BACTERIOLOGIA

BACTERIAS

Se denominan bacterias a los organismos

procariotas, es decir, que no contienen un
ncleo definido.
La diferencia con los eucariotas es que el
cromosoma o genoma bacteriano es una
nica molcula circular de doble hlice de
ADN, no separada del resto del
citoplasma por una membrana nuclear.

 Las
bacterias
a
menudo
contienen
PLSMIDOS que son pequeas molculas de
ADN
circular
no
pertenecientes
al
cromosoma.

Las
bacterias
son
microorganismos
unicelulares mucho ms simples que las
eucariotas, su tamao puede variar entre 0,2
y 5 micras (milsimas de milmetro)
aproximadamente.
Las bacterias tienen una envoltura rgida o
pared bacteriana que determina su forma:
esfrica, cocos; cilndrica (alargada), bacilos;
helicoidal, espiroquetas.

 Las bacterias se agregan de diferentes formas:

cadenas
(estreptococos),
racimos
(estafilococos), conjuntos de 2 (diplococos), en
ngulo o empalizada (difteroides); una misma
especie puede presentar morfologa variable
(pleomorfismo)

La Tincin Gram (nombre del descubridor) divide

las bacterias en grampositivas o gramnegativas,
constituye
uno de los elementos ms
importantes de la clasificacin de las bacterias,
pues el hecho que una bacteria sea
grampositiva o gramnegativa depende de la
presencia de elementos importantes de la
composicin de la pared bacteriana.

 PARED BACTERIANA. Adems de dar la

forma a la bacteria, la protege por su
rgidez, de los cambios osmticos, es
permeable y permite el paso de sustancias
de bajo peso molecular.

La parte rgida de la pared bacteriana es

un compuesto llamado peptidoglicn
(polmero en forma de red formada por
largas cadenas lineales de molculas
unidas por enlaces cruzados entre ellas.

 En las bacterias gramnegativas, la pared

est formada por dos capas, y la capa
externa contiene unas molculas llamadas
lipopolisacridos,
son
txicas
denominadas
endotoxinas
y
causan
algunas infecciones graves.

En las bacterias grampositivas la capa de

peptidoglican es mucho ms gruesa y la
pared solo contiene una capa.

 En todas las bacterias, el citoplasma y la

pared bacteriana estn separados por la
membrana citoplasmtica, que es una
fina estructura compuesta de lpidos y
protenas.

Existen algunas bacterias sin pared

bacteriana, bien por que carecen ella
(Mycoplasma) o bien porque se ha
impedido su sntesis con antibiticos.

 En las bacterias existen diversas estructuras

externas que sobresalen de la clula.

1.Flagelos: filamentos largos que cuando se

mueven hacen moverse a la bacteria. Los
flagelos se sitan de forma caracterstica en
la pared bacteriana. En las bacterias con un
solo flagelo, ste se sita en general en el
extremo de las bacterias alargadas (flagelo
polar). Si existen multiples flagelos, estos
pueden estar situados como un penacho de
flagelos polares o estar dispuestos
alrededor de la bacteria.

2. Fimbrias o Pili: filamentos cortos, rgidos

y muy finos (no visibles al microscopio
ptico), responsables de la adherencia de
las bacterias a los tejidos (la adherencia
bacteriana es un requisito importante para
que se produzca infeccin). Algunos pili
estn relacionados con el intercambio de
material gentico entre bacterias.
3. Cpsula: capa de material amorfo
usualmente de naturaleza de polisacrido
que rodea la pared en muchas bacterias.
Su presencia es factor importante de
virulencia, pues dificulta la fagocitosis.

4. Esporas: formas de resistencia producidas

por bacterias de los gneros Bacillus y
Clostridium, que les permiten sobrevivir en
condiciones adversas. Las esporas son unas
estructuras densas en las que se
transforman las bacterias para resistir el
calor o la desecacin, y son muy resistentes
a la accin de los desinfectantes. Cuando
las condiciones vuelven a ser favorables,
las esporas germinan y dan lugar de nuevo
a bacterias en forma vegetativa.

