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Noes de Toxicologia

Laboratrio de Qumica Orgnica


Tpicos
Conceito de Risco e Avaliao de Risco
Risco de Intoxicao
Toxicologia e termos afins
Rotas de Absoro
Classificao da Toxicidade de Agentes Qumicos
Testes Toxicolgicos
Dose Letal 50
Substncias com potencial carcinognico, mutagnico e
teratognico
Algumas fontes de consulta
Risco = Possibilidade de Perigo

Risco Ocupacional

possibilidade de perigo
no
ambiente de trabalho
Riscos em Laboratrios de Qumica
Exploses
Incndios
Acidentes
Cortes
Ferimentos

Laboratrio Substncias
Risco Intoxicao
de Qumica Custicas

Contaminao
Avaliao de Risco
1a Etapa
Avaliao do Potencial de Periculosidade Qualitativo

2a Etapa
Avaliao do Potencial de Exposio Quantitativo
Potencial de Risco e
Gerenciamento de Risco
Toxicologia
Definio clssica:

a cincia que estuda ou trata dos txicos.


Mas, o que so txicos?
Toxicum, em latim, significa veneno.
Veneno = qualquer agente capaz de produzir dano ou
morte, quando ingerido ou absorvido.
Reescrevendo a definio:
a cincia que estuda ou trata dos venenos.
Paracelsus (1493-1541)
Todas as substncias
so venenos; no
existe uma que no
seja um veneno. A
dose certa diferencia
um veneno de um
remdio.

Paracelso, pseudnimo de Phillipus Aureolus Theophrastus Bombastus von


Hohenheim - famoso mdico, alquimista, fsico e astrlogo suo.
Definio Moderna de Toxicologia
Cincia que estuda os efeitos adversos de
agentes qumicos (e fsicos) em sistemas
biolgicos (vivos).

Toxicologista
Quem examina a natureza dos efeitos adversos e
avalia a probabilidade de sua ocorrncia.
Efeitos Adversos
Alterao anormal, indesejada ou danosa aps
exposio a uma substncia potencialmente txica
Agentes Qumicos = Substncias
Toxicante ou intoxicante
Toxinas origem biolgica (plantas, animais, bactrias, fungos)
Xenobiticos origem antropognica
Agentes Fsicos
Radiao Ionizante ou no
Calor ou frio excessivo
Choques
Classificao da Toxicidade de um
Agente Qumico
Local

Por Local de Ao
Sistmica

Toxicidade Aguda

Por Tempo de Exposio Sub-Aguda

Sub-crnica

Crnica
Principais Rotas de Absoro

Absoro = Entrada de uma substncia no sistema


vascular
1a Intravenoso
2a Inalao (gases, vapores e poeiras < 10 m)
3a Intraperitoneal
4a Subcutneo
5a Intramuscular
6a Intradermal
7a Oral
8a Tpico (pele e olhos)
Vias Intramuscular, Subcutnea e
Intradrmica
Corte Esquemtico da Pele
stratum corneum
As fases da intoxicao
I-Exposio II-Toxicocintica III-Toxicodinmica IV-Clnica

Contato Processos de Natureza da ao


e transporte:
vias de introduo Absoro
Distribuio
Eliminao
Biotransformao
Toxicante Toxicidade Intoxicao

Disponibilidade Biodisponibilidade Sinais


qumica e concentrao em rgos-alvo e sintomas
Classificao por tempo de exposio

Aguda..................................< 24 h
Sub-Aguda...........................< 1 ms
Sub-crnica..........................1< t < 3meses
Crnica..................................> 3 meses
Classificao relacionando a durao da exposio e o
aparecimento da sintomatologia

Intoxicao Aguda
Efeitos adversos que se desenvolvem rapidamente aps
exposio de curta durao. A dose administrada pode ser
nica ou mltipla, num perodo que no ultrapasse 24h.

