Regulacin de la Eficacia

cataltica
Los modificadores alostricos de la actividad
enzimtica. Efectos y fenmenos alostricos.
Efecto alostrico positivo y negativo.
Inhibicin Feed-Back. Importancia

BIOQUIMICA UNT
Dra. Mara Reyes Beltrn

Enzimas alostricas
monomricas: Ribonucletido
difosfato reductasa y PiruvatoUDP-N-acetilglucosamina
transferasa; la mayora son
oligomricas

ENZIMAS ALOSTRICOS
Son

enzimas que presentan dos centros

distintos a los que pueden unirse las
molculas reguladoras:
el centro activo, en donde se une el
sustrato cuya reaccin cataliza el enzima
el centro alostrico, en donde se
pueden unir sustancias, que pueden
activar o inhibir la actividad enzimtica

TIPOS DE ENZIMAS
ALOSTRICOS

ENZIMAS HETEROTRPICAS, estimuladas o

inhibidas por un efector diferente del sustrato.
ENZIMAS HOMOTRPICAS. Estimuladas o
inhibidas por el sustrato, stas tienen dos o ms
sitios de unin para el sustrato.
La mayora de enzimas son de tipo mixto,
homotrpico-heterotrpico, el sustrato y algn
otro metabolito funcionan como moduladores.

REGULACIN ALOSTRICA
Procesos a nivel celular; regulacin de ajuste fino de la
actividad enzimtica, a travs de efectos de
retroalimentacin (negativa o positiva)
Alosterismo:
Una accin sobre la actividad enzimtica que se desarrolla
fuera del Centro Activo (Jacob y Monod, 1960)
SITIO ALOSTERICO: Regin especfica del enzima
diferente del centro de fijacin del sustrato

EFECTOR, MODULADOR O
MODIFICADOR ALOSTRICO

Molculas que regulan la enzima alostrica que se fijan

de manera no covalente a un sitio alostrico
Altera la afinidad de la enzima por su sustrato, modifica
la actividad cataltica mxima de la enzima o ambas.
Los que inhiben la actividad enzimtica, son efectores
negativos y los que la incrementan son positivos

TIPOS DE EFECTORES
ALOSTRICO

Efectores Homotrpicos: Molcula idntica al

sustrato o el propio sustrato funciona como efector
positivo.
Cooperatividad. Curva sigmoidea (v0) contra (S).
Efectores Heterotrpicos: Diferente del sustrato.
Retroalimentacin. Generalmente el producto final
de una va.(Alostrico propiamente dicho)

MODELO SIMTRICO O
CONCERTADO DE MONOD (1965)

MODELO SECUENCIAL DE
KOSHLAND (1966)

La cooperatividad (positiva) consiste en que la fijacin de una

molcula de substrato favorece la fijacin del siguiente, y as
hasta ocuparse toda la molcula

+
1

s s

+
2

s s
s

+
3

s s
s s

En trminos de Km veramos que Km1 > Km2 > Km3

Existe tambin cooperatividad negativa, cuando la fijacin de
una molcula de substrato dificulta la fijacin del siguiente.

CLASES DE ENZIMAS ALOSTRICAS POR CINTICA

K efector altera la Km pero no la Vmax : doble recprocos
similar a inhibidor competitivo
V efector altera la Vmax pero no la Km : doble recprocos
similar a inhibidor no competitivo; incrementan o disminuyen
la velocidad de descomposicin del complejo ES en
productos, la constante de velocidad cataltica K 3 queda
afectada, no se modifica la constante de fijacin de sustrato

Enz K

Enz V

El comportamiento cooperativo implica:

1. Que hay ms de un sitio de fijacin de substrato

por molcula de enzima (estr.cuaternaria)
2. Que hay interacciones entre los sitios de fijacin

No cooperativo, cuando ambos ligandos se unen con la misma afinidad

p.e. K1 = K2
Cooperatividad positiva es K2 << K1, segundo ligando se une mas
fuertemente que el primero!
Cooperatividad negativa es K1 << K2 segundo ligando se une menos
fuertemente que el primero

La Cooperatividad positiva es una de las maneras de las

cuales los sistemas exhiben una unin o cintica
sigmoidea (la relacin entre unir y el porcentaje cataltico
se observa lo ms simplemente posible en el concepto
que el porcentaje es proporcional a [ES] el cul refleja la
afinidad de unin).

" uno para todos y

todos para uno!"

Inhibicion Feedback se refiere a inhibicion de una enzyma en una va

biosinttica por un producto final de ella. Elevadas concentraciones de D inhibe
conversion de A en B. Tipicamente, D se une a un sitio alosterico especialmente
distinto del sitio catalitico de la enzyma reguladora. Los inhibidores Feedback son
efectores alostericos y de manera tpica poco o no similares estructuralmente a
los substratos de las enzimas que ellos inhiben. En este ejemplo, el inhibidor
feedback D acta como un efector alostrico negativo of Enz1.
Enz 1

Enz 2

Enz 3

Ejemplo de retroinhibicin:
La conversin de la L-treonina en Lisoleucina est catalizada por una
secuencia de cinco enzimas.
La treonina deshidratasa es inhibida
alostricamente y de forma especfica
por la L-isoleucina, producto final de
la secuencia

La cintica de inhibicin por retroalimentacin

puede ser competitiva, no competitiva,
parcialmente competitiva o mixta.
mixta

Ejemplo:
Fosfofuctoquinasa

Regulador alostrico: Fructosa 2,6-bifosfato

(activador)
Regulador alostrico: ATP
(inhibidor)

CTP

ATP
-

REACCIN DE LA ASPARTATO TRANSCABAMILASA

(ATCasa)

Efecto del CTP sobre la cintica de la ATCasa

El CTP estabiliza el estado T, haciendo ms difcil la unin

del sustrato y la transicin al estado R

Efecto del ATP (activador alostrico) sobre la

cintica de la ATCasa

El ATP estabiliza el estado R, facilitando la unin del sustrato

RUTAS METABLICAS CONTROLADAS POR

RETROALIMENTACIN
Ruta
Glicolisis
Neoglucognesis
Bios. cs. Grasos
Bios. Colesterol
Bios. Purinas

Enzima
Fosfofructokinasa
FBP fosfatasa
AcetilCoA carboxilasa
HMGCoA reductasa
PRPP sintetasa

Inhibidor
ATP
AMP
AcilCoA
Colesterol
AMP,GMP,IMP

La union de ligandos a la
enzima perturba la posicin
del equilibrio entre las dos
conformaciones.

Activador alostrico:
favorece la unin del
sustrato

Inhibidor alostrico: impide

la unin del sustrato

Regulacin por Retroalimentacin e

Inhibicin por Retroalimentacin

Regulacin por Retroalimentacin:

Trmino fenomenolgico desprovisto de
inferencias mecanicistas
Inhibicin por Retroalimentacin: Mecanismo para
la regulacin de la actividad enzimtica.
Ejemplo: La HMG-CoA reductasa es afectada por
el colesterol de la dieta por regulacin por
retroaccin pero no por inhibicin, netamente es
disminuyendo la expresin del gen que codifica
su sntesis.

Hormonas actan mediante

segundos mensajeros alostricos
Impulsos nerviosos y unin de hormonas

(Primer mensajero) a receptores de

superficie celular desencadenan cambios
del ndice de reacciones catalizadas por
enzima dentro de clulas blanco.
Inducen liberacin o sntesis de efectores
alostricos especializados llamados
segundos mensajeros: 3,5-cAMP, Ca2+ ,
3,5-cGMP, polifosfoinositoles.