Produção de Biopolímeros

Alberto André R. Drummond

Profª.: Maria Antonieta P. Couto
Profª.: Andréa Medeiros Salgado
Profª.: Eliana Alhadef
Prof.: Ney Pereira Junior
Profª.:Verônica Ferreira

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 Definição

Biopolímeros são materiais fabricados a partir de

Fontes Renováveis ( soja, milho, cana-de-açúcar ,
celulose, quitina, quitosana, soro de leite, etc.) que
têm importância estratégica para o futuro,
principalmente quando utilizam ³energia renovável
em todo seu ciclo de vida´,podem ser
biodegradáveis e biocompatíveis,o que lhes
conferem vasta gama de aplicações.
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 Porque Produzir Biopolímeros?
A biodegradação não é apenas o resultado de uma
simples ação de microorganismos e as diversas condições
nas quais eles atuam estão relacionadas com todas as
características do meio
meio.. Temos a fotodegradação , a
degradação química natural e vários outros fatores
ambientais atuando em conjunto.
conjunto. Nem sempre um plástico
‰ Biodegradáveis biodegradável representa uma escolha ecologicamente
correta.. Para que um produto seja biodegradável, ele precisa
correta
‰ Biocompatíveis completar o processo de sua decomposição no máximo em
‰ Podem ser produzidos a partir um período de 6 meses à 1 ano
ano..
de alguns efluentes industriais,
principalmente das industrias
alimentícias
‰ Questões Ambientais
‰ Ampla faixa de aplicações e
propriedades
‰ Os custos de sua produção vem
diminuindo muito com o atual
interesse no setor ambiental e
de novas tecnologias disponíveis.
‰ Aplicações específicas no setor de
biomateriais e nanotecnologia
vem elevando muito seu valor
comercial .
ciclo natural do carbono
A REVALORIZAÇÃO NO PÓS-CONSUMO DE BIOPOLÍMEROS
DEVE SER FEITA POR MEIO DE RECICLAGEM MECÂNICA (p.ex.
papel, cartão, etc.), RECICLAGEM ENERGÉTICA (p.ex. bagaço da
cana) OU POR COMPOSTAGEM (p.ex. resíduos de alimentos)

EM ATERROS, OS PLASTICOS BIODEGRADÁVEIS, PRODUZEM GASES

COM EFEITO ESTUFA (CO2, Metano...) COM DESPERDÍCIO DO VALOR
ENERGÉTICO.

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A combustão de biopolímeros
leva a CO2 renovável ,mas sua
O uso de plásticos biodegradáveis não
decomposição natural pode exclui a necessidade de reciclagem e uso
levar a metano ,cuja reabsorção racional consciente .O descarte direto na
natural é mais lenta ,podendo natureza destes materiais podem também
causar problemas ambientais levar a problemas ambientais.
caso em quantidades excessivas.
Alem disto estes materiais Os biopolímeros apresentam
contem plastificantes e aditivos
que podem possuir algum efeito propriedades que os tornam
tóxico . úteis em aplicações mais nobres
 Parte do CO2 de
fonte não renovável
se acumula na
atmosfera CO2 + H2O Incineração Geração de
Energia

ATMOSFERA

Aterro Sanitário
Fotossíntese
Reciclagem
O CO2 derivado de fontes renováveis
é renovável

Descarte
'Cana de Açúcar ëso
'Extrato de Soja Coleta Seletiva
'Efluentes da Indústria de alimentos
'Resíduos Agro industriais
'Soro de Leite Preparação de Derivados
'Amido e Resíduos Vegetais ( fibras, etc. ) (monomeros) & Controle de
Qualidade
'Outros
Petróleo Refinaria Distribuição
e Comércio

Preparação e Tratamento da Síntese

Matéria Prima Fabricação Fabricação de Bens de
Polímero Consumo

Fermentação Separação / Purificação Formulação

Processamento / Formulação
Poliamida
 PLÁSTICOS A PARTIR DO AMIDO
Os Compósitos com amido e fibras vegetais tem apresentado excelentes
propriedades e abrindo novos campos de aplicações , tais como nas industrias
automobilísticas , de utensílios domésticos ,etc.

