Modulo #3 Cultivo de Microalgas

4.
- CULTIVO DE
MICROALGAS
a.- Definicin.
b.- Requerimientos Fsicos.
c.- Requerimientos Qumicos.
d.- El Cultivo de microalgas
a.- DEFINICIN: CULTIVO DE MICROALGAS
Es la aplicacin de distintos
procedimientos y tcnicas,
que permitirn el crecimiento
y produccin sostenida de
microalgas, en las cantidades
y densidades requeridas para
el adecuado proceso de
alimentacin de los cultivos
principales o de apoyo que se
realizan en un criadero o
Harchery. Ejemplo: Esquema
de Cultivo de larvas de
Colososma Macropomum
Gamitana
CULTIVO PRINCIPAL
A A
L L
I I
M
M
E
E
N
LARVAS DE GAMITANA N
T
A T
A
ALIMENTA
ROTIFEROS MICROALGAS
CULTIVOS DE APOYO
PRINCIPALES CARACTERISTICAS DE LAS
MICROALGAS CULTIVADAS PARA ACUICULTURA.
a.- RUSTICIDAD.- Las

especies deben de ser
resistentes para
desarrollarse en
condiciones medio
ambientales de cultivo
mnimas y con nutrientes
bsicos y econmicos. Ejm.
Nitrato de sodio 75 mg/L
Fosfato de sodio 5 mg/L
-UREA O CARBAMIDA (NH2)2CO
0.030 g/L
-FOSFATO DIAMNICO
0.005 g/L
b.- VALOR NUTRICIONAL.- Las Especie Protenas Glcidos Lpidos

(%) (%)
microalgas se caracterizan por alto
contenido nutricional y
perfectamente balanceado, con la Chlorella 34 6 16
cantidad de agua necesaria, y en calcitrans
perfecto estado de frescura (vivos)
y totalmente inocuos. Chlorrella 12 4,7 7,2
Todo alimento con % de protena gracilis
mayor a 20% se considera como
alimento PROTEICO.
Dunaliella 20 12,2 15
El espectro del contenido de tertiolecta
aminocidos esenciales ( alalina,
metionina,isoleusina,leusina,fenilal
alina etc), debe estar en Isochrysis 29 12,9 23
galbana
concordancia con la especie a
alimentar si es de agua dulce:
Gamitana=microalga de agua dulce Valor nutricional de varias especies utilizadas en
( Scenedesmus, Chlorella) acuicultura,
los valores estn expresados en % del peso total seco.
c.- TAMAO DE LA MICROALGA.- Las microalgas utilizadas para alimentar a
rotferos o larvas de peces, crustceos o moluscos deben de estar
comprendidas en el rango de 3 a 20 micras.
d.- NATURALEZA DE LAS MEMBRANA CELULAR.- Las microalgas
utilizadas para alimentar a rotferos o larvas de peces, crustceos o
moluscos deben tener una membrana celular delgada y digerible.
Actinocyclus normanii (Vista frontal) Dunaliella sp. Thalassiosira sp

b.- Principales Requerimientos o acondicionamientos
FISICOS para el cultivo de Microalgas.
1.- LA AGITACIN.- Los cultivos de microalgas en un criadero o hatchery, cuando
alcanzan densidades de cultivo intensivas, ( 4.4 x 106 clulas/mL), por efecto de la
fuerza de la gravedad tienen a SEDIMENTAR, siendo necesario la agitacin, para
evitar la prdida del cultivo. Por esta razn es considerada como el PRIMERO Y MAS
IMPORTANTE acondicionamiento fsico que debe tener un cultivo de microalgas.
1.- LA AGITACIN.- permite:
- Movimiento del medio del cultivo ( agua y nutrientes) para obtener una mayor
distribucin de los nutrientes disueltos en el agua.
- Se obtiene una mayor captacin de la energa de la luz.
- Permite un abastecimiento continuo de anhdrido carbnico (CO 2 ) del aire, como
efecto del bombeo.
- Evita la sedimentacin de las microalgas en cultivo.
1.- LA AGITACIN.- Es abastecida por una bomba de aire o aireador elctrico.
Que toma aire , lo comprime y distribuye por toda la red. El control de la
contaminacin por medio del aire, esta en relacin con el filtro con que
dispone el aireador, esta puede ser: De papel, de fibra de vidrio, cartn y tela.
Hatchery del Centro de Acuicultura Morro Sama

2.- LA TEMPERATURA.- Si la habitacin
donde se realiza el cultivo de
microalgas NO TIENE UN SISTEMA
DE AIRE ACONDIONADO, que
conserve un rango mnimo de
variacin de la temperatura interna del
cultivo, por ejemplo de 24 +/- 1C, es
necesario considerar el volumen del
cultivo, si esta de 10 a 500 mL, es
necesario protegerlos
introducindolos en un acuario o una
incubadora, para mantener la
temperatura estable dentro del cultivo,
debido a que el poco volumen del
cultivo, permitir a la temperatura
ambiental, por efecto de la LEY DEL
EQUILIBRIO, subir a temperatura
interna del cultivo en el da y en la
noche bajarla , amplindose el rango
de 24 +/- 5C , afectando seriamente
le crecimiento de la microalga y NO
PERMITIENDO una normal
produccin de biomasa e incluso
matar el cultivo.
2.- LA TEMPERATURA.- La fisiologa de las

microalgas depende de la temperatura del
medio (agua) en la que se desarrollan,
consecuentemente la temperatura del
medio de cultivo determina la principal
actividad fisiolgica, que es LA
FOTOSINTESIS Y SU INTENSIDAD.
Razn por la que la PRODUCCIN DE
BIOMASA de las microalgas, depende de
la temperatura del agua o medio, si esta se
encuentra en el rango adecuado se
obtendr un crecimiento y produccin de
biomasa OPTIMA. A menores o menores
rangos de temperatura se producir un
RETARDO y hasta la inhibicin del proceso
de fotosntesis de la microalga,
producindose un incremento de biomasa
lento y en mayor nmero de das. Las
microalgas son POIQUILOTERMAS ( T de
la celula = T del agua)
2.- LA TEMPERATURA.- La fisiologa de las