Intoxicao Sub-aguda/Sub-crnica
Efeitos adversos que ocorrem como resultados de doses
frequentes ou repetidas de uma substncia num perodo de
vrios dias ou semanas, ou exposio substncia durante
parte do tempo de vida do organismo (< 10%).
Intoxicao Crnica
Efeitos adversos que ocorrem como resultado de
doses dirias repetidas ou exposio a uma
substncia durante uma grande parte do tempo de
vida do organismo (> 50%). Com animais de
laboratrio, o perodo de exposio geralmente
maior que 3 meses.
Estudos de exposio crnica por 2 anos so
feitos para se avaliar o potencial carcinognico de
substncias.
Testes Padronizados
Protocolos Harmonizados
OECD (Organisation for Economic Co-operation and
Development)
EPA (Environmental Protection Agency EUA)
Toxicidade Dermal
Toxicidade Inalatria
Toxicidade Oral
Testes de Mutagenicidade
Testes de Teratogenicidade
Testes de Carcinogenicidade
Qual o ponto de partida ? Determinao da DL50
Dose Letal 50 (LD50 median lethal dose)
DL50 a dose que mata exatamente metade de uma
populao de animais, geralmente no perodo de 7 a
14 dias.
Unidades

Massa ou Volume de droga


Unidade de massa corporal do animal testado

CL50 a concentrao letal Testes de toxicidade inalatria


Toxicidade para organismos
aquticos
Teste com Artemia salina
A verificao de atividade citotxica
pode ser feita utilizando como
modelo a toxicidade a Artemia salina
Leach
Ovos de A. salina so postos para
eclodir em soluo salina, por 48
horas com aerao constante e
expostos a luz diurna.
O extrato bruto ou substncia pura
solubilizado em dimetilsulfxido e o
volume completado com a soluo
salina (1000ppm). A partir desta
soluo so preparadas as diluies
(em triplicatas).
A cada tubo so adicionadas 10
larvas de A. salina (2 estgio larval).
Os tubos sero mantidos sob
iluminao e as larvas sobreviventes
sero contadas aps 24 horas.
Qual o significado da DL50?
Aspirina

COOH
DL50 = 1,5 g/kg O CH3
camundongos e ratos
O
via oral
Aps administrao oral de 1,5 g ...50% da populao morre em ~1
de AAS por kg de peso animal... semana ou existe a chance de 50%
dos organismos morrerem.
A DL50 uma medida mais segura que a DL100
Freqncia
30
nmero de
indivduos que
25
apresentam
resposta
20

15

Muito Sensveis Maioria da


10
Populao Muito Resistentes
5

0 10 20 30 40
Dose letal (unidade hipottica)
DL50 de algumas substncias de uso comum

Substncia Animal (via oral) DL50


Acetaminofen Camundongo 0,34 g/kg
cido Actico Rato 3,53 g/kg
Aspirina Camundongo/Rato 1,5 g/kg
Cafena Camundongo 0,13 g/kg
Etanol Rato 13 ml/kg
Glicose Coelho (intravenoso) 35 g/kg
Nicotina Camundongo 0,23 g/kg
Cloreto de sdio Rato 3,75 g/kg
Camundongo - designao dada, Rato - nome geral dos
no Brasil, espcie Mus mamferos roedores da famlia
musculus ( Linnaeus, 1758) Muridae Acomys cahirinus

Hamster - designao comum a Porquinho-da-ndia (Cavia porcellus)


diversos pequenos mamferos (ou pre) um roedor sul-americano
roedores, da sub-famlia Cricetinae da famlia dos cavideos
DL50 e CL50
no so constantes para uma mesma
substncia

Vias de Administrao

Espcies Respostas

Sexo
Vias de Administrao Respostas

DL50 da Nicotina em camundongos

Oral........................230 mg/kg
N Intraperitoneal......... 9,5 mg/kg
H
CH3
N Intravenosa.............. 0,3 mg/kg
Espcies Diferentes Respostas Diferentes

DL50 Ipomeanol - produzido em batatas doces (Ipomoea


batatus) pelo fungo Fusarium solani (F. javanicum) causa um tipo
de pneumonia e possui hepatotoxicidade
Intraperitoneal Soluo 25% O OH