O amido se destaca pela sua disponibilidade

,biodegradabilidade ,baixo custo, e excelente
desempenho.
Potes produzidos com PHB ,onde se observa um ao
natural (cor âmbar ) e o outro pigmentado
Estrusora Industrial utilizada na produção de artefatos
a base de biopolímeros.

Microfotografia do Termoplástico obtido por processamento em

extrusora mono-rosca. Micrografia do Termoplástico obtido por Processamento em
extrusora dupla - rosca

ëso de Extrusora Dupla Rosca : Elevada tensão cisalhante e elevada relação L/ D garantem a
polimerização e melhor homogeneidade do produto final
 Estrutura do Amido
Aplicações
' Filmes para recobrimento e embalagem de alimentos
' Filmes comestíveis
' Material de enchimento para embalagens
' Filmes para sacos de lixo
' Utensílios de uso doméstico ( potes ,copos, pratos,etc)
' Aplicações na industria automobilística
' Aplicações na industria de cosméticos
' Aplicações na industria de alimentos
' Placas rígidas

Embalagem para Cenouras

± Empresas GmbH e IBAW -
( Alemanha )
 Biopolímero Protéico da Teia de Aranhas
ASAAAAAA x
GGPGQQ y
GGYGPG z
ASAAAAAA x
GGYGPG y

Estrutura do biopolímero protéico da teia
Bloco rico em Alanina € Fase Cristalina € Resistência
Bloco Rico em Glicina € Fase Amorfa € Elasticidade
‡ Alta resistência
‡ Alta Flexibilidade
‡ Extremamente Leve
‡ Biodegradável
‡ Biocompativel

Solventes
' ´cido Fórmico
' Cloreto de Guanidina
' Hexafluoroisopropanol

Coagulantes
' Ar Atmosférico
' Metanol
' Solução água-
água-Metanol
 Estratégias para obtenção da Seda Recombinante

 Expressão de gene em E. coli e Pichia

 Expressão de gene em células BHK

 Expressão de gene em células vegetais

Espécies de Aranhas  Expressão de gene em células mamárias

‡ Araneus diadematus
‡ Nephila clavipes
‡ Bombyx mori
 Fibras de teia de aranha ± um biopolímero supramolecular

A estrutura molecular dos segmentos ricos em

Polialanina P(A) nos blocos da fase cristalina (Rígida)
provavelmente apresentam fenômenos de
cooperatividade entre as interações por ligações de
hidrogênio , muito semelhante a este modelo teórico
que mostra a estrutura da Poli ±acrilamida P(Am).
Diferentes tipos de teia com diferentes
funções apresentam propriedades distintas .
þS SegRig þS SegFlex Presença de Variação na estrutura
polimérica

‡ Interações de hidrogênio entre cadeias poliméricas

‡ Favorecimento de separação de fases devido a forte cooperatividade e ligação de hidrogênio
. entre as cadeias poliméricas formadas a partir da reação entre as duas proteínas oligoméricas.
‡ Hidrofobicidade
‡ Ligações de hidrogênio inter polímero e cooperatividade € Abaixamento do þS nos segmentos
..rígidos e elevação de þS nos segmentos flexíveis.
 Células Epiteliais de
produção de seda de aranha

Algumas aplicações :

' Pára-choques para automóveis

 Tendões e ligamentos artificiais, fios para microsuturas , bandagens, pele e tecidos artificiais

 Substituto para o Kevlar Ès = Fração mássica de segmentos

Ws
Tg S Tg H ; Tg
flexíveis na fase flexível.
Tg = Temperatura de transição vítrea do
 Substituto para fibras de aramida material
Tg Tg H ; Tg S TgS= Temperatura de transição vítrea para
os segmentos flexíveis
 Fibras óticas para circuitos em nanoescala TgH = Temperatura de transição vítrea dos
segmentos rígidos .
ÈH = ( 1 ± Ès ) = Fração mássica dos
 Fibras óticas para melhorar a resolução em microscopia segmentos rígidos .

 Aplicações em equipamentos para ensaios em nanoescala (química supramolecular)

 Industria têxtil

 Membranas com elevado coeficiente de difusão para O2 e excelentes propriedades ópticas.

