MTODOS DE ESTUDIO

PARASITOLOGA

Lic. TM Manuel Quintanilla C.

manuelqc8@gmail.com

IMPORTANCIA
Diagnosticar patologas
propiciando
su
prevencin y/o deteccin precoz (enteroparasitosis).
Promover el diagnstico diferencial entre posibles
patologas, dando oportunidad de tratamiento
especfico (infecciones: parasitarias, micticas,
bacterianas).
Evaluacin de una enfermedad ya instalada
contribuyendo a escoger la mejor conducta teraputica
(hidatodisis).

FASES DEL PROCESO DE

LABORATORIO

PREANALITICA

Es la que insume mayor tiempo,

solicitud, obtencin, almacenamiento,
transporte, recepcin y la que est sujeta
a mayor porcentaje de errores.

ANALITICA

Corresponde a la realizacin del

procedimiento diagnstico. Incluye
validacin de las tcnicas, calibracin de
equipos, ejecucin de controles de calidad, etc.

POSTANALITICA

Clculos, interpretacin de resultados,

validacin, emisin del informe.

METODOS
DIRECTOS

Son aquellos que ponen en

evidencia
el agente o sus
formas evolutivas, fragmentos,
antgenos, ADN, etc.

MTODOS DIRECTOS
PARASITOLGICOS

Son
los
que
permiten
visualizar
directamente
parsitos en un material
patolgico, o aislarlos del mismo.
Los parsitos pueden ser vistos estudiando
el material en fresco o mediante
coloraciones u otros artificios.

MTODOS DIRECTOS
Los materiales pueden ser tratados previamente, para
concentrar y/o mejorar la visualizacin de parsitos y
hongos en ellos.
EJEMPLOS
Coproparasitario: incluye limpieza de la suspensin de
materias fecales y enriquecimiento por centrifugacin.
Tratamiento de expectoraciones con soluciones
custicas (reblandece el mucus y aclara las
preparaciones).

EXAMEN EN FRESCO
El material se coloca sobre una lmina portaobjetos,
montado en algn medio lquido o no, cubierto con una
laminilla, para su observacin al microscopio. (40x)
Los lquidos de montaje (solucin salina fisiolgica,
hidrxido de sodio o
potasio
10-20%,
lactofenol-azul algodn, lugol, glicerina tamponada)
facilitan la observacin microscpica evitando la
distorsiones de la luz, reblandeciendo el material y/o
aumentando el contraste de los objetos buscados.

EXAMEN EN FRESCO

Quistes de E.histolytica/dispar

C. neoformans

Huevo de A.aegypti

Larva
S.stercoralis

COLORACIONES
COLORACIONES

Quiste tisular
de T.gondii

Frotis. H.
capsulatum

PANPTICAS:

Giemsa, May Grunwald- Giemsa,

hematoxilina
eosina,
otras
coloraciones hematolgicas (frotis
o cortes histolgicos).
HE
GIEMSA

Corte histolgico.
Candida spp.

Frotis. Pseudoquiste T. gondii.

COLORACIONES
ESPECFICAS
Ziehl-Neelsen, Kinyoun
Gomori, methenamino plata
(cido-alcohol resistencia)

(pared de los hongos)

Tricrmica (protozoarios
entricos, microsporidios)

Hematoxilina frrica

(membrana,
ncleos y otros ccommpponneenntes de
los protozoarios)

CULTIVOS
MEDIOS GENERALES
Sirven para el aislamiento primario de una
variedad de agentes
Pueden ser modificados con el agregado o cambio de
algn componente para darle mayor especificidad
EJEMPLOS
Sabouraud, para hongos
NNN, para protozoarios hemoflagelados

TCNICAS DE
AISLAMIENTO POR
INOCULACIN
En animales de experimentacin.
Excepcional (aunque es necesario frente a
determinados agentes de difcil identificacin o
aislamiento por otros medios, ej: Toxoplasma
gondii en lquido amnitico)
Exige seguir rigurosas normas de biotica,
bioseguridad y calidad operacional.

