Vacunas de subunidades y

ADN
Dimas Reyes Sandra Stephanie
Franco Sols Josu Raymundo

Vacunas de subunidades
se aslan los genes que codifican para las protenas que provocan la
respuesta inmune (por ejemplo, las protenas de las cpsulas de los virus).
Mediante tcnicas de ingeniera gentica, esos genes se pueden clonar y
expresar en un husped alternativo tales como bacterias (Escherichia
coli), levaduras (Saccharomyces Cerevisiae) o lneas celulares de
mamferos.
Luego de ser insertado el gen de inters, la bacteria o levadura
recombinante comienza a producir subunidades de protenas en grandes
cantidades, las cuales son recolectadas y purificadas para utilizarlas como
vacunas.

Upstream

Bioconversin

Downstream

Vacuna de la hepatitis B

El gen HBsAg fue modificado para que la protena no se

secrete. Las levaduras transformadas por el plsmido
producen grandes cantidades de la protena viral,
alrededor de 1 al 2 % de las protenas totales de la
levadura. Al cultivar las levaduras en grandes
fermentadores, se producen entre 50 a 100 mg de
protenas por litro de cultivo. Estas protenas son
fuertemente parecidas a la protena viral natural;
formando agregados de alrededor de 20 nanmetros de
dimetro muy parecidos a los agregados immungenos
encontrados en los pacientes afectados. La protena
producida en la levadura es actualmente comercializada
y permite de vacunar contra la infeccin producida por
el HBV

Bioproceso

Fermentacin de la
levadura

Cosecha por
microfiltracin

Adicin de
inhibidor de la
proteasa

Disrupcin celular
(homogeneizador)

Extraccin con
detergente
Triton X-100
(0.2-0.5% v/v)

Aclaracin por
microfiltracin

XAD-4 para la
eliminacin de
Triton X-100

Adsorcin a la
slice coloidal

Cromatografa
de interaccin
hidrofbica (HIC)

El tratamiento
con tiocianato
de potasio+
formaldehido

Proceso de la vacuna recombinante de hepatitis B,

fabricacin que implica la fermentacin de las cepas
de ingeniera gentica de Saccharomyces cerevisiae
que contienen la codificacin de la secuencia gentica
para el antgeno de superficie de la hepatitis B
(HBsAg). Recombivax HB 1 fue la primera vacuna
recombinante aprobado por la FDA en 1986.

Formulado con
sulfato de
aluminio y
potasio.

Downstream

Levadura:
alimentacin
por lotes de
fermentacin

Cosecha

Microfiltra
cin de
flujo
cruzado

clulas
de lisis

Clulas
congeladas

Cromatograf
a de
intercambio
catinico.

Ultra
fltracin

Filtracin
estril

Proceso de purificacin inicial para el Gardasil1 (Merck)

vacuna recombinante de subunidades, que se produce en
Saccharomyces cerevisiae y requiere la ruptura celular para
liberar las partculas similares a virus.

Bibliografa:
http://genemol.org/biomolespa/levadura/levaduras.html
Vaccine Process Technology Jessica O. Josefsberg,1 Barry Buckland2
1 BioEdge Consulting, LLC, 100 Jefferson Avenue, Miami Beach,
Florida 2 Department of Biochemical Engineering, University
College London, Torrington Place, London, UK; telephone: 6463692034; fax 305-675-2713; e-mail: buckland@biologicb.com
Received 2 December 2011; revision received 24 February 2012;
accepted 27 February 2012 Published online 30 March 2012 in Wiley
Online Library (wileyonlinelibrary.com). DOI 10.1002/bit.24493
https://www.bio.fiocruz.br/images/stories/pdfs/mpti/2013/seleca
o/vaccine-process-technology.pdf