TINCIONES

Son procedimientos para teir las

bacterias; permiten observar coloreadas
las bacterias que normalmente no seran
visibles al microscopio ptico por ser
transparentes. Las tinciones se efectan
generalmente sobre bacterias desecadas y
calentadas para coagular sus protenas
(fijacin).

1. Tincin de Gram: es la mas importante y

la que ms se emplea para observar las
bacterias; utiliza un colorante (violeta), un
mordiente o fijador del colorante (yodo), un
decolorante (alcohol) y otro colorante para
teir de diferente color las bacterias que se
decoloraron en la primera fase de la tincin
(normalmente en un colorante rojo).
La tincin de Gram permite clasificar las
bacterias en gramnegativas (se decoloran
con el alcohol y vuelve a colorearse con el
segundo colorante, por lo que se ven rojas)
y gram positivas (no se decoloran con el
alcohol y siguen de color azul violeta).

2. Tincin de cido-alcoholresistencia o de
Ziehl: los bacilos del gnero Mycobacterium
(por ej., el bacilo de la tuberculosis
Mycobacterium tuberculosis y el de la lepra
Mycobacterium leprae) se observan de color
rojo. Para realizar esta tincin, primero se tie
la preparacin calentndola con el colorante
rojo fucsina, despus se decolora con una
mezcla de alcohol y cido, y por ultimo se
tie otra vez con un colorante azul o verde.
Las bacterias cido-alcoholresistentes se ven
de color rojo (no se han decolorado con el
cido-alcohol) y las dems se ven azules o
verdes.

 CRECIMIENTO Y NUTRICION DE LAS BACTERIAS:

Las bacterias se multiplican por divisin binaria y
las bacterias de crecimiento rpido(Escherichia
coli) pueden llegar a dividirse cada 20 minutos.
Al crecimiento bacteriano fuera de su hbitat
natural (por ej. Cuando se realiza en el
laboratorio) se le denomina crecimiento en
cultivo.

 Un cultivo es una poblacin de microrganismos

que crece en un medio artificial y el soporte que
permite el crecimiento de las bacterias fuera de
su hbitat se llama MEDIO DE CULTIVO.
Los medios de cultivos permiten obtener
poblaciones de bacteria in vitro, es decir, en el
laboratorio, en contraste con el desarrollo de un
microrganismo en un husped viviente o in
vivo.

 Las bacterias, como todas las clulas, requieren

nutrientes para multiplicarse; el crecimiento (y
multiplicacin) de las bacterias requiere:

1. Materiales para la sntesis de sus elementos

estructurales y para su metabolismo (protenas,
lpidos, cidos nucleicos, etc).

2. Suministro de energa: en algunas bacterias, esta

energa puede obtenerse de forma sencilla,
aprovechando la luz(fotosntesis) u oxidando
sales minerales, o de forma compleja, por
oxidacin o por fermentacin (oxidacin sin
oxgeno) de compuestos orgnicos ms
complejos.

 En algunas bacterias , los materiales para la

sntesis de sus biomolculas pueden obtenerse a
partir de elementos muy simples(CO2, nitratos) y,
en otras, se requieren molculas preformadas
mucho ms complejas, que han de obtenerse a
partir de productos de degradacin de
macromolculas complejas(por ej. De protenas).

 Este tipo de bacterias para crecer en el

laboratorio necesitan medios de composicin
compleja, en cuya frmula se usan productos de
origen biolgico, se llaman BACTERIAS
EXIGENTES(algunas bacterias bacterias exigentes
pueden requerir para crecer en el medio de
cultivo de sangre, vitaminas, Lpidos especiales,
etc.

 CONDICIONES AMBIENTALES Y CRECIMIENTO

BACTERIANO
1. Agua: requerimiento absoluto para el crecimiento
de las bacterias. En general el 80% de la masa de
las bacterias es agua.
2. Oxgeno: Las bacterias difieren en sus
necesidades de oxgeno molecular para crecer.
Las bacterias que crecen en la atmosfera
habitual(aerobiosis,21% de oxgeno aprox.) se
denominan aerobias.

