridos.
Glucosidasa alfa y beta , Manosidasa, Galactosidasas,
Hialuronidasa, Lisozima, Sulfatasas (aril sulfatasa).
PROTEASAS: enzimas lisosomales involucradas en la
hidrlisis de cadenas peptdicas
catepsinas, carboxipeptidasas, aminopeptidasas
LIPASAS: enzimas que hidrolizan esfingolpidos, steres de
cidos grasos y fosfoglicridos:
esfingomielinasa, ceraminidasa, lipasa ,etc.

Hidrolasas cidas
FOSFATASAS: enzimas que hidrolizan grupos
fosfato presentes en cidos nucleicos ,
protenas, lpidos y carbohidratos:
fosfatasa cida, fosfolipasas, exonucleasa
cida, nucleotidasa cida, esfingo
fosfodiesterasa.
NUCLEOTIDASAS: hidrolizan cidos nucleicos:
endonucleasas, desoxirribonucleasa,
ribonucleasa.

Tipos de lisosomas:
Primario

o Grnulo de Reserva
(no
tiene
material
a
digerir).

Se forma a partir del AG,

contienen
nicamente
hidrolasas cidas y pueden
fusionarse con vesculas
fagocticas.

Slo son visibles con cierta

facilidad en leucocitos:
neutrfilo, eosinfilos,
monocito.

Tipos de lisosomas:
Secundarios
a) Endolisosoma

Estructura
intracelular.
Se
incorpora lquidos y sustancias
disueltas.
Transporta
a
su
interior
sustancias
solubles
extracelulares
(hormonas,
protenas sricas, lipoprotenas
mucopolisacridos, Factores de
crecimiento
etc)
por
pinocitosis.
La vescula endoctica
se
fusiona a vesculas de forma
tubular que se conoce como
endosoma o receptosoma y
su
compartimento
es
ligeramente cido (6 6,2)

b) Fagolisosoma

Considerado
como
heterofagosoma (enzimas +
partcula) incorpora sustancias
en forma de partculas.

Se forma por proceso de

fagocitosis y se fusiona al
lisosoma. Presente en clulas
fagocticas:
monocitos,
macrfago y clulas de Kuffer,
etc.

Importantes
en
los
mecanismos de eliminacin de
bacterias,
virus,
clulas
cancerosas,
parsitos,
partculas microscpicas etc.

Tipos de lisosomas:
Secundario
c)Autofagolisosoma

Son fciles de identificar con el M.

electrnico, porque en su interior se
puede
observar
mitocondrias,
RE,
glucgeno
y
otras
entidades
citoplasmticas. Las clulas pueden
degradar sus propios componentes .

Se cree que se forma a partir de las

membranas del RE que contiene fosfatasa
cida.
Inicialmente
las
vesculas
autofagicas
(autofagosomas)
no
contienen
enzima
lisosomales
posteriormente se les fusionan lisosomas
con lo que da inicio a la degradacin de
las vesculas autofgicas, estas nuevas
vesculas
se
les
conoce
como
autofagolisosomas.
El
proceso
de
autofagia ocurre en todo tipo celular, y
sirve para el recambio de protenas y
organelas .

AUTOFAGIA

Tipos de lisosomas:
Secundarios
d) Cuerpos Residuales

Vesculas con estructura polimrfica

electrodensa compuesta por residuos no
digeridos por los lisosomas .
El contenido puede ser eliminado por la
clula bajo mecanismo de exocitosis,
pero los residuos no digeridos nunca se
han visto libres en el citosol.
En hgado la secrecin ocurre hacia los
conductos biliares o hacia los tbulos en
el rin: en otros tipos celulares no es
seguro que se lleve a cabo la descarga
de los residuos de la digestin
lisosomal. Algunos cuerpos residuales
son negativos a la tincin de fosfatasa
cida y para otras enzimas lisosomales,
por lo que se les considera poslisosomas

FORMA DE OBTENCIN
DE MATERIALES DE
DEGRADACIN
1. ENDOCITOSIS. Toma de
sustancia por formacin de
vescula de membrana
plasmtica
2. FAGOSOMA: fagocitosis ,
vesculas que carecen de
enzimas hidrolticas
3. AUTOGAGIA: digestin de
material celular por sus
propias enzimas.