Coelho.......................40 mg/kg
Camundongo.............20 mg/kg O
Rato...........................12 mg/kg
Hamster.....................140 mg/kg
Porquinho da Guin...30 mg/kg
Sexo Diferente Respostas Diferentes
O

CH3CH2O P O NO2

OCH2CH3
Ratas................4 mg/kg
Parathion
Ratos................13mg/kg
DL50 e CL50
No servem com parmetros para avaliao da toxicidade
sub-letal.
No fornecem informaes sobre a curva dose-resposta.
100
% Indivduos
Mortos
75

50

DL50
25

0
0 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 Dose
( unds. hipotticas)
Substncias A e B possuem a mesma DL50
Entretanto apresentam diferentes respostas
toxicolgicas. B
Resposta

DA i DB i Dose
Fatores que Afetam a Toxicidade
Fatores Individuais Interao entre
Idade Agentes Qumicos
Muito jovens e muito Sinergismo
velhos tendem a ser
mais sensveis s
Potenciao
drogas. Antagonismo
Hbitos pessoais
Alimentao
Fumante ou no
Alcoolismo, etc.
Sinergismo
2+3 = 20
Quando o efeito combinado de dois
qumicos muito maior do que a soma dos
efeitos de cada um administrado
isoladamente.

Exemplo: CCl4 e CH3CH2OH


hepatotoxicidade
Potenciao
2 + 0 = 10
Quando uma substncia, que no tem efeito
txico em determinado rgo ou sistema,
associada a outro qumico o torna muito
mais txico.
Exemplo: CCl4 - hepatotxico
(CH3)2CHOH no hepatotxico
Antagonismo
4 + 6 = 8 ou (+4) + (-4) = 0 ou 4 + 0 = 1
Substncias que quando combinadas
diminuem o efeito mensurvel de cada
uma. ( o princpio de muitos antdotos.)
O Antagonismo pode ser:
Qumico
Funcional

Competitivo

No Competitivo
DL50 das Substncias mais Letais Conhecidas
Substncia DL50 (mg/kg)(ratos e camundongos)
Toxina Botulnica A ............................... 3 x 10-8
Toxina Tetnica A.................................... 5 x 10-6
Toxina Diftrica........................................ 3 x 10-4
TCDD......................................................... 3 x 10-2
Muscarina.................................................. 2 x 10-1
Bufotoxina.................................................. 4 x 10-1
Sarin.......................................................... 4 x 10-1
Estricnina................................................. 5 x 10-1
Cloreto de Tubocurarina......................... 7 x 10-1
Parathion................................................. 4 (ratas)
Aflatoxina B1........................................... 10
Cianeto de sdio....................................... 15
Solanina................................................... 42
Toxina do Botulismo
(Clostridium botulinum)

DL50 = 3,0 x 10-8 mg -------------1 kg de peso animal

Considerando que 1 adulto pesa em mdia 70 kg


DL50 = 210 x 10-11 g------------------ 1 adulto
1 colher de ch = 5 g ------------ ?

? = 24 x 108 adultos 1/4 da populao mundial


Toxicidade Crnica
So efetuados estudos para determinao da toxicidade
cumulativa dos agentes qumicos que incluem avaliao do
potencial carcinognico. Nesses estudos a maioria das normas
impe o uso da mxima dose tolerada (MTD).

Carcinogenicidade Avaliao do potencial oncognico


de um agente qumico.
Teratogenicidade Estudos dos efeitos adversos sobre
organismos em desenvolvimento.
Mutagenicidade Determinao da capacidade dos
agentes qumicos para induzir alteraes no material
gentico do ncleo das clulas, que so transmitidas
durante a diviso celular.
TCDD ou Dioxina
Cl O Cl

Cl O Cl

2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina

Potencial Carcinognico
Aflatoxina B1
O O O
O
O O O
H H
citocromo P450 DNA
O O ADUTO
epoxidaoenzimtica
O H O OCH3
H OCH3

