Enzimas

2016-II

DEFINICIN
ENZIMA

PROTENA
BIOCATALIZADORA

Pueden ser
endo o
exocelulare
s

Actan
en
pequea
s
cantidad
es sobre
gran
cantidad
de
sustrato

No alteran
su
estructura
ni funcin
luego de
actuar sobre
el sustrato

Disminuye energa
de activacin,
acelera reaccin y
no afecta
concentraciones
finales en equilibrio

Cofactores enzimticos

Transferencia de electrones
Algunos
compuestos
formar
un
Aunque los
sustratos necesitan
de la reaccin
sean
complejo
con unelmetal,
generalmente
neutros, durante
transcurso
de la
Mg2+,
para
as poder
unirse
al
reaccin
pueden
surgir
intermediarios
o
sitio
activo
de
la
enzima.
estados de transicin con cargas
negativas que son estabilizados por un ion
metlico, generalmente Mg2+, facilitando
de esta forma el avance de la reaccin
hacia el producto

Proenzimas
Zimogenos o proenzimas son precursores inactivos de
las enzimas, es diferente a decir que son enzimas
inactivas.
Una enzima inactiva es una enzima que ha perdido su
actividad debido a diferentes factores, como factores
fsicos, qumicos o aun metablicos.
La pepsina es sintetizada como pepsinogeno, la tripsina
como
tripsinogeno,
la
quimotripsina
como
quimotripsinogeno,
carboxipeptidasas
como
procarboxipeptidasas.
Un buen ejemplo de lo que ocurre cuando algunos
zimogenos son activados antes de tiempo, en el interior
de las celulas, se ve en la pancreatitis aguda , en la cual
la activacion prematura de algunas de las enzimas
pancreaticas como tripsina, fosfolipasa A2 y elastasa,
producen la autodigestion del tejido pancreatico.

Isoenzimas
Isoenzimas o isozimas son enzimas que difieren en la
secuencia de aminocidos, pero que catalizan la misma
reaccin qumica.
Un ejemplo de una isoenzima es la glucoquinasa, una
variante de hexoquinasa que no es inhibida por la
glucosa-6-fosfato.
Sus
diferentes
funciones
de
regulacin y su menor afinidad por la glucosa (en
comparacin con otros hexoquinasas), le permiten tener
diferentes funciones en las clulas de determinados
rganos, como el control de la liberacin de insulina por
las clulas beta del pncreas, o la iniciacin de la
sntesis de glucgeno por las clulas del hgado. Ambos
procesos deben ocurrir solamente cuando la glucosa es
abundante, o ocurre algn problema.

Clasificacin (International Union of

Biochemists: IUB)
ENZIMAS

Clases

Oxidorreductas
as

Isomerasa
s

Hidrolasas

Transferasas

Liasas

Ligasas

Oxidoreductasas
1) OXIDORREDUCTASAS:
reacciones REDOX
Existen dos tipos esenciales:
Con transferencia de
hidrgenos

Sin transferencia de
hidrgenos

Ejemplos: Deshidrogenasas,
citocromooxidasas, catalasas,
aminooxidasas

Transferasas
2) TRANSFERASAS:
transferencia de grupos funcionales

Ejemplo: transaldolasas, transcetolasas, transaminasas,

Hexocinasas

Hidrolasas
3) HIDROLASAS:
rotura de enlaces por medio de agua.
Enlaces C C, C O, C N

Ejemplos: Glucosidasas, lipasas, peptidasas,

estearasas, fosfatasas

Liasas
rotura o formacin de molculas sin intervencin del
agua, por adicin a dobles enlaces (C=C, C=O, C=N)

Ejemplo: descarboxilasas, aldolasas

Isomerasas
cambio de posicin de grupos dentro de la molcula

Ejemplos: epimerasas (mutasas), racemasas

Ligasas
6) LIGASAS O SINTETASAS:
Formacin de enlaces con rotura de
ATP

Ejemplos: ADN polimerasas, peptidosintetasas, carboxilasas,

polimerasas

CINETICA ENZIMATICA

Especificidad
enzimtica
Especificidad
Absoluta

Especificidad
de Grupos

Especificidad
Estereoqumica

Especificidad
De Enlaces

SITIO ACTIVO
Zona que presenta grupos funcionales que
participan directamente en la ruptura o formacin de
enlaces en el sustrato.
Representa una pequea porcin de la molcula
enzimtica.
Es una estructura tridimensional compleja
La
especificidad
enzimtica
depende
del
ordenamiento de los tomos en el sitio activo.
La unin enzima sustrato, se produce mediante
fuerzas relativamente dbiles.

CINETICA ENZIMATICA

V1= k1[E] [S]

V2= k2[ES]
V3= k3[ES]
k3
k2

Hay enzimas que no obedecen la ecuacin de

Michaelis-Menten. Se dice que su cintica no
es Michaeliana. Esto ocurre con los enzimas
alostricos, cuya grfica v frente a [S] no es
una hiprbola, sino una sigmoide (Figura de
la derecha). En la cintica sigmoidea,
pequeas variaciones en la [S] en una zona
crtica (cercana a la KM) se traduce en
grandes variaciones en la velocidad de
reaccin.