Fagocitosis

Clula polimorfo nuclear

fagocitando una levadura

Ameba realizando el
procesos de fagocitosis

FUNCIONES DE LOS LISOSOMAS

1.Digestin celular ( Carbohidratos ---- > monosacridos; protenas
---- > dipeptido ---- > aminocidos que quedan en el citosol)
2. Digestin de material extracelular (microorganismos,
macromolculas exgenas, hidrolasas son excretadas por exocitosis)
3. Autofagia: cumplimiento de ciclo celular recambio de
componentes celulares: organelas (reabsorcin y formacin de
tejido seo, proceso de fecundacin del ovulo, durante
determinadas etapas de la morfognesis en las que hay invasin
celular

Trfico de enzimas
lisosomales

Importancia de los
Lisosomas
Defensa: papel
macrfagos.

ejecutado

por

leucocitos

Procesos patolgicos: artritis reumatoide (falta

fosfotransferasa, la secrecin de hidrolasas produce
dao a los cartlagos.
la proteasa del acrosoma del espermatozoide destruye el
trayecto que conduce a la superficie del huevo
Acumulacin de cido rico, produciendo inflamacin en
los tejidos

Importancia clnica

ENFERMEDADES LISOSOMALES
Dentro de los errores innatos del metabolismo se encuentran las
enfermedades de almacenamiento lisosomal o enzimopatas
lisosomales, las cules se caracterizan por un dficit enzimtico
especfico, la excrecin de metabolitos por la orina y la
acumulacin de los compuestos no degradados en diferentes
rganos y tejidos que ocasionan la disfuncin de stos. Tienen un
patrn de herencia autosmico recesivo, excepto para la
enfermedad de Fabry y la enfermedad de Hunter en las que el
patrn de herencia est ligado al cromosoma X.. Su importancia
radica en la magnitud que representan como problema de salud, por
la pobre calidad de vida de esos pacientes, as como su
fallecimiento prematuro, motivo por el cual hay que evitar los
nacimientos de nuevos nios afectados.

Sndrome de Hunter
Mucopolisacaridosis
tipo II (MPS II).
Deficiencia o
ausencia de la
iduronato-2sulfatasa (I2S).
Diferentes rasgos
faciales, macrocefalia
y abdomen
prominente.
Medicamento:
Melaprasa
Sndrome de Hunter

Enfermedad de Fabry
Trastorno que bloquea la
produccin de la enzima A
galactosidasa provocando
que ciertas sustancias o
lpidos permanezcan en la
clula.
Enfermedad multisistmica:
erupcin
cutnea,
insuficiencia renal, dolor
extremidades inferiores. Se
asocia
a
la
artritis
reumatoide

Enfermedad de TAY SACHS

(GM2)

Causada por una deficiencia de una

enzima llamada HEXOSAMINIDASA,
esta enzima tiene la funcin de degradar
sustancias grasas llamadas ganglisidos.
A consecuencia de esto a la clula tiene
sobrepoblacin de estos ganglisidos y
no puede llevar a cabo sus funciones
normales.
Esto es muy peligroso ya que los
ganglisidos
son
componentes
fundamentales del plasmalema neuronal.
Sntomas: Apata, ceguera, ligero retraso
mental,
irritabilidad
convulsiones,
disminucin del tono muscular, sordera,
demencia , parlisis , degeneracin
progresiva del sistema nervioso central