microalgas depende de la temperatura del
medio (agua) en la que se desarrollan,
consecuentemente la temperatura del
medio de cultivo determina la principal
actividad fisiolgica, que es LA
FOTOSINTESIS Y SU INTENSIDAD.
Razn por la que la PRODUCCIN DE
BIOMASA de las microalgas, depende de
la temperatura del agua o medio, si esta se
encuentra en el rango adecuado se
obtendr un crecimiento y produccin de
biomasa OPTIMA. A menores o menores
rangos de temperatura se producir un
RETARDO y hasta la inhibicin del proceso
de fotosntesis de la microalga,
producindose un incremento de biomasa
lento y en mayor nmero de das. Las
microalgas son POIQUILOTERMAS ( T de
la celula = T del agua)
En el esquema se observa , los dos primeros principales requerimientos o acondicionamientos, en el
siguiente orden:
a.- La agitacin.
b.- La temperatura del agua o medio de cultivo .
BOMBA filtro
AGITACION
TEMPERATURA
EXTERNA MEDIO AMBIENTAL
T INTERNA
c.- Principales Requerimientos o acondicionamientos QUMICOS para
el cultivo de Microalgas.
. Paramecio
1.- EL MANEJO DE LA
CONTAMINACIN: Es el primero y
principal requerimiento o
acondicionamiento QUMICO, debido
a que determina LA PRODUCCIN
DE BIOMASA (MICROALGAS) en el
tiempo y en las condiciones
proyectadas. Manejar la
contaminacin va ha significar
principalmente evitar que el
ecosistema o medio de cultivo NO
SEA INVADIDO por otros OSTRACODO
organismos competidores u
organismos predadores. Entre los
competidores estn otras microalgas
y/o bacterias que se alimentan de los
nutrientes desplazando a la
microalga cultivada; de los
predadores sern todos aquellos
organismos que se alimentan de las
microalgas OSTRACODOS
.
1.- EL MANEJO DE LA
CONTAMINACIN: Las dos principales
tcnicas para manejar la
contaminacin son:
- La desinfeccin.- Es la
eliminacin de la mayora de los
microorganismos y sus formas
resistentes (bacterias otras
microalgas), para evitar que
compitan con la microalga en cultivo
y as obtener un ecosistema
MONOESPECFICO , donde
prevalezca la microalga en cultivo
por su densidad sobre los dems
acompaantes, as la microalga
tendr un ecosistema acutico mas
indicado para su crecimiento. Se
logra aplicando lavados con
detergentes, alcohol, leja, formol,
yodo y sus derivados como Isodine.
.
1.- EL MANEJO DE LA
CONTAMINACIN: Las dos principales
tcnicas para manejar la
contaminacin son:
- La Esterilizacin.- Consiste en la
eliminacin de TODOS los
microorganismos y sus formas
resistentes (bacterias otras
microalgas), para evitar que
compitan con la microalga en cultivo
y as obtener un ecosistema
ESTRIL , donde slo viva la
microalga en cultivo. Se logra luego
de haber utilizado el calor directo o
hmedo y procedimientos qumicos
en combinacin con procesos
qumicos, cuando se filtra el agua
hasta llegar a las 2 micras, y luego
aplicar radiacin ultravioleta. Una autoclave utiliza vapor de agua a presin
para esterilizar objetos mediante calor
Se logra luego de haber utilizado el calor

directo o hmedo y procedimientos
qumicos en combinacin con procesos
qumicos, cuando se filtra el agua hasta
llegar a las 2 micras, y luego aplicar
radiacin ultravioleta.
CILIT-AQUAZON AC: Equipo de
desinfeccin especial para agua caliente
formado por una unidad que genera una
radiacin ultravioleta a una frecuencia
aproximada de 254 nm adecuada para la
esterilizacin del agua. Preparado para una
fcil instalacin dispone de una cmara en
acero inoxidable en cuyo interior se halla
situada la lmpara protegida por un tubo de
cuarzo de alta pureza que la separa del
agua.
C.- Principales Requerimientos o acondicionamientos
QUIMICOS para el cultivo de Microalgas.
2.- LA LUZ.- Puede ser NATURAL ( SOL ) si los cultivos son exteriores y EXTENSIVOS,
en cambio en los CULTIVOS intensivos debe ser luz artificial.
2.- LA LUZ.- artificial debe tener la

calidad ESPECTRAL ADECUADA,
que estn comprendidas entre los
380 y 720 nanomicras (nm), donde
la energa solar
En los extremos se tienen:
a.- Menores de 380 nm.- es la zona de
la radiacin ULTRAVIOLETA,
donde se produce una INHIBICIN
fotosinttica por exceso de
energa, la que adems produce
un dao irreversible en las
microalgas y luego la muerte.
b.- Mayores de 720 nm.- es la zona de
la radiacin INFRAROJA, donde se
produce una INHIBICIN
fotosinttica por FALTA de energa,
la que adems produce bajo
crecimiento en las microalgas y
luego la muerte.
2.- LA LUZ.- Esta luz artificial es captada por los distintos pigmentos que poseen las
microalgas como son:
. Las microalgas verdeazuladas contienen la clorofila de tipo A pero sta no se
encuentra en los cloroplastos, sino que se distribuye por toda la clula, y el color
lo definen los pigmentos la ficocianina (azul) y la ficoeritrina (rojo), que ocultan
el color verde de la clorofila. Las microalgas verdes tienen clorofila A y B.
Anabaena sp. Tetracelmeis sp.