 Aplicações Nobres _
' Biomateriais
' Nanotecnologia
' Alimentos ( gomas ,celulose , inulina , polissacarídeos, etc.)
' Produtos farmacêuticos e cosméticos
' Industria bélica ( Biosteel e outros )
' Industria Têxtil
' Tratamento de efluentes contendo metais pesados

Biopolímeros
polímeros biocompatíveis
€ Novos Biomateriais
Os biopolímeros geralmente não
causam problemas de rejeição
sendo incorporados naturalmente
aos tecidos corporais
Alguns Exemplos:

- Composto Ósseo de Ricinus (COR )

- PLA ( implantes , fios para sutura, etc )
- Poli (3-hidroxibutirato) ou PHB ( Enxerto ósseo )
- Biopolímero de proteínas recombinante de aranha
( microsuturas , tendões artificiais )
Figura 2
Biopolímeros Obtidos a partir de Microrganismos

A partir de açúcar e bagaço de cana :

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O Polihidroxibutirato (PHB) é um composto de uma classe dos polímeros

termoplástico chamados ³polihidroxialcanoatos´ que servem a muitas
bactérias como uma maneira de armazenar dentro da célula, materiais que
podem servir de reserva para obtenção de carbono e como fonte de
energia para o caso de ausência de um dos dois.

Plantas modificadas geneticamente para produção de PHB como a

batata (Õ
 
) e tabaco (   ), podem
fornecer outros meios de produzir este Polímero, porem o
rendimento é muito menor.
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    Y
Produção em Escala Industrial € 1994
Principais Empresas :
DuPont
Coors Brewing
Dow Chemical
Cargill ±1994 ( 6000 ton/ano)
Cargill ±Dow LLC ( Joint Venture ) - 2000
100000 ton/ano ( produção de 2003 )
 PLA é um poliéster produzidos por síntese
química a partir de ácido láctico obtido por
fermentação bacteriana de glicose extraído do
milho, com uso potencial na confecção de
embalagens, itens de descarte rápido e fibras para
vestimentas e forrações.
Quando produzido pela via petroquímica esse ácido se constitui numa mistura
opticamente inativa (50/50) das formas D e L. Diferentemente, o ácido obtido
por via biotecnológica é opticamente ativo e dependendo da linhagem
microbiana utilizada, pode se obter, especificamente, uma forma ou a outra do
ácido lático, resultando em propriedades diferenciadas importantes quando
polimerizado.

Principais empresas produtoras

DuPont
Coors Brewing
Cargill
Dow Chemical
    
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‰ Produto de reserva energética

‰ Necessidade de métodos eficientes e

de baixo custo para rompimento
celular

‰ Programação da estrutura através da

limitação e associação de diferentes
substratos

 
 

Microfotografia mostrando microgranulos de poli- hidroxibutirato

Figura 4 no interior das células bacterianas .
Figura 5
 Polihidroxialcanoatos

‰ Polihidroxibutirato (PHB):
‰ Formado a partir de açúcares, ácido orgânicos e outros;
‰ Poli(hidroxibutirato-- -hidroxivalerato) P(HB
Poli(hidroxibutirato P(HB-- -HV):
‰ Necessidade de um precursor (Ex.:ácido propiônico);

Figura 6 - Duas células de Burkholderia sacchari Figura 7 - Microfotografia mostrando em

Bactéria Produtora de biopolimero termoplástico evidencia os granulos intracelulares de PHB
descoberta no Brasil em culturas de cana.

Rendimentos Teóricos em P(3HB) :

Burkholderia cepacia
Y( P / S ) = 0,13 g / g carboidratos

Cupriavidus necator
Y( P / S ) = 0,22 g / g carboidratos

Figura 8: Estrutura do co-

co-polímero P(HB-
P(HB- -HV)
Grânulos de PHAs observados por microscopia de epifluorescência após coloração com Azul de Nilo.(a)
início da fase de ³fartura´ ; (b) fim da fase de ³fartura´

Fonte : http://dequim.ist.utl.pt/bbio/76/pdf/bioplasticos.pdf
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Degradação de frascos de P(3HB-co-3HV) em água de esgoto

