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BIOTRANSFORMACIN Y

DESINTOXICACIN DE LA
TOXINA T-2 POR SUELO Y
BACTERIAS DE AGUA
DULCE
BIOTRANSFORMACIN Y
DESINTOXICACIN DE LA TOXINA T-2 POR
SUELO Y BACTERIAS DE AGUA DULCE
Las comunidades bacterianas aisladas de
muestras de suelos y aguas con orgenes
geogrficos muy diversos utilizaron la toxina T-2
como nica fuente de carbono y energa para el
crecimiento. Estos aislamientos desintoxicaron
fcilmente la toxina T-2 segn se evalu. Las
comunidades bacterianas capaces de
desintoxicacin y biodegradacin se
enriquecieron a partir de muestras de suelo y
agua dulce, y sus capacidades de desintoxicacin
se seleccionaron mediante un bioensayo descrito
recientemente basado en la sensibilidad de la
levadura Rhodotorula rubra.
El inters en las transformaciones microbianas
fue estimulado por el descubrimiento de una va
de desintoxicacin para la toxina T-2, dos
tricotecenos naturales que se encuentran en los
cereales mohosos, a sus respectivas formas no
txicas de epoxi.
Se discute la eficacia de las comunidades
bacterianas de ubicaciones geogrficas muy
diversas en la desintoxicacin de la toxina T-2,
junto con algunas caractersticas de las
estructuras de la comunidad mediante un
bioensayo de Rhodotorula rubra.
MATERIALES Y MTODOS
Productos qumicos: La toxina T-2, 4-
dimetilamino piridina, el cloruro de 3-
nitrobenzoilo y la 4-nitrobencil.Todos los dems
productos qumicos o disolventes eran
qumicamente puros o de calidad analtica. Se
recogieron muestras ambientales para el
aislamiento de enriquecimiento de
microorganismos desintoxicantes de toxinas T-2.
Las muestras de suelo se agitaron con agua
destilada y se utilizaron muestras de agua
directamente como inculo para cultivos de
enriquecimiento.
Aislamiento de enriquecimiento: Se
utilizaron inculos de suelo y agua para
establecer cultivos enriquecidos en un medio
basal, suplementado con los siguientes
oligoelementos KI, CUS04 y MnSO . El curso de
la biotransformacin de la toxina T-2 fue seguido
por cromatografa en capa fina (TLC) y
cromatografa lquida de alta resolucin (HPLC)
de sobrenadantes de cultivo. Los sobrenadantes
se agitaron tres veces con volmenes iguales de
acetato de etilo , y se analiz la fase orgnica. La
eficacia de este procedimiento de extraccin ha
sido demostrada por Yagen et al
Bioensayo para la toxina T-2: La toxicidad de los
medios de cultivo y otras muestras que contienen
tricoteceno se determin mediante un bioensayo de
R. rubra basado en el mtodo de Stone et al. El
rubro NRRL Y-7222 (mutante UV1 / 11) fue
sensible a la toxina T-2 en el intervalo de 2 a 10 g
ml- 1. Los discos de papel de filtro se remojaron con
10 \ mu l de cultivo de enriquecimiento, se secaron
al aire, y despus Tratada con 10 pul de cloroformo
para lisar las bacterias presentes en la muestra.
RESULTADOS
Deteccin de la actividad desintoxicante de la
toxina T-2. De las muestras ambientales,
produjeron crecimiento despus de la incubacin
en medio de sales basales de toxina T-2. Durante
y despus del aislamiento del enriquecimiento en
lotes, la toxicidad del medio de cultivo se
determin por bioensayo. R. rubra era sensible a
las concentraciones de toxina T-2 por encima de
2,5 pg mnl1, con un lmite inferior de sensibilidad
entre 1,0 y 2,5, ug ml
Para el crecimiento y la desintoxicacin de T-2 en
funcin del tiempo de incubacin. Los cultivos de
enriquecimiento que muestran una mayor
turbidez se volvieron no txicos para R. rubra
entre 24 y 96 h, dependiendo de la fuente
particular de enriquecimiento .El tiempo
necesario para la desaparicin de la toxicidad de
R. rubra disminuy con el posterior subcultivo del
cultivo de enriquecimiento original.
DISCUSIN
Se inform recientemente que la toxina T-2 poda
ser transformada por cultivos axnicos de 12
bacterias aerbicas gram-positivas enriquecidas
en ambientes del suelo, aunque no se
proporcionaron detalles de los tipos y orgenes del
suelo o del nmero de enriquecimientos positivos
obtenidos. El cribado para la desintoxicacin de
la toxina T-2 se facilit mediante el bioensayo de
R. rubra, debido a que los productos de
transformacin de tricoteceno resultantes eran
no txicos para esta levadura, permitiendo de
este modo un ensayo selectivo para la toxina T-2.
La amplia gama de muestras ambientales
utilizadas en nuestro estudio se origin en cuatro
reas geogrficas diferentes, y dentro de estas
reas una variedad de tipos de suelo y agua
fueron examinados. Concluimos que
concentraciones relativamente altas de toxina T-2
pueden ser rpidamente transformadas en
diversos ambientes naturales y artificiales
representativos de ubicaciones geogrficas muy
amplias y que esta transformacin produce
tricotecenos y mineralizacin progresivamente
menos txicos.

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