Dunaliella sp.
2.- LA LUZ.- Esta luz artificial es captada por los distintos pigmentos que poseen las microalgas
como son:
. Las diatomeas contiene el pigmento verde, osea la clorofila pero se mezcla con la xantofila
(de color amarillento), la carotina y con la fucoxantina ofrecen a las diatomeas su color
castao-dorada.
Adems los pigmentos en relacin a el color que generan tienen mayor capacidad para captar la
energa solar, las rojas mayor capacidad, captando la energa restante a mayor profundidad,
luego las castao- doradas, a mediana profundidad y las verde casi en superficie y las azul
verdosas en la superficie o interfase agua aire.
Isochrysis sp Chaetoceros sp.

2.- LA LUZ.- Debe tener como caracterstica una ADECUADA INTENSIDAD, que esta en
relacin a la distancia que existe entre la fuente de luz y el cultivo de microalgas, esta debe
estar entre 0,20 a 1.0 m dependiendo del volumen del cultivo. La intensidad de la luz se mide
por LUX, y el rango adecuado de LUX para los cultivos esta entre 2000 a 5000 lux,
dependiendo siempre del volumen y la densidad del cultivo.
2.- LA LUZ.- Otra caracterstica es que debe de ser LUZ FRIA O BLANCA, no la luz amarilla o
la que produce calor. La primera produce luz por la reaccin de la energa elctrica con el
gas NEON, contenida en los fluorescentes; mientras que la luz amarilla se produce por
INCANDECENCIA sea por calor en el vaci, lo que general mucha energa calorfica, que
calienta los cultivos de microalgas y los mata.
3.- NUTRIENTES O SALES MINERALES:
.
Es el conjunto de sustancias que son
agregadas al medio de cultivo (agua de
mar esterilizada o desinfectada), que
deber necesariamente contener toda
la composicin de sales minerales que
requiera cada especie de microalga, en
general se requiere:
-Nitrato de sodio 75 mg/L COSTO 70
SOLES/KILO.
-Fosfato de sodio 5 mg/L COSTO 226
SOLES/KILO.
COSTO TOTAL 296 SOLES/KILO.
-Silicato de sodio 15 mg/L
-Solucin de metales traza que contenga
Fiero, cobre, zinc, cobalto y Magnesio.
-Solucin de vitaminas, compuesta por
Biotina, Tiamina (B1) y Cianocobalanina
(B12)
.
MEDIOS
MEDIO GUILLARD
FERTILIZANTES
Promedio de las Masificaciones de 1500ml, 3000ml y 7000 ml.

3.- NUTRIENTES O SALES MINERALES: TESIS: ESTUDIO DE CULTIVO INTENSIVO DE Dunaliella sp
(TEODORESCO 1905); EN MEDIO GUILLARD F/2 Y MEDIOS FERTILIZANTES COMERCIALES UREA Y
FOSFATO. Ing. Mery Elizabeth Ravello Atoche .
-UREA O CARBAMIDA (NH2)2CO 0.030 g/L
-FOSFATO DIAMNICO 0.005 g/L
-Solucin de metales traza que contenga Fiero, cobre, zinc, cobalto y Magnesio.
-Solucin de vitaminas, compuesta por Biotina, Tiamina (B 1) y Cianocobalanina (B12)
MEDIOS
MEDIO GUILLARD FERTILIZANTES
TRATAMIENTO PROTEINAS GRASAS

GUILLARAD F/2 21.56 1.32
FERTILIZANTES U-F 26.91 0.94
CULTIVO FINAL DE LA MICROALGA
Dunaliella sp .BOTELLONES DE 7000 ml.
PRINCIPALES CARACTERISTICAS FISICO QUIMICAS DE LOS FERTILIZANTES:
-UREA O CARBAMIDA (NH2)2CO Forma de sal slida cristalina y de color blanco. Higroscpica. Olor ligero a
amoniaco. NITROGENO TOTAL 46.0% o 46 - 0- 0. COSTO POR KILO 5.0 SOLES.
-FOSFATO DIAMNICO O HIDRGENOFOSFATO DE AMONIO (NH4)2HPO4 Forma de sal slida cristalina y de color
NEGRO PIMIENTA 18% de nitrgeno amoniacal y 46.0% de fsforo o 18 46 - 0. COSTO POR KILO 7.0 SOLES.
COSTO DEL MEDIO GUILLARD (Nitrato de sodio y Fosfato de sodio) 296 SOLES/KILO Y DE LOS
FERTILIZANTES 12 SOLES / KILO , 24.66 VECES MAS BARATO O 95.94%
.
4.- GASES: Los principales son el
Anhdrido carbnico (CO2) y el oxgeno
Luz
disuelto en el agua (O2), el CO2 es el
gas insumo y deficitario en el cultivo
de microalgas, debido a que 6 CO2 + 6 H2O 6 CH2O +6 O2
participa en la fotosntesis, mientras
que el O2 es producido.
Insumo Produce
El CO2, ingresa mediante la agitacin
con el aire filtrado al cultivo de
microalgas, logrando densidades de
4.5 x 106, para mayores densidades
es necesita aadir al cultivo CO2 en
su forma purificada en un 1% del
volumen del aire que ingresa con la
agitacin, caso contrario el cultivo no
se desarrolla y por falta de CO2 el pH
se eleva hasta 9, creando un medio
ambiente no adecuado para las
microalgas.
c.- Principales Requerimientos o acondicionamientos
QUMICOS para el cultivo de Microalgas
5.- pH del agua.- Cantidad de
hidrogenones activos que estn
presentes en el agua y determinan
si el cultivo de microalgas se va
ha desarrollar adecuadamente, CO2 + H2O H2CO3
para lo cual debe estar en el
rango de 6,5 a 9,5, siendo el Insumo Acido
Carbnico
optimo entre 7 y 8, valores fuera
de este rango (6,5 a 9,5) causan
problemas de erosin y deterioro
en la pared celular de las H2CO3 H+ + HCO3-
microalgas.
El pH del agua esta relacionado
Ion
directamente con la cantidad de Bicarbonato
CO2 disuelto en el agua, como se
observa en la siguiente formula:
HCO3- H+ + CO3-
Ion
Carbonato
5.- pH del agua.- Todas estas reacciones

