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DISCIPLINA: BIOLOGIA

PROFESSOR: JULIO ANDRADE

Histrico

Sumrio

Introduo
Conceitos
Classificao e Nomenclatura
Fatores que Influenciam a Atividade Enzimtica
Enzimas X Catalisadores Qumicos
Aplicaes
Concluso
Referncias

HISTRICO

Catlise biolgica incio sc. XIX


digesto da carne: estmago;
digesto do amido: saliva.
Dcada de 50
Louis Pasteur - concluiu que a fermentao do acar em lcool
pela levedura era catalisada por fermentos = enzimas
Eduard Buchner (1897)
extratos de levedo podiam fermentar o acar at lcool;
lcool
enzimas funcionavam mesmo quando removidas da clula viva.

James Sumner (1926)


Isolou e cristalizou a urease;
Cristais eram de protenas;
Postulou que todas as enzimas so protenas.
John Northrop (dcada 30)
Cristalizou a pepsina e a tripsina bovinas;
Dcada de 50 sc. XX
75 enzimas isoladas e cristalizadas;
Ficou evidenciado carter protico.
Atualmente + 2000 enzimas so conhecidas.

INTRODUO

ENZIMAS

Aminocidos:
H

Definio:
Catalisadores biolgicos;
R
C*
COOH
Longas cadeias de pequenas molculas chamadas
aminocidos.
NH2
Funo:
Viabilizar a atividade das clulas, quebrando molculas ou
juntando-as para formar novos compostos.
Com exceo de um pequeno grupo de molculas de RNA
com propriedades catalticas, chamadas de RIBOZIMAS, todas
as enzimas so PROTENAS.
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ENZIMAS PROTENA
Classificao protenas
Protenas globulares
Protenas fibrosas
Estrutura das protenas
Primaria

Secundaria

Terciria Quaternria

ENZIMAS
Protenas globulares
Estrutura terciria

Protenas com alto peso molecular,


maioria entre 15 a 1000 Kilo Daltons
Unit (KD)
OBS: 1 Dalton = 1 unidade de peso
molecular (AMU)
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ENZIMAS
COMPONENTES DA REAO

E+S

ES

P+E

Substrato se liga ao
STIO ATIVO
da enzima

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ENZIMAS COFATOR
Algumas enzimas que contm ou necessitam de elementos
inorgnicos como cofatores
ENZIMA

COFATOR

PEROXIDASE

Fe+2 ou Fe+3

CATALASE
CITOCROMO OXIDASE

Cu+2

LCOOL DESIDROGENASE

Zn+2

HEXOQUINASE

Mg+2

UREASE

Ni+2

Definio:
Catalisadores biolgicos;
Longas cadeias de pequenas molculas chamadas aminocidos.
Funo:
Viabilizar a atividade das clulas, quebrando molculas ou
juntando-as para formar novos compostos.
Com exceo de um pequeno grupo de molculas de RNA com
propriedades catalticas, chamadas de RIBOZIMAS,
RIBOZIMAS todas as
enzimas so PROTENAS (globulares, de estrutura terciria).

Estrutura
Enzimtica

Holoenzima
Protena

Ribozimas
RNA

Apoenzima ou
Apoprotena

Cofator
Cofator

Pode ser:
on inorgnico
molcula orgn

Se covalente Coenzima
Grupo Prosttico

ENZIMAS:
Apresentam alto grau de especificidade;
So produtos naturais biolgicos;
Reaes baratas e seguras;
So altamente eficientes, acelerando a velocidade das reaes (10 8 a
1011 + rpida);
So econmicas, reduzindo a energia de ativao;
No so txicas;
Condies favorveis de pH, temperatura e concentrao do substrato

CONCEITOS

As enzimas...
Aceleram reaes qumicas
H2O2

Catalase

H2O +

O2

Ex: Decomposio do H2O2


Condies da Reao

Energia livre de Ativao


KJ/mol
Kcal/mol

Sem catalisador

75,2

18,0

Enzima Catalase

23,0

5,5

Velocidade
Relativa
1
6,51 x 108

No so consumidas na reao

H2O2

Catalase

E+S

H2O + O2

E+P

Atuam em pequenas concentraes

1 molcula de Catalase

decompe
5 000 000 de molculas de
H2O2
pH = 6,8 em 1 min

Nmero de renovao = n de molculas de substrato convertidas


em produto por uma nica molcula de enzima em uma dada unidade
de tempo.

Energia

No alteram o estado de equilbrio


Abaixam a energia de ativao;

Diferena entre
a energia livre
de S e P

Energia de ativao sem enzima

Energia de ativao com


enzima

Caminho da Reao

Emil Fischer (1894): alto grau de especificidade das enzimas


originou Chave-Fechadura , que considera que a enzima
possui sitio ativo complementar ao substrato.

Koshland (1958): Encaixe Induzido, enzima e o o substrato


sofrem conformao para o encaixe. O substrato distorcido para
conformao exata do estado de transio.

