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PROCEDIMIENTOS, QUE SE
USAN PARA MANTENER, EN LO
POSIBLE, EL ASPECTO DE LAS
ESTRUCTURAS HISTOLGICAS
DEL ORGANISMO
VIVO,TRANSFORMNDOLAS
EN DELGADOS CORTES
COLOREADOS QUE PUEDAN
POSTERIORMENTE SER
OBSERVADOS AL
MICROSCOPIO.. Es un proceso
largo que abarca desde el
momento en que se toma el
material hasta que el
preparado puede observarse.
SE UTILIZA PARA :
Abolir el metabolismo celular.
Impedir la degradacin
enzimtica de las clulas y los
tejidos por autolisis (auto
digestin).
Destruir los microorganismos
patgenos como las
bacterias, los hongos o los
virus.
Endurecer el tejido como
consecuencia de la formacin
de enlaces cruzados o la
desnaturalizacin de las
molculas proteicas.
TIPOS FIJADORES
FISICOS
SIMPLES
FORMALINA.
ALCOHOL METLICO
BICLORURO DE
MERCURIO
TETRXIDO DE
OSMIO AL 1-2% P/V.
BICROMATO DE
POTASIO.
CIDO ACTICO.
ALCOHOL ETLICO.
COMPLEJOS
MEZCLA DE
BOUIN
Acido pcrico.
Formol.
cido actico.
LQUIDO DE
ZENKER
Bicromato.
Acido actico.
LQUIDO
DE HELLY
bicromato.
formol.
FRIO
DESECACION
- CALOR
2.DESHIDRATACION :
Luego de que la muestra ha sido
fijada se debe eliminar el fijador y
deshidratar. Para esto se utiliza
una serie gradual de soluciones
acuosas con una concentracin de
menor a mayor del agente
deshidratante, como por ejemplo
alcohol etlico. La deshidratacin
gradual se hace para evitar la
deformacin de la morfologa del
tejido, debido a la rpida salida
del agua.
3.-EL ACLARAMIENTO :
4.- INCLUSION :
ES LA FORMACIN DEL BLOQUE DE
PARAFINA (MEDIANTE LA INCLUSIN DEL
TEJIDO EN STA) RECIBIENDO EL NOMBRE
DE TACO
5.- CORTE :
Los tacos de parafina que contienen
la muestra se cortan con un
instrumento denominado
micrtomo.
El micrtomo se asemeja a una
mquina de cortar fiambre; posee
una manivela que se gira
manualmente (tambin los hay
automticos) y que hace que la
pieza, donde se fija el taco, avance
automticamente apenas unos
pocos micrones y descienda sobre el
filo de la cuchilla para realizar la
seccin. Generalmente, las
secciones para microscopio ptico
tienen un espesor de 5 mm.
MICROTOMO :
CUCHILLAS
VIDRIO/
CORTES
FINOS
INSTRUMENT
O DE CORTE
CUCHILLAS
DIAMANTE/
CORTES
DUROS
UTILIZAN
CUCHILLAS
CUCHILLAS
ACERO/
TEJIDOS
BLANDOS
5.- MONTAJE Y
TINCION :
A.-Proceso de
desparafinacin e
hidratacin realizados
en jarras de Coplin.
De izquierda a derecha
se pueden seguir los
distintos pasajes del
preparado histolgico
incluido en parafina
hasta su total
hidratacin.
DESHIDRATACION
Proceso de coloracin con
hematoxilina y eosina,
MONTAJE :
TINCION HEMATOXILINAEOSINA :
La hematoxilina es un colorante
catinico mientras que la eosina es
un colorante aninico
perteneciente a los xantenos. El
mtodo supone la aplicacin de la
tincin de hematoxilina, que por
ser catinica o bsica, tie
estructuras cidas (basofilas) en
tonos azul y prpura, como por
ejemplo los ncleos celulares; y el
uso de eosina que tie
componentes bsicos (acidofilas)
en tonos de color rosa, gracias a su
naturaleza aninica o cida, como
el citoplasma
FUNDAMENT
O
RESULTADOS
:
B) NAVAJA DE
VIDRIO.
A) ULTRAMICRTOMO
C) EL TACO EN EL
SOPORTE, LA
NAVAJA QUE
REALIZA EL CORTE
Y LA FORMA DE
RECOGER EL CORTE
CON LA GRILLA.
Las secciones se
recogen sobre una
grilla metlica
que posee una
delicada malla fina de
cobre aunque
tambin puede ser de
nquel o de oro. La
grilla reemplaza al
portaobjeto de vidrio
de la microscopia
ptica.
CONTRASTECOLORACIN :
Las secciones se colorean
apoyando las grillas con las
secciones sobre gotas de acetato
de uranilo y citrato de plomo.
Estos metales pesados se
depositan en las estructuras
celulares y aumentan el peso
atmico de las estructuras
biolgicas que dispersan los
electrones en el MET. Las grillas,
una vez secas, estn listas para
su observacin al MET sin ningn
tratamiento adicional.
TCNICAS CITOQUMICAS E
HISTOQUMICAS
Se denomina as al conjunto
de tcnicas empleadas en
histologa que permiten
identificar y localizar de
forma especfica
componentes qumicos de
las clulas y los tejidos.
TECNICAS
CITTOQUIMICAS E
HISTOQUIMICAS
COLORACIN CON
EL REACTIVO DE
SCHIFF
COLORACIN DE
FEULGEN
COLORACIN DE
SUDN
TRICRMICO DE
MALLORY
TRICRMICOS DE
MASSON Y VAN
GIESON
TCNICAS
ENZIMTICAS
TCNICAS CLSICAS
PARA EL ESTUDIO DEL
SISTEMA NERVIOSO