estn en EQUILIBRIO, JUNTO CON CO2 + H2O
EL ION HIDRGENO LIBERADO, de
H2CO3
tal modo que el pH del medio de Insumo Acido
cultivo, depender de la concentracin Carbnico
relativa EN PORCENTAJE de cada
uno de los componentes qumicos
disociados de la reaccin qumica H2CO3 H+ + HCO3-
presente. Por ejemplo:
A un 100% de CO2 el pH ser de 4,5
A un 100% de HCO3 pH ser de 8,5 Ion
Bicarbonato
A un 100% de CO3 el pH ser de 12 y
A un 50% de CO2 y de HCO-3 el pH ser
de 6,5 HCO3- H+ + CO3
-
A un 50% de HCO3 y de CO-3 el pH ser

Ion
de 10,5 Carbonato
5.- pH del agua.- Por esta razn el pH

promedio recomendado para el
medio de cultivo de microalgas en
agua dulce ser de 7,5 y en agua
de mar 8,4 los que con la edad de
las clulas y el desarrollo del cultivo
se incrementar hasta 9,0 , pH que
detendr el desarrollo del cultivo,
dado que se ha consumido todo el
CO2 administrado por la agitacin al
cultivo, debiendo obligatoriamente
agregar el 1% de CO2 al sistema de
agitacin, para proveer CO2 para
que el desarrollo del cultivo reinicie
su incremento, y se baje el pH a 7,5
o 8,4 segn el tipo de agua.
6.- Salinidad del agua.- Comprende

todas las sales disueltas en el
agua, que las microalgas
necesitan para su desarrollo
normal, como por ejemplo el
cloruro de sodio, el nitrato de Salinmetro ptico
sodio y el fosfato de sodio.
Las microalgas cultivadas pueden ser
de origen marino o de agua dulce,
en ambos casos ser necesario
verificar con un salinmetro ptico
que la salinidad del medio de
cultivo sea igual o muy similar al
nuevo medio de cultivo a utilizar,
durante el proceso de la
masificacin.
Principales Requerimientos o acondicionamientos FSICOS
y QUMICOS para el cultivo de Microalgas
FILTRO
BOMBA filtro
AGITACION
LUZ
ENERGIA
TEMPERATURA
T INTERNA
pH
GASES O2
SALINIDAD
Y CO
2
NUTRIENTES
DESINFECCIN O
ESTERILIZACIN
d.- El Cultivo de microalgas.
1.- CEPA.- Es la unidad bsica de cultivo, de
donde se inicia la masificacin del cultivo de
microalgas; se caracteriza por:
- Debe ser un cultivo AXENICO.- contiene una
poblacin UNIALGAL en un medio de cultivo
ESTRIL.
- Es de poco volumen.- Estn contenidos en
tubos de ensayo (10 mL) o en erlenmeyer o
matraz pequeos (20 a 100 mL) de medio de
cultivo, preferentemente slido de agar-agar
nutritivo.
- Debe tener un medio de cultivo que le
permita una larga duracin.- Una microalga
tienen en promedio 8 das de vida, por lo que
se necesita que las cepas tengan el mayor
periodo de vida en das, para lo cual se les
cultiva en un medio de cultivo sin el
acondicionamiento ptimo, como el agar
agar, que por ser slido no permite una
buena distribucin de los nutrientes y de la
luz, permitiendo slo el desarrollo lento de
colonias superficiales .
1.- OBTENCIN DE UNA CEPA.- El precio de una
cepa (15 a 20 mL) es en promedio de 50 a 100
dlares, mas gastos de envo; dado que es el
producto de un laboratorio estril y bien
equipado y del trabajo de personal capacitado.
La cepa es el resultado de dos procesos de
AISLAMIENTO Y PURIFICACIN, que inicia
con el proceso de recoleccin en el campo
(mar o lago); se traslada al laboratorio y se
identifica la especie requerida del conjunto de
especies recolectadas y se inicia el
PROCESO DE AISLAMIENTO, que consiste
en la siembra de las colonias de todas las
microalgas en placas Petry, se las cultiva y
luego se asla con una micropipeta las
colonias que contienen la microalga requerida,
la que a su vez es nuevamente sembrada en
otra placa Petry, esta tecnologa se repite
sucesivamente hasta tener slo dos o tres
especies de microalgas en una placa Petry.
1.- OBTENCIN DE UNA CEPA.- En ese
momento se inicia el segundo proceso
de LA PURIFICACIN, que consiste en
aislar SLO LA COLONIA de la
microalga requerida, proceso donde se
repite el uso de la micropipeta y los
cultivos sucesivos en el medio de
cultivo slido que es el agra agar
nutritivo.
Cuando se tenga una placa con
colonas slo de la especie requerida,
habr culminado el proceso de
purificacin y se proceder a realizar la
ltima siembra, de este proceso que
generar la CEPA.
2.- CLASES DE CULTIVOS.- Son los
siguientes:
A.-POR SU NATURALEZA.- Su factor de
clasificacin es la densidad del cultivo
clulas/mililitro (c/mL.)
- CULTIVO INTENSIVO.- Requieren
necesariamente de todos los
acondicionamientos fsicos y qumicos,
para alcanzar altas densidades de 4,2 x
104 hasta 3,5 x 108 c/mL , su cultivo se
realiza en la sala hmeda del Hatchery
y en volmenes pequeos que van de
los 100 mL hasta los 15 m3.
- CULTIVO EXTENSIVO.- El
acondicionamiento es bsico, es
necesario la agitacin y el manejo de la
contaminacin, mientras que la luz y la
temperatura pueden ser naturales, con
respecto a los nutrientes se usan los
mas baratos (Abonos agrcolas como la
urea, superfosfatos), por eso se
trabajan con volmenes altos
comprendidos entre 15 a 200 m3.Las
densidades son bajas de 4,4 x 102
hasta 3,2 x 103 c/mL .
siguientes:
B.-POR LA FORMA DE SU COSECHA.-
- CULTIVO CONTINUOS.- La cosecha COSECHAR EL 30%
es parcial, extrayendo hasta un 50%
del volumen del cultivo, 30 30 30 30
inmediatamente el volumen cosechado % % % %
es repuesto agregando slo el medio
de cultivo ( agua tratada+nutrientes),
para que la poblacin de microalgas
restante en forma rpida se reproduzca
y nuevamente se pueda hacer la
cosecha, su ventaja es que permite una
obtencin de biomasa de microalgas
rpida, por lo que se obtiene una mayor
rentabilidad en el cultivo, debido a que 30 % 30
30 30
se utiliza menor mano de obra, equipos % % %
y espacio; y su desventaja es por que
se contamina fcilmente por que el
medio de cultivo acumula los
metabolitos de las poblaciones en REPONER EL VOLUMEN COSECHADO
sucesin. Cuando se contamina no se (30%) CON SOLO MEDIO DE CULTIVO.
tiene otros cultivos que la remplace
inmediatamente.
2.- CLASES DE CULTIVOS.- Son los 1d
siguientes:
B.-POR LA FORMA DE SU COSECHA.-
- CULTIVO POR LOTE O BATCH.- La
cosecha es total, extrayendo el 100%
del volumen del cultivo, en el momento
de mximo crecimiento, para lo cual se
debe de tener un FLUJO DE
PRODUCCIN mediante
masificaciones planificadas para poder
cosechar diariamente un recipiente de
cultivo, logrando una
CONCORDANCIA entre el volumen del
cultivo principal a alimentar. Tiene
1d
desventajas como un mayor uso de
mano de obra, equipos y espacio
dentro de la Hatchery, y
consecuentemente mas costo de
produccin. Su ventaja es que es un
sistema ms confiable, nos produce
clulas jvenes y si se contamina se
elimina el cultivo y el siguiente en
menos de un da, remplaza al
contaminado brindando alimento
necesario para el cultivo principal o de
apoyo.

