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ESBL no Brasil
Infeces por amostras produtoras de ESBL SURTO
Mtodos fenotpicos para deteco das amostras produtoras de ESBL
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Testes para Deteco de Cepas Produtoras de ESBL
ndice
Principais Problemas
Enterobactrias
Resistncia s cefalosporinas de amplo espectro
Resistncia aos carbapenens (rara)
Grande diversidade
Transmisso e disseminao
Diviso binria
DNA Cromossomal Cl. Me para cl.
filha
Conjugao entre
bactrias de
espcies diferentes
DNA
Extra-Cromossomal
Conjugao entre
bactrias da
mesma espcie
Deteco de -lactamases
+ -
Disco de Nitrocefin
+ -
-lactamases de espectro ampliado
(extended-spectrum beta-lactamase)
% (N) N(%)
8 100 (6/6) 33 (2/6)
4 67 (2/3) 0 (0/3)
2 33 (1/3) 0 (0/3)
1 27 (3/11) 18 (2/11)
Total 54 (15/28)
ESBL no Brasil
Disco difuso
Meio de Mller-Hinton
Utilizar discos de ceftazidima e cefotaxima sozinhos e os
associados ao cido clavulnico
POSITIVO
Aumento do halo 5 mm da associao
CAZ/AC ou CTX/AC vs. halo de CAZ ou CTX
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Teste confirmatrio recomendado pelo CLSI
Teste de adio de IBL
Disco difuso
cido Clavulnico
Preparar soluo estoque 1000 l fresca ou congelada a
70C
Adicionar 10 l desta soluo sobre os discos de CAZ e
CTX uma hora antes do teste
Controle de Qualidade
- Positivo: K. pneumoniae ATCC 700603
- Negativo: E. coli ATCC 25922
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Teste de adio de IBL
CLSI, 2005
Mtodos dilucionais
Meio de Mller-Hinton com a concentrao de ctions
ajustada
Concentraes dos antimicrobianos:
ceftazidima: 0.25-128 g/ml
ceftazidima/cido clav.: 0.25/4-128/4g/ml E
cefotaxima: 0.25-64 g/ml
cefotaxima/cido clav.: 0.25/4-128/4g/ml
POSITIVO
Reduo 3.0 diluies
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Teste confirmatrio recomendado pelo CLSI
Teste de adio de IBL
CLSI, 2005
Mtodos dilucionais
Controle de Qualidade
Positivo: K. pneumoniae ATCC 700603
Negativo: E. coli ATCC 25922
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Teste de adio de IBL
Vantagens
Teste simples;
Fcil interpretao;
Custo
Limitaes
Preparo e armazenamento da
soluo estoque de cido
clavulnico;
Caracterizao errnea
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Discos combinados
2
3
1 4 1.Cefpodoxima,
2. Cefpodoxina + c. Clavulnico,
3. Ceftazidima,
6 4. Ceftazidima + c. Clavulnico,
5
5. Cefotaxima
6. Cefotaxima + c. Clavulnico
2
3
1
4
6
5
1. Cefpodoxima, 2. Cefpodoxina + c. Clavulnico,
3. Ceftazidima, 4. Ceftazidima + c. Clavulnico,
5. Cefotaxima 6. Cefotaxima + c. Clavulnico
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Discos combinados
Vantagens
Teste simples;
Fcil interpretao;
Custo
Limitaes
Substrato (novo disco com
cefpiroma);
No deteco de amostras
produtoras de SHV-6
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Discos combinados
Sensibilidade
Ceftazidima = 86% Cefotaxima = 65.5%
Combinados = 93%
Sensibilidade/Especificidade (%)
Enterobacter aerogenes
CAZ/clav: 94% e 100%
CTX/clav: 94% e 100%
CPR/clav: 94% e 100%
CAZ/clav + CPR/Clav: 100% e 100%
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Discos combinados
Discos da Oxoid
Cefotaxima e cefpodoxima: S e E = 100%
Etest ESBL
S = 96% e E = 100%
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Disco-difuso dupla ou teste de aproximao
Jarlier, 1988
CPM
AMX/AC
CAZ CRO/
CTX
Distncia
de 30 mm
ATM
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Disco-difuso dupla ou teste de aproximao
Jarlier, 1988
Teste Positivo
Teste Positivo
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Disco-difuso dupla ou teste de aproximao
Vantagens
Teste simples;
No necessita de reagentes
especiais
Limitaes
Distncia entre os discos;
Armazenamento dos discos
com cido clavulnico;
Interpretao
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Etest
Fitas disponveis
Ceftazidima, cefotaxima e cefepima
Critrio de positividade
Reduo 3.0 diluies
Razo TZ/TZL > 8
Razo CT/CTL > 8
TZ = 32 TZL =2
32 16 8 4 2
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Etest
Zona Fantasma
Zona Fantasma
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Etest
Vantagens
Teste simples;
Limitaes
Substrato especfico;
No deteco de amostras,
cuja as MICs situem acima das
diluies testadas;
Custo
Deteco de amostras produtoras de ESBL
Mtodos Automatizados
Vantagens
Padronizao intra- e inter-
laboratorial;
Limitaes
Substrato especfico;
No deteco de amostras,
cuja as MICs situem acima das
diluies testadas;
Custo
Deteco de amostras produtoras de ESBL
K. pneumoniae ATCC 700603 CQ ESBL +
CLSI, 2005
Avaliao da Sensibilidade e Especificidade
de Diferentes Testes para Deteco de
Cepas Produtoras de ESBL
Reis et al., J Bras Patol Clin 37:43, 2001.
Sugesto
D
CRO CFO
CAZ
Verificar a identificao;
IMBL
CAZ IMP
Distncia
de 4-5 cm Distncia
de 15-25
IMBL mm
EDTA 5 l 100 mM
2-MPCA puro 2 a 3 l
Deteco de amostras produtoras de
Metalo--lactamases
NEGATIVA POSITIVA
Deteco de amostras produtoras de Metalo- -
lactamases - Adio de EDTA
Critrio de
positividade: 5 mm?
IMP/EDTA
IMP
Deteco de amostras produtoras de
Metalo- -lactamases - Etest
Controles de Qualidade