DETECCIN DE OTROS
COMPONENTES PARASITARIOS

Mediante diversas tcnicas tambin se puede

evidenciar:
Antgenos.
cidos nucleicos.
Otras molculas.

TCNICAS
INMUNOLGI
CAS
DIRECTAS

DETECCIN DE
ANTGENOS

CIDOS NUCLEICOS

MTODOS
INDIRECTOS
INMUNOLGICOS
Son los que permiten suponer la presencia
de parsitos en el organismo, mediante el
estudio de la respuesta del hospedero
(produccin de Anticuerpos
especficos,
reacciones de hipersensibilidad
tarda,
produccin de linfoquinas, etc.).

TCNICAS DE
PRECIPITACIN
EN GEL DE
AGAR

TCNICAS DE
AGLUTINACIN

Aglutinacin directa:

Suspensiones de parsitos enteros

son
enfrentadas a sueros de pacientes. Los Ac (Y)
presentes aglutinan los parsitos, formando
acmulos consistentes.

Aglutinacin de partculas:
(Ltex, betonita, carbn,etc.):
Suspensiones de partculas inertes, con su
superficie cubiertas de Ag parasitarios, son
enfrentadas a sueros de pacientes. Los Ac
presentes aglutinan estas partculas, formando
acmulos consistentes.

TCNICAS DE
AGLUTINACIN

TCNICAS DE
MARCADODE LA
REACCIN Ag-Ac

TCNICAS DE
MARCADODE LA
REACCIN Ag-Ac

SEGN LA
FINALIDAD
DEL ESTUDIO
Tcnicas de
screening

Utilizadas para
estudio de grandes
poblaciones.

Utilizadas para
Tcnicas
confirmar un
confirmatorias
diagnstico en
forma especfica.

CLASIFICACIN
Tcnicas
Inmunolgicas
CUALITATIVOS

CUANTITATIVOS

Positivos
o
negativos

miden la
concentrac
in del Ac
a estudiar.

CUANTITATIVO
S
TTULOS: mxima dilucin del suero problema qu
arroja un resultado positivo (Ej: 1/16; 1/128; 1/2048)

UNIDADES PREDETERMINADAS: cuando el valor

obtenido como resultado es comparado a un patrn
predeterminado de densidad ptica, fluorescencia ,
luminiscencia o concentracin conocida de Ac
especficos, que expresa el punto de corte de la tcnica
(cutoff o valor lmite que diferencia positivos y
negativos) (Ej: UI/ml; Index Value; MIU/ml; OD; etc.)

COMPORTAMIENTO DE
LAS TCNICAS
SEROLGICAS I
DESDE EL PUNTO DE VISTA ANALTICO
SENSIBILIDAD: expresa la capacidad de la
tcnica para detectar las menores concentraciones
posibles de los anticuerpos (o antgenos) buscados.
ESPECIFICIDAD: expresa la capacidad de esa
tcnica para diferenciar los anticuerpos especficos (o
antgenos) buscados de otros presentes en el material
en estudio.

COMPORTAMIENTO DE LAS
TCNICAS SEROLGICAS II
DESDE EL PUNTO DE VISTA CLNICO
SENSIBILIDAD: expresa la capacidad de la
misma para diagnosticar casos positivos en el
conjunto de personas estudiadas.
ESPECIFICIDAD: expresa, la capacidad de
determinar resultados verdaderos.

AUTOMATIZACI
N
Existen equipos electrnicos, que permiten la
automatizacin de los procedimientos y el anlisis
computacional de los resultados.
La lectura y medida de la [ Acs-Ag ] se hace
mediante
colormetros,
fluormetros,
fotmetros, etc.,
Facilitando la reproducibilidad de las tcnicas, mayor
precisin y registro de resultados, mejor cuantificacin
y valoracin de los mismos.
Disminuye los errores y permite un mejor control de

EJEMPLO
Cono fase slida y
pipeteo
Tir
a

Buffer
lavado

Muestra
Diluyente
REACCION
INMUNOLOGICA

Conjugad
o

Substrat
o

photodiod
o
REACCION
ENZIMATICA