siguientes:
C.-POR LA PUREZA DEL CULTIVO.-
- CULTIVOS AXNICOS.-Son
cultivos cuyo medio de cultivo es
ESTRIL ( Agua + Nutrientes +
recipiente) y son UNIALGALES, de
poco volumen y sin agitacin por
aire.
- CULTIVOS MONOESPECFICOS.
El medio de cultivo ha sido
DESINFECTADO, por lo que
pueden existir competidores y
hasta predadores, pero en muy
pocas cantidades, va existir UNA
SOLA MICROALGA, que por su
densidad va ha prevaler,
predominar por su cantidad sobre
las dems especies.
3.- MEDIOS DE CULTIVO O SUSTRATO
QUMICO.- DEBE tener DOS
OBJETIVOS PRINCIPALES :
- Las condiciones qumicas y fsicas
cualitativamente y cuantitativamente,
deben de FAVORECER el crecimiento
de la microalga cultivada. Ejm.
Cuantitativamente: 2000 a 5000 Lux
380 a 720 nonomicras.
Cualitativamente : temperatura
ESTABLE externa e interna por efecto
del aire acondicionado instalado.
- Inhibir el crecimiento de los predadores
y competidores mediante:
los componentes nutricionales: Ejm. sin
Silicato de sodio para las diatomeas.
pH del medio de cultivo: Microalgas de
mar ( 8,0 a 8,4) son mas sensibles que
las de agua dulce ( 6,5 a 9,5).
Antibiticos: 50 mg estreptomicina/Litro
de medio de cultivo.
3.- MEDIOS DE CULTIVO O SUSTRATO QUMICO.- Basados en estos DOS
OBJETIVOS PRINCIPALES :El AGUA como principal componente del medio
de cultivo, deber adicionalmente PROPORCIONAR los requerimientos
qumicos y fsicos MNIMOS de la especie a cultivar como:
BOMBA FILTRO
AGITACION
LUZ
ENERGIA
T INTERNA
pH
GASES
SALINIDAD
CO2
DESINFECCIN O
ESTERILIZACIN
4.- CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO.-
- MEDIOS DEFINIDOS QUIMICAMENTE.-
Son aquellos cuya composicin QUMICA
es CONOCIDA. Ejm. Nitrato de sodio
(NaNO3) Q.P. 99.99% de principio activo. Y
se caracterizan por: Tener la composicin
de sales estriles, con una alta durabilidad
(aos) y de una conservacin fcil y barata,
no necesita refrigeracin. Por su naturaleza
artificial (sal) no es atacada por bacterias,
hongos o protozoos.
SE DIVIDEN EN:
- Medios de cultivo lquidos: Nutrientes
disueltos en agua como : Guillard, MSW,
ES. AW
- Medios de cultivo slidos: Son los medios
lquidos que han sido mezclados con agar
agar .
4.- CLASIFICACIN DE LOS MEDIOS DE
CULTIVO.-
- MEDIOS NO DEFINIDOS
QUIMICAMENTE.- Son aquellos cuya
composicin QUMICA NO es CONOCIDA,
se asume que tienen una determinada
composicin qumica no cuantificada. Ejm.
Harina de pescado Y se caracterizan por:
Tener la composicin ORGNICA, por lo
que son fcilmente atacados por bacterias,
hongos y protozoos, con poca durabilidad
(das) y su conservacin generalmente
requiere de sistemas de refrigeracin o el
uso de preservantes.
SE DIVIDEN EN:
- Medios naturales: Extractos de suelo,
harina de pescado y de vegetales. Son
lquidos.
- Medios enriquecidos: como el agua de
mar, ya que en su composicin contiene
una serie de sales nutrientes.
d.- El Cultivo de microalgas. Conceptos bsicos.
2.- FILTRACIN.- Es un proceso que nos