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 Microrganismos produtores de PHAs
Para produção em escala industrial :
â Azotobacter vinelandii
Chromobacterium violaceum
‰ Cupriavidus necator
‰ Alcaligenes latus
‰ Microrganismos recombinantes :
‰ Cupriavidus necator recombinante
‰ Escherichia coli recombinante
‰ Rhodobacter
‰ Staphylococcus spp
‰ Pseudomonas oleovorans
‰ Chromobacterium violaceum

Cupriavidus necator ( Ralstonia eutropha)

‰ Microrganismo mais utilizado

‰ Pode acumular cerca de 96 % da sua massa seca como polímero

‰ Facilidade de cultivo em substratos renováveis

Percentagem de acumulo em relação ao microrganismo empregado.
P(3HB) = poli-hidroxibutirato
P(3HB-co-3HV) = poli(3-hidroxibutirato-co-3 hidroxivalerato)
P(3HV)=Poli(3-hidroxivalerato)
P(3HHx-co-3HO) = Poli(3-hidroxihexanoato-co-hidroxioctanoato)
Fonte : LEE,1996 / Carminatti,Cristiane ; Furigo Junior,Agenor ± Produção de hidroxialcanoatos ±CT - ëFSC
Processo COPERSëCAR ± Coeficientes Técnicos
 Metabolismo da Cupriavidus necator
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Crecimento Acetil-CoA
Exceo de
balanceado
carbono

Energia xigênio
F  oro
Limitação
Enxo re
Nitrogênio

Material cel lar P( H


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1. Esterilização do Biorreator e Acessórios ( Esterilização Contínua com vapor )
2. Esterilização do meio de cultivo ( Autoclave )
3. Crescimento e adaptação do inoculo em pequeno biorreator
4. Introdução do inoculo
5. Processo de crescimento de biomassa € Aeróbico sem limitação de nutrientes e
fontes de carbono.
6. Processo de Produção de Biopolimero ( PHA ) € Pode ser Anaeróbico ou Aeróbico
com limitação de oxigênio ( baixo Kla ). Utilizamos limitação de nutrientes
essenciais ( um ou vários, como Mg, N, P, S, O2 , outros ) e excesso de fontes de
carbono ( carboidratos e ácidos carboxílicos ) .
7. Separação da biomassa contendo PHA intracelular
8. Rompimento celular ( Solventes, HLMB, Hidrociclone, moinho de bolas, etc)
9. Separação , purificação , concentração e secagem do biopolímero.

Uma forma de garantir a produção de elevadas quantidades de polímero, minimizando a

inibição por substrato, será adicionar o substrato de forma semi-contínua (³fed-batch´) ou
contínua. O reator em batelada alimentada seqüencial apresenta boa flexibilidade e
produtividade ,permitindo alterações na duração da alimentação e extensão do ciclo.
 Reações Bioquímicas para a formação do PHB por
Cupriavidus necator (R. eutropha)
å A enzima @ cetotiolase condensa reversivelmente duas moléculas de acetil CoA em acetoacetil CoA
+ A enzima acetoacetil CoA redutase por sua vez,reduz esse substrato a R-3 hidroxibutil ±CoA
3. O R-3 hidroxibutil-CoA é incorporado a cadeia polimérica pela ação da enzima PHA sintase
havendo crescimento de cadeia polimérica .

1. 2 acetil CoA R acetoacetil CoA + CoASH

2. AcetoacetilCoA +NADPH +H+ = 3 ± hidroxibutiril-
hidroxibutiril-CoA + NADP+
3. D(-
D(-) 3 -hidroxibutiril CoA = P ( 3 HB )

A produção de PHAs por culturas mistas aeróbias é especialmente elevada quando

estas são submetidas a condições transientes de disponibilidade de carbono. As
condições transientes de excesso e falta de substrato causam respostas dinâmicas
no metabolismo celular.
A produção de PHAs por culturas mistas a partir de esgotos e outros efluentes
orgânicos ricos em fósforo e carbono é muito pequena e embora o custo destes
substratos seja quase nulo , a baixa produtividade inviabiliza a produção em
escala industrial.
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O Os métodos físicos principais podem ser :
'Ultra Som
No processo de extração por solvente ,
'Congelamento/descongelamento
os mais utilizados são :
'Tensão cisalhante
'Hidrociclone È Clorofórmio
'Moinho de Bolas È Cloreto de Metileno
'HHMB ( ou também HLMB ) È Dicloroetano
'Prensa de Hughes È Carbonato de Propileno
'Pressão osmótica Diclorometano