Enfermedad de
Sanfilippo

El sndrome de Sanfilippo, o
Mucopolisacaridosis (MPS) tipo lll ,
comprende
un
grupo
de
enfermedades de almacenamiento
lisosomal.
Causada por la deficiencia de una
de las cuatro hidrolasas lisosomales
que participan en la degradacin
del GAG Heparn Sulfato (el cual se
encuentra localizado en la matriz
extra-celular y en las glicoprotenas
de la superficie celular).
Esta
deficiencia
ocasiona
degeneracin severa del sistema
nervioso central y deterioro de las
habilidades
sociales
y
de
adaptacin

Enfermedad de Sanfilippo

Enfermedad de Pompe

Glucogenosis tipo II.

Es un defecto de la (1-4)
glucosidasa cida lisosmica,(GAA)
tambin denominada maltasa cida.
El glucgeno aparece almacenado
en lisosomas.
Enfermedad muscular debilitante y
rara que afecta a nios y adultos.
Forma infantil y juvenil.
Se caracterizan generalmente por
un debilitamiento muscular
progresivo y dificultades
respiratorias, pero la gravedad de la
enfermedad puede variar
ampliamente dependiendo de la
edad de inicio y cun afectados se
encuentren los rganos

Artritis reumatoide
La
membrana
de
los
lisosomas es impermeable a
las enzimas y resistente a la
accin de stas. Ambos
hechos
protegen
normalmente a la clula de
una batera enzimtica que
podra degradarla.
Existen,
sin
embargo,
algunos
procesos
patolgicos, como la artritis
reumatoide, que causan la
destruccin
de
las
membranas lisosomales, con
la consecuente liberacin de
las enzimas y la lisis celular.

Peroxisomas

Vesculas
de
membrana
simple.
Tambin
denominados
microcuerpos.
Contenido:
enzimas
oxidativas
Oxidacin de cidos grasos
de cadena muy larga
(VLCFAs) y produccin de
plasmalgenos.
Sntesis y degradacin de el
perxido de hidrgeno.

Peroxisomas

Utilizan oxgeno molecular para eliminar tomos de

hidrgeno a partir de substratos orgnicos especficos (R) a
travs de una reaccin oxidativa que produce perxido de
hidrgeno (H2O2).

Modelo de ensamblaje de los

peroxisomas

Peroxisomas
= Microcuerpos

Presentan enzimas oxidativas

(catalasa, DAO, uratoxidasa).
Presenta en hgado y rin
como grnulos (0,6 m) que
posee membrana simple y
matriz densa. Crece con
lentitud y es destruido por
autofagia.
Lugares de oxidacin del
oxgeno
por
reacciones
oxidativas:
producen
perxidos de hidrogeno.
Presente en la mayora de
clulas
eucariotas
de
mamferos.

Importancia

Formar y descomponer
perxido de Hidrogeno.
Participan en la beta
oxidacin de cidos grasos.

Detoxificar a la clula
(etanol). Lugares de
degradacin de las purinas.
Metabolismo de triglicridos

Envejecimiento de la clula
(radicales libres afectan ADN,
membrana)

Permite la accin de la
superoxido dismutasa

En las plantas :
fotorrespiracin

Peroxisomas en plantas
Denominados
Glioxisomas.
Abundantes a nivel de
las semillas.
Conversin de cidos
grasos a
carbohidratos.
Acetil CoA +
Oxaloacetato =
citrato

Alteraciones peroxisomales
Alteraciones de la biognesis de peroxisomas:
Sndrome Zellweger
Adrenoleucodistrofia neonatal.
Refsum infantil.
Alteraciones de la -oxidacin peroxisomal:
Adrenoleucodistrofia ligada al cromosoma X
Deficiencia de metil acil Co A racemasa;
acetil coA oxidasa.

Sndrome Zellweger
Sndrome cerebrohepato-renal.
Desorden congnito .
Baja produccin o
ausencia de
produccin de
peroxisomas.
Descrito por Hans
Ulrich Zellweger.