 Aquellas bacterias que crecen sin la presencia de

oxgeno(anaerobiosis) se denominan anaerobias.
Son bacterias aerobias estrictas aquellas que no
pueden crecer en anaerobiosis y anaerobias
estrictas aquellas que no pueden crecer en
aerobiosis; bacterias facultativas son los que
crecen en aerobiosis y anaerobiosis.

3. Anhdrido carbnico: muchas bacterias

patgenas requieren para su cultivo un contenido
de un 5-10% de CO2 en la atmosfera.
4. Temperatura: las bacterias tambin difieren en su
temperatura ptima de crecimiento. Psicrfilas:
ptimo por debajo de 20C. Mesofilas entre 20 y
40C. Termfilas: entre 55 y 80C.

 La mayora de las bacterias patgenas son

mesfilas y crecen mejor a temperaturas de
alrededor de 37C( T del cuerpo humano).
5. pH: El pH ptimo para el desarrollo de las
bacterias que producen enfermedad en el
hombre es el pH fisiolgico 7,2 - 7,4.

 MEDIOS DE CULTIVO
Los medios de cultivo son mezclas complejas de
sustancias qumicas y/o productos naturales
(protenas, sangre, suero, etc.) capaces de
soportar el crecimiento de las bacterias. Pueden
ser lquidos o slidos.
Los medios de cultivos slidos son medios de
cultivo lquidos a los que se les aade una
sustancia(normalmente agar) para que les de
consistencia.

 Los medios de cultivo slidos suelen utilizarse en

el laboratorio en unos recipientes especiales de
plstico(antes eran de vidrio) denominados cajas
de petri en forma de pequeos platos con tapa.
Al hecho de depositar una muestra en un medio
de cultivo para intentar que crezcan en el medio
los microrganismos que puedan haber en la
muestra se llama SIEMBRA.

 Medios Enriquecidos: Contienen la mayora de

factores necesarios para el crecimiento de casi
todas las bacterias, incluso las exigentes.
Estos medios suelen contener complejas mezclas
de productos biolgicos, como hidrolizados
proteicos especiales de tejidos de animales,
extractos de tejido( por ej. Infusin de corazn,
cerebro), sangre (por ej. Agar sangre),
hemoglobina( agar chocolate), extracto de
levadura, suplementos de vitaminas y coenzimas,
etc.

 Medios Definidos: Su composicin se conoce

exactamente por estar compuestos de mezclas
de sustancias qumicas puras.
Medios selectivos: se les aaden determinadas
sustancias( por ej. Antibiticos, metales,
colorantes) que favorecen el crecimiento de unas
especies bacterianas e inhiben el crecimiento de
otras.

 Medios de Enriquecimiento: medios selectivos

lquidos especialmente preparados para el
desarrollo selectivo de determinadas especies
bacterianas que pueden estar en pequea
cantidad en algunas muestras; se utilizan antes
de su aislamiento en medios slidos.
Medios diferenciales: permiten estudiar
propiedades bioqumicas de las bacterias y se
utilizan para determinar caracteres bioqumicos
que permitan identificar las bacterias.

 Medios de transporte: no son realmente medios

de cultivo, dado que su propsito es la
conservacin de muestras para estudios
microbiolgicos.
Estos medios intentan evitar la multiplicacin de
los microrganismos existentes en la muestra ,
simultaneamente, impedir que pierdan su
viabilidad(mueran) las bacterias ms delicadas
como Neisseria gonorrhoeae.

 FASES DEL CRECIMIENTO BACTERIANO

- Pueden distinguirse 4 fases:
1. Fase Lag: perodo de adaptacin antes de
comenzar a multiplicarse.
2. Fase exponencial: la multiplicacin bacteriana se
acelera enormemente y en cada generacin se
produce un nmero de bacterias proporcional a
las existentes.