Os métodos químicos principais podem ser :

€  Extração por Solvente No Moinho de Bolas e no HLMB a eficiência de lise é
' c Colapso alcalino função de parâmetros tal como :
' c Colapso por detergentes ‡Velocidade de agitação ( rotação da hélice )
' c Colapso por hipoclorito ‡Concentração de células
‡Diâmetro das esferas
‡Material de que é feito as esferas
‡Composição da membrana celular ( teor em quitina ,etc )
‡Tempo de residência da suspensão dentro do equipamento
‡Temperatura
 7 0 !B-!9


‰ Biomassa ( total e residual )

‰ Concentração das Fontes de Carbono ( Substratos: Carboidratos e ácidos carboxílicos )
‰ Concentração de nitrogênio amoniacal
‰ Quantificação do polímero ( teor e composição )
‰ Análise cinética:
‰ Velocidade específica de crescimento máxima
‰ Produtividade de polímero

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‰ Cromatografia Gasosa
‰ HPLC
‰ Análise Gravimétrica
‰ Espectrofotometria
‰ DSC
  
  
 

   

'@ cetotiolase
'3-cetoacil
cetoacil--CoA redutase NADPH dependente
'PHA sintase

Com fartura de nutrientes os níveis de acetil

acetil--CoA estarão altos porem com limitação de
nutrientes ,os níveis de CoA se reduzem e desencadeiam a síntese de PHA ,que é um
material de reserva energética para a célula bacteriana.
bacteriana. A Cupriavidus necator pode ser
usada para produção de vários outros biopolímeros, variando-
variando-se os substratos e as
condições ambientais.
ambientais.

 
        

  


     
A dosagem de PHA sintase é função do peso molecular do polimero formado
,contudo é dificil dosar a enzima in vivo .
 Velocidades especificas de Formação dos blocos ( meros ) de HB e HV

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Y HV C
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Teórico
Se temos o fluxo de substrato na alimentação igual a velocidade de
consumo de substrato na batelada alimentada , então teremos :

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 Crescimento em bagaço de maçã







 

 


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Produção industrial
Nos EUA ( Metabolix ):
â batelada alimentada
â acúmulo de mais de 75% em polímero
â Na ´ustria:
â bactéria Alcaligenes latus DSM 1124
â acúmulo de mais de 80% em polímero
â batelada alimentada - sacarose como fonte de carbono
â No Brasil ( PHB Industrial ) :
â R. eutropha a partir de açúcar invertido
â Aproveitando os subprodutos das usinas de cana ( energia )
3 kg de açúcar + 17,1 kg de bagaço Ô 1 kg de P(3HB)
 EXTRATÉGIAS DE MARKETING
SHAMPOO COM BIOPOLÍMEROS E FILTRO UV - 300 ML PAYOT
GR´TIS UM CONDICIONADOR COM BIOPOLÍMEROS E FILTRO UV - 300 ML PAYOT -
EDIÇÃO LIMITADA



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Polyhydroxyalkanoate (PHA)
(PHB, PHBV) Biopol Monanto-Metabolix ( ÕA
(PH
 PH
V Metabolix Metabolix/ADM ( ÕA
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V Enmat ianan (China
(PH
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Poly(lactic acid) (PLA) Natureworks Cargill-Dow LLC ( ÕA

Lacty Õhimadz (Japan
Lacea Miti Chemical (Japan
Heplon Chronopol ( ÕA
CPLA Dainippon Ink Chem. (Japan
Eco Platic oyota (Japan
PLA Galactic (
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L- PLA Prac (Netherland
Ecoloj Mitbihi (Japan

iomer L
iomer (Germany
 Fatores Principais que afetam o Custo do
Produto Final

‡ Etapas de ³Down Stream´

‡ Custo dos Substratos ( M.P. )
‡ Custos de energia

O preço dos PHAs é atualmente cerca de nove vezes superior ao do polipropileno

 
        
 
 

Estuda-se minimização de custos na etapa de

³Down Stream´
Bactérias gram-positivas facilitam o processo de down stream pois em sua
maioria não apresentam toxinas nocivas ao homem,contudo sua produtividade em
PHA é menor.

