Universidad de Valparaso, Escuela de

Medicina
Primer ao 2016
Estructura y funcin celular
Mdulo 3

CONTRIBUCIONES DE LA
RESPIRACIN Y LA GLICLISIS EN LA
ACIDIFICACIN EXTRACELULAR
SEMINARIO I
Integrantes: Javiera Bustos, Jess Camacho, Nicols Godoy, Muriel Gonzlez,
Mara Fernanda Martin, Mayra Quevedo, Javiera Vallespin, Gabriel Vera
Profesoras: Ximena Collao y Cindy Pea
Fecha: 12/09/2016

INFORMACIN DEL
TEXTO
Artculo
Disponible online desde el 27 de
Octubre del 2014
Journal ELSEVIER: Acta de bioqumica
y biofsica (Pgina 171-181)
Autores: Shona. A. Mookerjee, Renata
L. S. Goncalves, Akos. A. Gerencser,
David G. Nicholls, Martin D. Brand

ASPECTOS GENERALES
ANTECEDENTES:
Niveles
de
acidificacin
extracelular Tasa glicoltica
Se omite la hidratacin del CO2
como
fuente
de
acidificacin
(CO2+ H2O HCO3- + H+ )

OBJETIVO:
Corregir el uso de la tasa de
acidificacin extracelular

INTRODUCCIN DE
CONCEPTOS
QU NECESITO SABER PARA
COMPRENDER?

Gluclisis
Destinos del piruvato: fermentacin lctica,
(fermentacin alcohlica), acetil co-A
Acidificacin extracelular
Mioblastos C2C12
H+

H+
H+

H+
H+

INTRODUCCIN
Cmo usualmente se mide la tasa
glicoltica?

Acidificacin extracelular: glucosa lactosa +

H+
Valor contaminado
Disociacin del CO2 a HCO3- y

H+

Anlisis en mioblastos C2C12

1 glucosa a lactato:
2
lactato + 2H+
Glucosa a CO2: 6HCO3- +
6H+
3 VECES MAYOR

CO2 en 34% de la acidificacin total

Record
ar!

METODOLOGA Y
Analizadores SeahorseXF
MATERIALES
Mitocondrias
del
msculo
esqueltico.
Mioblastos C2C12, clulas del
carcinoma
y
osteosarcoma,
clulas madres embrionarias,
clulas
madres
neurales,
neuronas corticales y clulas del
insulinoma pancretico.
Mediciones
de
lactato:
NAD+/NADH

Corriendo
se
dan
las
condiciones anaerbicas en
las clulas del msculo
esqueltico,
y
as,
la
produccin de lactato.

METODOLOGA Y
MATERIALES
Cociente respiratorio
(RQ)
CO2 producido / O2
consumido
Record
ar!

Mximo de H+ liberado por

O2

RESULTADOS
ESTRUCTURA
1. El CO2 producido en el pocillo de poliestireno causa la mayor
parte de la acidificacin
a. Modelo de generacin del CO2 con conocimiento de RQ
b. La produccin de CO2 causa la mayor parte de la acidificacin
2. Fuentes de acidificacin extracelular de las clulas
a. Consideraciones tericas
b. La acidificacin respiratoria contribuye sustancialmente a la
acidificacin total del espacio extracelular
c. La medicin de lactato verifica el clculo de la acidificacin
glicoltica extracelular

RESULTADOS
1. El CO2 producido en el pocillo de poliestireno causa la mayor
parte de la acidificacin
a. Modelo de generacin del CO2 con conocimiento de
CORQ
2
Pocillos individuales de poliestireno:
proporcin
de
CO2
retenido/H2CO3/HCO3-/H+
O2
RQ=1 CO2 producido = O2
consumido

RESULTADOS
1. El CO2 producido en el pocillo de poliestireno causa la mayor
parte de la acidificacin
b. La produccin de CO2 causa la mayor parte de la acidificacin
H+
H+

H+

H+
Estos experimentos muestran esencialmente que
todo el CO2 generado por la respiracin en los
pocillos se mantiene en el pocillo como HCO3
y genera ACIDIFICACION DEL MEDIO.

H+

H+
H+

RESULTADOS
2. Fuentes de acidificacin extracelular de las clulas
a. Consideraciones tericas
1. Piruvato (fermentacin lctica):

por el paso de NADH a NAD+ a lactato.

1H+

2. Piruvato (ciclo del cido ctrico): son

liberados 2H+ del proceso oxidativo,
3H+ derivados del CO2 y 1H+
consumido por el paso a acetil-coA
3. Palmitato (ster): 15H+ por los
16H+ del CO2 y el 1H+ consumido por
la sntesis de palmitoil-coA.
4. Glutamina: 3H+ por la produccin de
5CO2 y el consumo de 2H+
5. Ausencia de sustrato: 1H+ por O2
consumido

RESULTADOS
2. Fuentes de acidificacin extracelular de las clulas
b. La acidificacin respiratoria contribuye sustancialmente a la
PORCENTAJE
DE
acidificacin total del espacio extracelular
ACIDIFICACIN
EXTRACELULAR POR CO2
(nativo)
En presencia de glucosa: 34%
Inhibicin de la produccin de
ATP mitocondrial: 8-9%
En presencia de piruvato: 6774%
En presencia de palmitato:
113-143%
En ausencia de sustrato: 102122%

RESULTADOS
2. Fuentes de acidificacin extracelular de las clulas
c. La medicin de lactato verifica el clculo de la acidificacin
glicoltica extracelular

Tasa de acidificacin glicoltica = Lactato final

Tasa de acidificacin total = SOBRESTIMACIN
de sustratos

DISCUSIN
Acidificacin
extracelular
=
acidificacin respiracin + produccin
glicoltica de H+
Fuente de acidificacin el CO2 tumores
Desviacin de los niveles de oxgeno:
Crecimiento celular rpido
Piruvato convertido a glucgeno o
lactato + CO2

CONCLUSIN
CORRECIN DEL VALOR DE LA ACIDIFICACIN
GRAN AVANCE EN CLCULOS

DATO MS CONFIABLE