3. Fase estacionaria: se alcanza cuando se

consumen los elementos nutritivos y el nmero
de bacterias se mantiene estable.
4. Fase de declive: las bacterias comienzan a morir.
Cuando el crecimiento de las bacterias se realiza
sobre medios de cultivos slidos, se obtienen
cmulos de bacterias que, al cabo del tiempo, se
hacen visibles; estos cmulos se denominan
colonias.

 GENETICA BACTERIANA
- Los cromosomas son las estructuras fsicas de las
clulas donde se sita y almacena la informacin
que es transmitida por herencia entre las
sucesivas generaciones de seres vivos.
- Cada bacteria posee un solo cromosoma, que
consiste en una nica molcula formada por una
doble cadena de ADN en forma de circuito
cerrado.

 Los cidos nucleicos son grandes molculas que

se encuentran en todas las clulas y que deben
su nombre a su abundancia en los ncleos de la
clulas eucariotas.
Los cidos nuclecos estn compuestos por
unidades fundamentales denominadas
nucleotidos.

 Cada nucleotido est constituido por:

Un azcar de tipo pentosa(dexosirribosa en el
ADN y ribosa en el ARN);
Una base nitrogenada, que puede ser:
- Bases puricas: adenina y guanina
- Bases pirimidinicas: citosina, timina y uracilo;
Un Grupo fosfato

 Para constituir los cidos nucleicos, los

nucletidos se unen en grandes molculas
llamadas polinucletidos que son cadenas de
nucletidos.
La Estructura primaria del ADN est determinada
por la secuencia de bases, y es en este orden
donde reside la informacin gentica.

 La informacin gentica reside en el ADN y est

determinada(codificada) por la secuencia (orden)
en que se sitan las bases en el polinucletido.
La unidad primaria de informacin en el ADN es
el conjunto de tres bases consecutivas, lo que se
denomina triplete.
Los ARN que encontramos en procariotas, al igual
que en eucariotas, son de tres tipos: ARN
mensajero (ARNm), ARN ribosomico (ARNr) y ARN
de transferencia (ARNt).

 El cromosoma de clulas procariotas(cromosoma

bacteriano) consiste en una sola molcula de
ADN.
El ADN se encuentra dividido en unidades
funcionales o genes.
El ADN interviene en los mecanismos de
transferencia y mantenimiento de la informacin
gentica, as como en la regulacin de sntesis
proteca.

 Durante la divisin bacteriana, la replicacin

permite la duplicacin del ADN, de modo que
cada clula hija tenga la misma informacin
gentica que su progenitora.
El proceso de replicacin es llevado a cabo por
enzimas llamadas ADN polimerasas.

 La transcripcin es el paso de la informacin

gentica contenida en el ADN al ARN, por tanto,
sus productos son: ARNm, ARNt y ARNr.
La sntesis de ARN a partir de ADN es llevada a
cabo por una enzima llamada ARN polimerasa.
La traduccin consiste en el paso de la
informacin contenida en el ARNm a protena.

 Las bacterias disponen de mecanismos de

regulacin sobre las sntesis de protenas, lo que
permite al microrganismo disponer de la cantidad
adecuada de las distintas enzimas y protenas
para sus necesidades(segn las condiciones
ambientales) y evitar la acumulacin intil de un
producto o un gasto de energa excesivo.

 Las Variaciones(cambios) que pueden aparecer

en una poblacin bacteriana son de 2 tipos:
1. Variaciones que slo afectan a sus caracteres
fenotpicos ( no heredables), generalmente como
influencia del medio ambiente externo son:
VARIACIONES FENOTIPICAS.
2. Variaciones que afectan al genoma y son, por
tanto, heredables son: VARIACIONES
GENOTIPICAS.

 MUTACIONES.- Son cambios o alteraciones en la

secuencia de nucletidos del ADN de la bacteria,
no relacionados con la transferencia del material
gentico.
Los mecanismos por los que las bacterias pueden
adquirir material gentico de otras bacterias o de
virus de bacterias son las siguientes:
transformacin, transduccin y conjugacin.

 El objetivo de la ingeniera gentica es clonar,

modificar(si es necesario) y expresar genes en las
condiciones ms ventajosas.