permite MANEJAR adecuadamente la
contaminacin, dando la calidad del
agua necesaria en una hatchery o
Criadero, ya que de ella depender el
buen desarrollo de los organismos y
los rendimientos obtenidos. Existen
distintos tipos de filtracin:
a.-Filtracin mecnica .-El objetivo es eliminar
las partculas en suspensin, para lo cual
primero se ha realizado una buena
DECANTACIN, luego se utiliza el filtro de
arena, y a continuacin se debe de
FORZAR (filtracin Activa) el paso del agua
a travs de un filtro de cartucho de 10 y una
micra, de tal modo que las partculas
mayores a ese poro no puedan atravesarlo
y queden retenidas por el filtro. Un tipo
especial de filtracin mecnica es la
realizada por filtros de arena de diatomeas,
los que pueden sustituir a los filtros de
cartn cuando se requieran de caudales
elevados de filtracin. Su grado de filtracin
puede ser menos de una micra.
b.-Filtracin biolgica .-El objetivo es eliminar el

amoniaco y los productos catablicos, mediante la
actividad bacteriana, que consiste bsicamente en el
paso de los efluentes de la Acuicultura a travs de
estructuras donde estn instaladas las bacterias
NITROSOMONAS y NITROBACTER, las reacciones
que se producen son:
nitrosomonas nitrobacter
Amoniaco Nitrito Nitrato
NH3 NO2 NO3
Es muy importante la relacin de superficie/volumen,

en el filtro, pues ha mayor superficie introducida en el
agua mejor eficiencia de las bacterias, por eso se
utiliza grava de 2 a 5 mm de dimetro u otros objetos
de plstico con una elevada relacin superficie
/volumen. De este modo se aumenta la superficie de
asentamiento de las bacterias y se permite un flujo
adecuado de agua a travs del filtro.
c.-Filtracin Qumica .-El objetivo es tambin eliminar el amoniaco y los productos

catablicos, mediante la capacidad de absorcin y retencin del CARBON ACTIVADO, el
que trabajar con una bomba para ser ms eficiente.
Generalmente se utiliza combinado con un filtro mecnico.
2.- FILTRACIN.-.-Con la combinacin de la FILTRACIN MECNICA Y LA
RADIACIN ULTRAVIOLETA se esterilizan LAS VITAMINAS, que son sustancias
orgnicas y termo sensibles, pues se desnaturalizan a temperaturas de 60 C.
TRATAMIENTO RED ELEMENTOS

EN MICRAS ELIMINADOS
FILTRACIN 50 - 10 DESPERDICIOS
MECNICA ZOOPLANCTON
FILTRACIN 2-1 ZOOPLANCTON
MECNICA FITOPLANCTON
FILTRACIN 0.5 0.1 ZOOPLANCTON
MECNICA FITOPLANCTON
BACTERIAS
RADIACIN ULTRAVIOLETA BACTERIAS
3.- LA DESINFECCIN.- significa la

extraccin, desactivacin o eliminacin
PARCIAL de los microorganismos
patgenos que existen en el agua. La
destruccin y/o desactivacin de los
microorganismos supone el final de la
reproduccin y crecimiento de esto
microorganismos. La desinfeccin se
logra mediante desinfectantes qumicos
y/o fsicos. Estos agentes tambin
extraen los contaminantes orgnicos del
agua, que son nutrientes o cobijo para
los microorganismos. Los desinfectantes
no solo deben matar a los
microorganismos sino que deben
adems tener un efecto residual, que
significa que se mantienen como
agentes activos en el agua despus de
la desinfeccin para prevenir el
crecimiento de los microorganismos en
las tuberas provocando la
recontaminacin del agua.
Principales compuestos qumicos utilizados para la
desinfeccin del agua :
-Cloro (Cl2)
- Dixido de cloro(ClO2)
- Hipoclorito (OCl-)
- Ozono(O3)
- Halgenos: Bromo (Br2), Iodo (I)
- Cloruro de Bromo (BrCl)
- Metales: cobre (Cu2+), plata (Ag+)
- Permanganato potasico (KMnO 4)
- Fenoles
- Alcoholes
- Jabones y detergentes
- Sales de amonio
- Peroxido de Hidrogeno (Agua oxigenada)
Compuestos fsicos para la desinfeccin del agua:
- Luz ultravioleta (UV)
- Radiacin electrnica
- Rayos Gamma
- Sonido
- Calor
Mecanismo de desinfeccin
La desinfeccin normalmente provoca la
corrosin de la pared celular de los
microorganismos, o cambios en la
permeabilidad de la clula, cambios en la
actividad de protoplasma celular o actividad
encimtica (debido al cambio estructural de las
encimas). Estos problemas en la clula evitan la
multiplicacin de los microorganismos. Los
desinfectantes tambin provocan la oxidacin y
destruccin de la materia orgnica que son
generalmente nutrientes y fuente de
alimentacin de los microorganismos.
El mtodo mas comn es utilizando Hipoclorito

de sodio: El agua es tratada con Hipoclorito de
sodio 200 ppm por 24 horas y posteriormente
se neutraliza con 150 ppm de Tiosulfato de
sodio. Lee y Tamaru ( 1993)
Previamente el agua debi de ser filtrada
obligatoriamente.
MTODO PARA PREPARAR SOLUCIONES CON
CONCENTRACIONES EN PARTES POR MILLN ppm
En Acuicultura se debe de preparar soluciones DESINFECTADORAS en distintos VOLUMENES y a
distintas concentraciones en ppm; por Ejemplo: PROBLEMA N 1
Se quiere desinfectar 250 litros de agua de mar filtrada, mediante la aplicacin de Hipoclorito de sodio
a una concentracin de 200 ppm. Usando frascos de leja de un litro con UN PRINCIPIO ACTIVO DE
5% de Hipoclorito de sodio. Cuantos litros de leja se utilizaran?
1.- CONCEPTOS BASICOS:
A.- ppm se interpretan como UNA PARTE de una sustancia disuelta o contenida en UN MILLON DE
PARTES de otra sustancia. Sin unidades. Cuando se ponen unidades en ambos componentes deben
ir LA MISMA UNIDAD, POR EJEMPLO se tiene:
En VOLUMEN = 1 mL / 1m3 se INTERPRETA 1 mL / 1000000 mL y se lee una parte por milln de