NOMENCLATURA E
CLASSIFICAO

Sculo XIX - poucas enzimas identificadas


Adio do sufixo ASE ao nome do substrato:
Ex:
- gorduras (lipo - grego) LIPASE
- amido (amylon - grego) AMILASE
Nomes arbitrrios:
- Tripsina e pepsina proteases

1955 - Comisso de Enzimas (EC) da Unio Internacional de


Bioqumica (IUB) nomear e classificar.
Cada enzima cdigo com 4 dgitos que caracteriza o tipo de
reao catalisada:
1 dgito - classe
2 dgito - subclasse
3 dgito - sub-subclasse
4 dgito - indica o substrato

FATORES QUE
INFLUENCIAM A
ATIVIDADE ENZIMTICA

A atividade enzimtica influenciada por:

pH;

temperatura;

concentrao das enzimas;


concentrao dos substratos;
presena de inibidores.

pH
O efeito do pH sobre a enzima deve-se s variaes no
estado de ionizao dos componentes do sistema medida
que o pH varia.
Enzimas grupos ionizveis, existem em estados de
ionizao.

TEMPERATURA
temperatura dois efeitos ocorrem:
(a) a taxa de reao aumenta, como se observa na maioria das
reaes qumicas;
(b) a estabilidade da protena decresce devido a desativao
trmica.

A temperatura tima para que


a enzima atinja sua atividade
mxima, a temperatura
mxima na qual a enzima
possui uma atividade cte. por
um perodo de tempo.

CONCENTRAO DOS SUBSTRATOS

[S] varia durante o curso da reao medida que S convertido


em P.
Medir Vo = velocidade inicial da reao.

[E] = cte.
vo
[S] pequenas Vo linearmente.
[S] maiores Vo por incrementos cada
vez menores.
Vmax [S] Vo insignificantes.
Vmax atingida E estiverem na forma
ES e a [E] livre insignificante, ento, E
saturada com o S e V no com de [S].

Vmax

[S]

PRESENA DE INIBIDORES
Inibidor qualquer substncia que reduz a velocidade de uma
reao enzimtica.

INIBIDORES

REVERSVEIS

COMPETITIVOS

IRREVERSVEIS

NO COMPETITIVOS

INCOMPETITIVOS

CINTICA
ENZIMTICA

Cintica Enzimtica estudada para:


Determinar as constantes de afinidade do S e dos inibidores;
Conhecer as condies timas da catlise;
Ajudar a elucidar os mecanismos de reao;
Determinar a funo de uma determinada enzima em uma rota
metablica.

ENZIMAS
X
CATALISADORES QUMICOS

Caracterstica
Especificidade ao substrato

Enzimas
alta

Natureza da estrutura

complexa

Sensibilidade T e pH

alta

Condies de reao (T, S e pH)


Custo de obteno (isolamento e purificao)

suaves
alto

Natureza do processo

batelada

Consumo de energia

baixo

Formao de subprodutos

baixa

Separao catalisador/ produtos

difcil/cara

Atividade Cataltica (temperatura ambiente)

alta

Presena de cofatores

sim

Estabilidade do preparado

baixa

Energia de Ativao

baixa

Velocidade de reao

alta

APLICAES

ENZIMAS APLICAES
Proteases
Leite: na preparao do leite de soja.
Carnes e Peixes: recuperao de protenas do osso ou espinha.
Vinhos: clarificao.
Queijo: coagulao da casena.

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TIPOS DE APLIES INDUSTRIAIS


Alimentos
Raes animais
Papel e celulose
Couro
Txtil

ALIMENTOS

Indstria de azeite de oliva:


- Aplicao de polygalacturonase e pectinesterase na
melhoria de aspectos organolpticos e estabilidade a
longo prazo.

Panificao:
- Melhoria de cor, sabor e estrutural atravs
preparado enzimtico que contm alfa-amilase
Atua sobre a farinha de trigo, acelerando o
de fermentao devido a uma maior formao
acares para o fermento.

de
fngicas.
processo
de

RAES ANIMAIS

Utilizao de enzimas nas raes para leites durante o perodo


de lactao:
- Emprego de Xilanase, Beta-glucanase e Alpha-amylase
com o objetivo de digesto de amido e, em decorrncia
disso, ganho de peso e abate precoce.

INDSTRIA DE PAPEL E CELULOSE

Remoo de depsitos em mquinas de papel:


- Substituio de lcalis e cidos fortes por enzimas
com o objetivo de assegurar a integridade fsica dos
funcionrios e cumprir leis ambientais.

CONCLUSO

Ampla aplicabilidade da atividade enzimtica


Vantagens frente aos catalisadores qumicos
Importncia de fatores externos
Necessidade de maiores estudos para viabilizar o uso de
diversas enzimas

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ENZIMAS
INFLUNCIA DA TEMPERATURA

O efeito da temperatura depende:


- pH e a fora inica do meio;
- a presena ou ausncia de ligantes.
Acima desta temperatura, o velocidade de reao devido a
temperatura compensado pela perda de atividade cataltica
devido a desnaturao trmica.
ENZIMA

TEMPERATURA TIMA (C)

Pepsina

31,6

Tripsina

25,5

Urease

20,8

REFERNCIAS

- JUNIOR, AGENOR FURIGO; DIRLEY, DIEDRICH KIELING. Enzimas.


Aspectos Gerais. Florianpolis, 2002.
- JUNIOR, AGENOR FURIGO; PEREIRA, ERNANDES BENEDITO. Enzimas
e suas Aplicaes. Cintica Enzimtica. Florianpolis, 2001.
-http://www.enq.ufsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/
-http://www.suino.com.br/nutricao
-http://www.aboissa.com.br/azeitedeoliva/enzima.htm
-http://www.deb.uminho.pt/imprensa/curtumes.htm
-http://www.mylner.com.br/enzimas.htm
-http://www.novozymes.com/library/Publications/Biotimes_Sprog/pwhere.pdf