Para evitar el tratamiento de grficos curvilneos de las reacciones

catalizadas por enzimas, los bioqumicos Lineweaver y Burk
introdujeron un anlisis de la cintica Enzimtica basndose en el
siguiente rearreglo de la ecuacin de Michaelis-Menten:

Caractersticas de Km: la constante de Michaelis-Menten es caracterstica de una

enzima y particular para un substrato. Refleja la afinidad de la enzima por ese substrato. K m
es numricamente igual a la concentracin de substrato a la cual la velocidad de reaccin es
la mitad de la Vmax (Km= Vmax/2). Este parmetro, Km no vara con la concentracin de
enzima.
Significado de una Km pequea: un valor numrico pequeo de Km refleja una alta
afinidad de la enzima por su substrato porque a una baja concentracin del mismo, la
enzima a desarrollado ya la mitad de la velocidad mxima.
Significado de una Km grande: el valor numrico grande de Km refleja una baja
afinidad de la enzima por su substrato porque a una concentracin elevada del mismo, la
enzima desarrolla la mitad de la velocidad mxima.
Relacin de la velocidad con la concentracin de enzima: la velocidad de la reaccin
es directamente proporcional a la concentracin de la enzima a cualquier concentracin de
substrato. Por ejemplo, si la concentracin de enzima es disminuida a la mitad, la velocidad
inicial de la reaccin (v0) es reducida tambin a la mitad de la original.
Orden de la reaccin: cuando S es mas pequea que la Km, la velocidad de la
reaccin es aproximadamente igual a la concentracin de substrato. La velocidad de reaccin
se dice en estas condiciones es de primer orden con respecto al substrato. Cuando S es
mas grande que la Km, la velocidad es constante e igual a la Vmax. La velocidad de la
reaccin es independiente de la concentracin de substrato y se dice que es de orden cero
con respecto a la concentracin de substrato

Factores que afectan la actividad

enzimtica.Concentracin del sustrato.- A mayor concentracin del
sustrato, a una concentracin fija de la enzima se obtiene la
velocidad mxima. Despus de que se alcanza esta velocidad, un
aumento en la concentracin del sustrato no tiene efecto en la
velocidad de la reaccin.
Concentracin de la enzima.- Siempre y cuando haya sustrato
disponible, un aumento en la concentracin de la enzima
aumenta la velocidad enzimtica hacia cierto lmite.
Temperatura.- Un incremento de 10C duplica la velocidad de
reaccin, hasta ciertos lmites. El calor es un factor que
desnaturaliza las protenas por lo tanto si la temperatura se eleva
demasiada, la enzima pierde su actividad.
pH.- El pH ptimo de la actividad enzimtica es 7, excepto las
enzimas del estmago cuyo pH ptimo es cido.
Presencia de cofactores.- Muchas enzimas dependen de los
cofactores, sean activadores o coenzimas para funcionar
adecuadamente. Para las enzimas que tienen cofactores, la
concentracin del cofactor debe ser igual o mayor que la
concentracin de la enzima para obtener una actividad cataltica
mxima.

Mecanismos que facilitan la

catlisis enzimtica
Catlisis por proximidad: molculas se aproximan a
distancia de formacin de enlace. El aumento de
concentracin favorece el encuentro entre molculas.
Catlisis cido base: Grupos funcionales ionizables de
cadenas R y grupos prostticos facilitan catlisis al actuar
como cidos y bases.
Catlisis por deformacin: enzimas se unen
deformando o alargando el enlace a romper hacindolo
ms vulnerable
Catlisis covalente: Se forma enlace covalente entre
enzima y uno o ms sustratos. Energa de activacin es
menor por modificacin. Comn intervencin de Cisteina
y serina en cat. Covalente.

Inhibicin enzimtica
La actividad de una enzima puede ser disminuida o
eliminada completamente por la accin de ciertas
sustancias
a las cuales se las conoce con el nombre
Los inhibidores pueden clasificarse en dos grandes grupos:
genrico
de inhibidores enzimticos.
1)
Irreversibles.
2) Reversibles
i) competitivos
ii) no competitivos

REGULACIN DE LA ACTIVIDAD ENZIMTICA

Dentro de las clulas se llevan a cabo infinidad de procesos metablicos, todos
ellos relacionados entre s, de manera que deben estar controlados en forma
precisa, para que a cada instante la clula disponga de los metabolitos
necesarios para su funcionamiento
Tipos de mecanismos regulatorios de
la actividad enzimtica:
1.
Inhibicin por producto final
2.
Regulacin alostrica
3.
Regulacin por modificacin
covalente
4.
Regulacin gentica

Regulacin alostrica

Compartimentalizacin celular. La distribucin por compartimentos en

la clula ayuda a preservar el equilibrio entre defensa y energa en el
tiempo, a expensas de mltiples organelos , como lisosomas, aparato de
Golgi, mitocondrias, retculo endoplsmico y ribosomas que fungen como
terminales reguladoras de las seales bioqumicas y factores de
transcripcin que hay entre la membrana, citoplasma, ncleo y gen
(ADN).

IMPORTANCIA
La medida de la actividad enzimtica
en el suero es importante para:
Diagnstico
Monitoreo del tratamiento de
diversas enfermedades.
Detectar recuperacin luego de
ciruga
Detectar rechazo de transplantes

Determinar la actividad
enzimtica para diagnstico clnico requiere:

La enzima este presente en sangre, orina o

fludo disponible.
La enzima debe ser fcil de analizar y el
mtodo automatizado.
Las
diferencias
entre
las
actividades
enzimticas entre la condicin normal y la
enfermedad debe ser significativa.
La enzima debe ser estable para poder ser
almacenada por un tiempo limitado.

Consecuencia de la deficiencia enzimtica

Problemas de deficiencia enzimtica como

consecuencia de dao gentico.
Ejemplos de condiciones:
Fenilcetonuria: retardacin mental
Galactosemia: retardacin mental, prdida
de peso, hgado agrandado, catratas.
Anemia hemoltica: rompimiento clulas
rojas.

Terapia de enzimas
Se utiliza para :

- Remover sustancias txicas de la sangre.

- Enfermedades de deficiencia gentica.
- Cncer.
- Degradacin de tejido necrtico usando
enzimas proteolticas.
- Remocin de cogulos.
- Tratamiento de insuficiencia pancretica.