hipoclorito de sodio
En PESO = 1 g/ 1TM se INTERPRETA 1 g / 1000000g y se lee tambin, una parte por milln de
Hipoclorito de sodio.
B.- Por otro lado, se sabe que un mL de agua PESA UN GRAMO, en base al
PROMEDIO DE LAS DENSIDADES del agua pura es de 0,998 g/mL y del agua de mar 1,03 g/mL
2.- RESOLUCIN DEL PROBLEMA : Aplicando los conceptos bsicos y poniendo unidades de peso
al problema se tiene:
La expresin 200 ppm, significa: 200 partes de hipoclorito de sodio por cada 1000000 de partes de
agua de mar. ES DECIR O PONIENDOLE UNIDADES: 200 GRAMOS de hipoclorito de sodio por
cada 1000000 de GRAMOS de agua de mar; y 250 litros DE AGUA DE MAR = 250000 mL = 250000
gramos de agua de mar.
Con TODOS LOS DATOS en las mismas unidades (gramos) se plantea la siguiente regla de Tres:
200 g de H.S. 1000000 g de agua de mar
X g de H.S. 250000 g de agua de mar
X = 200 g de H.S X 250000 g de agua de mar = 50 g de H.S.

1000000 g de agua de mar
Osea se necesitan agregar 50 gramos de Hipoclorito de sodio PURO o en principio activo a un
volumen de 250 litros de agua de mar para obtener una concentracin de 200 ppm de Hipoclorito de
sodio.
En el problema, la LEJIA tiene como principio activo 5% de Hipoclorito de sodio, se debe de calcular
la cantidad de mL contenidos en la leja, que contenga los 50 gramos de Hipoclorito de sodio PURO o
en principio activo calculado anteriormente, para lo cual se aplica la siguiente regla de tres:
100 mL de Leja. 5 g de Hipoclorito de Sodio
X mL de Leja 50 g de Hipoclorito de Sodio = 1000 mL de leja UN litro de Hipoclorito
de Sodio.
RESPUESTA: Se debe de agregar 1000 mL o un litro de leja con una concentracin de 5% de
Hipoclorito de sodio, a 250 litros de agua de mar filtradas, para obtener una concentracin de 200
ppm.
PROBLEMA N 2
Se quiere desinfectar 1500 litros de agua de mar filtrada, mediante la aplicacin de Hipoclorito de sodio
a una concentracin de 200 ppm. Usando Hipoclorito de sodio granulado con UN PRINCIPIO
ACTIVO DE 70% de Hipoclorito de sodio. Cuantos gramos de Hipoclorito de sodio granulado se
utilizaran?
200 g de H.S. 1000000 g de agua de mar

X g de H.S. 1500000 g de agua de mar
X = 200 g de H.S X 1500000 g de agua de mar = 300 g de H.S.
1000000 g de agua de mar
Osea se necesitan agregar 300 gramos de Hipoclorito de sodio PURO o en principio activo a un
volumen de 1500 litros de agua de mar para obtener una concentracin de 200 ppm de Hipoclorito
de sodio.
En el problema, el Hipoclorito de sodio esta GRANULADO tiene como principio activo DE 70% de
Hipoclorito de sodio, se debe de calcular la cantidad de gramos contenidos en el Hipoclorito de
sodio GRANULADO , que contenga los 300 gramos de Hipoclorito de sodio PURO o en principio
activo calculado anteriormente, para lo cual se aplica la siguiente regla de tres:
100 g de Granulado. 70 g de Hipoclorito de Sodio
X g de Granulado 300 g de Hipoclorito de Sodio = 428.57 g de Hipoclorito de Sodio
GRANULADO
.
RESPUESTA: Se debe de agregar 428.57 g de Hipoclorito de Sodio GRANULADO
con una concentracin de 70% de Hipoclorito de sodio, a 1500 litros de agua de mar filtradas, para
obtener una concentracin de 200 ppm.
3.- LA DESINFECCIN.- Con CLORO y

sus derivados tiene los siguientes
RIESGOS:
-Es txico para el hombre y todo organismo
vivo.
-Altamente corrosivo para los materiales.
-En contacto con la materia orgnica forma
compuestos TOXICOS ESTABLES como las
CLORAMINAS, las que muchos autores las
califican como Cancergenas.
-No pueden ser detectados a
concentraciones bajas, pero letales, por
medios organolpticos: vista- olfato, se
requieren mtodos analticos.
-- Se usan neutralizadores qumicos como el
TIOSULFATO DE SODIO, cuya accin esta
en relacin a su pureza.
- A pH elevado, menor accin del Hipoclorito
de sodio, a mas de 6,0 se requieren de 24
horas de inmersin para un buen resultado.
4.- LA ESTERILIZACIN.- Procesos fsicos y
qumicos para destruir TODA FORMA DE
VIDA.
a.-Los mtodos qumicos.- Estos provocan
la perdida de viabilidad de los
microorganismos. Son numerosos, por
ejemplo con oxido de etileno: Es utilizado en
la esterilizacin gaseosa, generalmente en la
industria farmacutica. Destruye todos los
microorganismos incluso virus Sirve para
esterilizar material termo sensibles como el
descartable (goma, plstico, papel etc.),
equipos electrnicos, bombas
cardiorrespiratorias, metal, etc. Es muy
costoso, peligroso por ser altamente
inflamable y explosivo, y adems
cancerigeno.
b.-Los mtodos fsicos.- El Calor
que depende de dos factores: el tiempo de
exposicin y la temperatura alcanzada.
Todos los microorganismos son susceptibles,
en distinto grado, a la accin del calor. El
calor provoca desnaturalizacin de protenas
fusin y desorganizacin de las membranas
y/o procesos oxidantes irreversibles en los
microorganismos.
VIDA.
b.-Los mtodos fsicos.-
Calor Hmedo.- Este produce
desnaturalizacin y coagulacin de protenas.
Para lo cual se utiliza el vapor del agua y la
presin, en equipos denominados: Autoclave,
para lo cual se eleva la temperatura a 120, la
presin a 15 lb/cm2 y durante 20 a 30 minutos.
Cuando se trabaja con agua de mar precipitan
los fosfatos y silicatos, por lo que es necesario
agregar estos compuestos. Es el mas usado
por ser muy econmico, no deja residuos, no es
peligroso, elimina esporas y bacterias en poco
tiempo, se introduce rpidamente y con alta
temperatura en los materiales sin deteriorarlos;
su desventaja es que no se utiliza en soluciones
que forman EMULSIONES con el agua, como
las vitaminas.