Sistemas de produção em regime contínuo certamente levarão a maiores rendimentos e menores

custos,no entanto necessita-se maior grau de otimização e maiores malhas de controle.
 CONCLUSÃO
' É possível minimizar custos da produção de PHAs pela seleção criteriosa
de matéria prima e com a utilização de consórcios bacterianos e/ou
microrganismos recombinantes.
'O uso de microrganismos recombinantes torna possível maior
flexibilidade de substratos
'O uso de efluentes e certos resíduos industriais pode minimizar custos e
tornar os PHAs mais populares o que poderá repercutir positivamente no
meio ambiente
'Na etapa de ³down stream´ a remoção de solventes e purificação do
biopolimero são as etapas mais criticas e onerosas
'O bioplástico Deve estar isento de toxinas bacterianas e solventes,pois
deve ser imunocompativel com os organismos vivos e biodegradável
'A Aplicação em biomedicina e engenharia tecidual requer elevado controle de
qualidade e programação do tempo de biodegradação ,que deve ser igual ou
próximo ao tempo de regeneração tecidual.
tecidual. Compósitos biodegradáveis e
copolímeros tipo P(
P(3
3HB-
HB-co
co--3HV) e outros são utilizados .
'Polímeros especiais tal como o polímero obtido a partir de proteinas
recombinantes de seda de aranhas e plásticos a base de amido ,abrem
espaço para aplicações inéditas e um campo de atuação comercial ainda
praticamente inexplorado.

'Quando comparada ao mercado americano ,o Brasil apresenta custos

menores para a produção de PHAs , gomas e biopolímeros de amido .
O processo de produção dos bioplásticos de amido no Brasil empregam
menores quantidades de matéria prima mais barata e com maiores
rendimentos ( maior conversão M.P. € polímero ) ,porem os custos de
produção são próximos aos produtores do exterior o que torna o produto
nacional menos competitivo no mercado internacional ,embora o custo do
amido nacional seja bem menor que o amido europeu ou norte americano.
Elevados custos de transportes e taxas de exportação diminuem a
competitividade do produto nacional ,perdendo-se mercado. O mesmo
ocorre com nossa produção em PHAs e outros biopolimeros que apesar dos
maiores custos de produção ainda enfrentam estes mesmos obstáculos.

Interesses políticos e empresariais a nível internacional são fatores importantes na

equação que define os custos e a produção industrial nacional em produtos de
alta tecnologia e isto inclui os biopolímeros .
 Algumas Bibliografia Consultada
1. http://dequim.ist.utl.pt/bbio/76/pdf/bioplasticos.pdf

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Stefan Winkler and David L. Kaplan

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  $$%D. Bittencourt , B.M. Souto,
N.C. Verza, F. Vinecky, K. Dittmar, P.I. Silva Jr., A.C. Andrade, F.R. da Silva, R.V. Lewis and E.L.
Rech.

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$%David Porter and Fritz Vollrath.

5 http://www.ider.org.br/oktiva.net/1365/nota/57973/

6 http://www.degradable.net

7 http://www.anbio.org.br/pdf/2/tr06_biopolimeros.pdf

8 http://www.oepm.es/internet/Inftecn/opti/optiagro0303.pdf

9 http://www.tede.ufsc.br/teses/PEAL0050.pdf

10 http://www.abc.net.au/science/news/stories/s461157.htm

11 http://www.wipo.int/pctdb/en/wo.jsp?IA=WO2005045122&DISPLAY=DESC

12 http://www.abam.com.br/artigos/Ceteagro%20-%20%20%20Biopolimeros%20de%20amido.doc

13 http://www.abam.com.br/livroscargil/Capitulo%203/VOL3-CAP%2018.pdf
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