Asimilacin de

Nitrgeno
Profesor: Alfredo Rodrguez Delfn

Universidad Nacional Agraria La Molina

Centro de Investigacin de Hidropona
Lima, PER

Takahashi, 2013

Energtica de Asimilacin de
N

Asimilacin requiere cantidades significativas de

energa para convertir compuestos inorgnicos
estables, de baja energa, en compuestos orgnicos
de alta energa.
Reduccin de nitrato a nitrito; luego a amonio,
requiere la transferencia de 10 electrones: 25% del
total de energa gastada tanto en races como en
follaje.
Plantas usan 1/4 de su energa para asimilar N, que
representa menos del 2% del PS total de la planta.

Reacciones asimilatorias en cloroplasto (estroma),

intervienen agentes reductores fuertes: NADPH,
tioredoxina, ferrodoxina, generados durante el
transporte de electrones.
Foto asimilacin: asimilacin de nutrientes y
transporte de electrones: genera un exceso de
reductores ms de lo que necesita el ciclo de
Calvin (bajo condiciones de alta luminosidad y
bajo CO2).
Plantas C4 conducen la mayor parte de su foto
asimilacin en clulas del mesofilo, donde las
[CO2] son ms bajas.

Ciclo de N

Asimilacin de Nitrato

Plantas asimilan N en races a travs de sistemas

de transporte de alta o baja afinidad.
Principal forma de asimilacin de N como sales de
nitrato o amonio.
Tambin puede ocurrir asimilacin de N orgnico
como amino cidos.
Asimilacin de N inorgnico u orgnico involucra
una serie de enzimas estrechamente relacionadas
Amonio frecuentemente es fijado en races
Nitrato es transportado principalmente hacia los
vstagos antes de ser reducido; tambin puede
ser almacenado en vacuolas.

Primera etapa: reduccin del NO3- a NO2- en el

citosol.
NO3- + NAD(P)H + H+ + 2 e-

NO 2- + NAD(P)+ + H2O

Nitrato Reductasa

Nitrato reductasa (NR) contiene 2 subunidades

idnticas, c/u con 3 grupos prostticos: FAD, HEME
y Complejo Molibdeno. Principal protena que
contiene Mo en tejidos vegetales.

Falta de Mo provoca acumulacin de nitratos.

Reaccin catalizada de por empieza con

transporte de NAD(P)H al Dominio Flavin, a travs
del Dominio Heme y, finalmente, va cofactor Mo.
Tejidos verdes tienen >>> actividad de NR que
NiR: NR tiene una tasa limitante.

Nitrato Reductasa

3 dominios funcionales:
Dominio Flavin (FAD)
Dominio Heme (Fe)
Dominio Cofactor Mo
(MoCo)

Plantas deben regular proceso de reduccin de

nitrato porque consume energa ~20% de e producidos
por
transporte
de
electrones
fotosintticos.
Tambin porque productos intermedios
de la
reduccin de nitrato (nitrito) es citotxico y
mutagnico.
Genes NR son regulados por:
nitrato
luz
azcares
Glutamato
Glutamina

Actividad de Nitrato Reductasa

en tejidos de Zostera marina

Touchette y Burkholder,
2001

Actividad de Nitrato Reductasa

en hojas de meln

RA: Tasa relativa de adicin de N

dia1

Roosta et al.,
2009

Nitrito Reductasa (NiR): convierte NO2- en NH4+.

NO2- altamente reactivo y potencialmente txico.

Clulas vegetales transportan rpidamente el NO 2generado durante la reduccin del NO3-.

Reduccin de NO2- en NH4+ en cloroplastos y

plastidios
En Hojas: desde el citosol hacia cloroplastos
En Races: desde el citosol hacia plastidios

NiR contiene 2 grupos prostticos: Fe4-S4 y Heme

NiR transfiere electrones de Ferrodoxina (Fd) al

NO2-:

NO2- + 6 Fd red + 8 H+ + 6 e

NH4+ + 6 Fd ox + 2 H2O

Ferrodoxina reducida proviene del transporte de

electrones de la fotosntesis en cloroplastos.

Nitrito Reductasa

Luz
Ferrodoxina
(reducida)
Reacciones
luminosas
en la fotosntesis

(NO2-)
Nitrito

Nitrito Reductasa
Ferrodoxina
(oxidada)

NO2- + 6 Fd red + 8 H+ + 6 e-

NH4+ + 6 Fd ox + 2 H2O

(NH4+)
Amonio

Asimilacin del Amonio

Altas [NH4+] en solucin suelo, races lo absorben

rpidamente;
transportado
y
acumulado
en
diferentes partes de la planta.

Para asimilar NH4+, la planta requiere ms energa:

consumen compuestos de reserva (almidn,
sacarosa, etc.)

Exceso NH4+ asimilado, se almacena en vacuolas,

evitando efectos txicos sobre membranas y en
citosol.

Clulas vegetales evitan toxicidad de NH4+ por su

conversin rpida en aminocidos, va:

Glutamina Sintetasa (GS)

Glutamato Sintasa (GOGAT, Glutamina-2-Oxoglutarato
Aminotransferasa)

Plantas contienen 2 GS:

en citosol
en plastidios de races o en cloroplastos.

Glutamato + NH4+ + ATP

+ Pi

Glutamina + ADP

Glutamina Sintetasa

Altos niveles de glutamina en plastidios estimula

Glutamato Sintasa, transfiriendo grupo amida a 2oxoglutarato: 2 molculas de glutamato.

Plantas contienen 2 enzimas GOGAT:

acepta electrones de NADH (NADH-GOGAT)

acepta electrones de la Ferrodoxina (Fd-GOGAT)

Glutamina + 2-oxoglutarato + NADH + H +

NAD+
NADH-GOGAT

Glutamina + 2-oxoglutarato + Fd red

Fd-GOGAT

2 Glutamato +

2 Glutamato + Fd ox

Va GS-GOGAT forman Glutamina y Glutamato

Glutamina
Sintetasa (GS)

Glutamato

Glutamina

Glutamato
Sintasa (GOGAT)

2-Oxoglutarato

2 Glutamatos

Modelo de la Absorcin y Metabolismo del NH4+ NO

Ohyama et al., 2013

Plant Biochemestry,

Una vez asimilados glutamina y glutamato, N es

incorporado en otro aminocido a travs de
reacciones de transaminacin: Aminotransferasas

Presentes en: citosol, cloroplastos, mitocondrias,

glioxisomas y peroxisomas.

Asparagina
y Glutamina
no solo son
precursores de protenas, tambin sirven para
transportar y almacenar N.

Aspartato
aminotransferasa

Glutamato

Oxalacetato

Aspartato 2-Oxoglutarato

Asparagina
Sintetasa
(AS)

Glutamina

Aspartato

Asparagina

Glutamato

Va GDH forma Glutamato (NADH o NADPH)

Glutamato
Dehidrogenasa
(GDH)

Amonio

2-Oxoglutarato

Glutamato

Integracin funcional de la vlvula malato y Metabolismo C/N a

travs del transportador 2-oxoglutarato/malato (OMT)
Cit, citrato
DCT, transportador
dicarboxilato
malate
dehidrogenasa

OMT, transportador 2oxoglutarato/malato;

TP, triosa fosfato;

Tanigushi y Miyake,

Asimilacin del Nitrgeno en la Hoja

Clula del mesofilo
cloroplasto

Taiz y Zeiger,

Sntesis de amino cidos en Planta