Aflatoxina Potente carcingeno de


B1 fgado
Aflatoxina B1 um contaminante potencial de produtos agrcolas
como cereais e amendoim, quando armazenados com umidade e calor.
Produzida por certas cepas do fungo Aspergillus flavus, torna-se
carcinognica aps etapa oxidativa do processo metablico de sua
eliminao.
3,4-Benzopireno
O
epoxidao DNA
ADUTO
enzimtica
HO
OH

3,4-Benzopireno Cncer gastrintestinal

3,4-Benzopireno ou Benz[a]pireno um dos hidrocarbonetos


aromticos policclicos com atividade carcinognica. Aps ativao
metablica, que parte do processo de eliminao, o metablito
ativo reage com stios nucleoflicos do DNA.
POPS Persistent Organic Pollutants
Cln Cl n
http://www.pops.int/
PCBs
http://www.chem.unep.ch/pops/

Aldrin DDT
Relao Estrutura-Atividade
Metais: As (em vrios estados de oxidao)
Cr6+ (Cr3+ no carcinognico!)
Agentes alquilantes: aziridina, dibrometo de etileno
Hidrocarbonetos: benzeno, cloreto de vinila
Hidrazinas e Carbamatos: hidrazina, uretano
Aminas aromticas: benzidina, 2-naftilamina
Nitrilas insaturadas: acrilonitrila
Relao Estrutura-Atividade
Metais: AsO3 ; Cr+6 ( Cr+3 no carcinognico!)

K2Cr2O7

Agentes alquilantes: aziridina, dibrometo de etileno

Br Br
N H H2 C CH2
Hidrocarbonetos: benzeno, cloreto de vinila

Cl
H2C CH

Hidrazinas e Carbamatos: hidrazina, etil carbamato

O
H2N NH2 H2N C CH2CH3
Aminas aromticas: benzidina; 2-naftilamina

NH2
H2N NH2

Nitrilas insaturadas: acrilonitrila

CH2 CH C N
Teratogenicidade
(-)-Talidomida
O

N * O
N
O O H

Teratognica
Importncia da configurao absoluta na atividade
biolgica
Em 1960, quando ocorreu a
tragdia decorrente do uso
indiscriminado da forma
racmica do sedativo
talidomida por gestantes,
resultando no nascimento de
aproximadamente 12.000
crianas deformadas.

Posteriormente, o estudo do metabolismo da talidomida


permitiu evidenciar que o enantimero (S) era seletivamente
oxidado levando formao de espcies eletroflicas reativas
do tipo areno-xido, que reagem com nuclefilos bioorgnicos,
induzindo teratogenicidade, enquanto o antpoda (R) era
responsvel pelas propriedades sedativas e analgsicas.
Teste de Ames

His Substncia
Mutagnica

Salmonella typhimurium
dependente de His
Prof. Dr. Bruce N. Ames
Universidade de Berkeley - USA
Identificao de Agentes
Mutagnicos
Teste de Ames
Salmonella typhimurium mutantes
dependentes de histidina so semeadas em
meio pobre em histidina.
Agente mutagnico

Reverso da mutao

Bactrias com capacidade de sintetizar


histidina.
Teste Positivo
Outros ndices
MAC - Maximum Allowable Concentration
TLV - Threshold Limit Value
Representa um nvel abaixo do qual todos os
trabalhadores podem ficar repetidamente expostos
sem apresentar efeitos adversos, considerando
uma jornada de 8h/dia durante 5 dias da semana.
TLV = 200 ppm = 200 parte da substncia so
permitidas em 1 milho de partes de ar.
Exemplo: CCl4 TLV 10 ppm
DL50 intraperitoneal = 4620 mg/kg
Fontes de Consulta
ndice Merck
Sites
Osha Occupational Safety and Health Administration
EPA
IARC International Agency for Research on Cancer
www.iarc.fr
OECD
IRPTC/UNEP http://www.chem.unep.ch/irptc/
Banco de Dados
NIH National Institutes of Health http://toxnet.nlm.nih.gov
Livros de Toxicologia
GLOSSARY FOR CHEMISTS OF TERMS USED IN TOXICOLOGY
http://sis.nlm.nih.gov/enviro/glossarymain.html
No existem substncias seguras.

Existem formas seguras de utiliz-las.