VIDA.
b.-Los mtodos fsicos.-
Calor Seco.- Produce la destruccin de las
clulas y bacterias por desecacin al
entrar en contacto con el fuego directo o el
aire caliente de las ESTUFAS , que
alcanzan hasta los 170 C , lo que permite
la esterilizacin de sustancias en polvo y
no acuosas, y de sustancias viscosas no
voltiles y no es corrosivo para metales e
instrumentos. Solo que para lograr la
esterilizacin se requiere de mayor tiempo
de exposicin, debido a que se trasmite
por el aire, el que no tiene la alta
penetracin y temperatura como el vapor
de agua.
5.- LA RADIACIN.- Luego del proceso de filtrado del agua se aplica la radiacin
ultravioleta mediante equipos especialmente fabricados, los que estn conformados
por una lmpara UV que se dispone dentro de un tubo de cristal de cuarzo. El agua
impulsada por el filtro hermtico exterior circula por un espacio de unos 5 o 6 mm. de
anchura por fuera del tubo de cuarzo. Se suele utilizar cristal de cuarzo porque permite
el paso de la radiacin UVC al contrario que el vidrio que realiza una filtracin de estas
longitudes de onda del espectro. Con una emisin de 254 nm, los parsitos nadadores
mayores sern eliminados a una dosis equivalente de 1 vatio por segundo. La dcima
parte de esta radiacin ser necesaria para destruir protozoos pequeos y esporas de
hongos resistentes. Si dividimos entre 70 esta emisin ser suficiente para eliminar
esporas normales y bacterias, y entre 300 para los virus. Con estos clculos
aproximados se puede estimar el caudal, la potencia y la velocidad del flujo de agua
que se necesita para nuestro sistema de esterilizacin UVC. Por ejemplo: con 8 vatios
se puede esterilizar 725 litros/hora y con 50 vatios 2300 litros/hora. Salas J. y Garrido
C. ( 2007)
6.- TRATAMIENTO CON ANTIBIOTICOS.-
El origen de la palabra antibitico es griego:
anti significa contra, y bios, vida. Los
antibacterianos son sustancias naturales,
semisintticas o sintticas, que a
concentraciones bajas, inhiben el
crecimiento o provocan la MUERTE de las
bacterias. El cultivo de microalgas se
utilizan los antibiticos como lo reporta
Stein, J. ( 1973), al preparar una solucin
MADRE compuesta por:
-100 mg de Penicilina G
-50 mg de Sulfato de Estreptomicina,
ambos disueltos en 10 mL de agua
destilada.
-Al que se agrega 10 mg de Cloranfenicol
disuelto en alcohol etanol al 95%.
-Toda esta solucin se filtra con membranas
de 0.2 a 0.45 micras.
-SE APLICA un mL de esta solucin filtrada
a un litro de cultivo de microalgas.
7.- CRECIMIENTO TIPICO DE LAS
MICROALGAS.- El crecimiento de una
poblacin de microalgas TIPICO se
producir en un cultivo en lote o batch, sea
cuando se realice un SOLO proceso
productivo. El crecimiento se manifestar en
una curva TIPICA de crecimiento, donde se
tendr la variacin de la POBLACIN en el
transcurso del tiempo, expresada en clulas
por mililitro. Obtenindose una curva donde
se aprecian las siguientes fases:
A.- FASE DE AJUSTE.-Es la etapa de
adaptacin a que es sometida la poblacin
de microalgas a las nuevas condiciones de
cultivo generadas por su siembra. Esta fase
es de poca duracin y no se produce un
incremento neto de la poblacin.
B.- FASE EXPONENCIAL.- En base a los
nutrientes abundantes y el
acondicionamiento fsico y qumico
adecuados, la poblacin de microalgas SE
DUPLICA sucesivamente en intervalos
IGUALES DE TIEMPO; obtenindose una
TASA DE CRECIMIENTO de 2:1 frente a la
TASA DE MORTALIDAD.
MICROALGAS.-. Obtenindose una curva
donde se aprecian las siguientes fases:
C.- FASE DE RETARDO.- Los nutrientes
comienzan a escasear y el
acondicionamiento fsico y qumico no son
tan adecuados, por lo que EL TIEMPO para
que la poblacin de microalgas SE
DUPLIQUE AUMENTA; consecuentemente
la TASA DE CRECIMIENTO SE REDUCE
1,3:1 frente a la TASA DE MORTALIDAD.
Debida tambin a que se han acumulado los
metabolitos producidos por la alta poblacin,
y la alta densidad ha reducido la actividad
fotosinttica por la reduccin de la
disponibilidad a la LUZ.
d.- FASE ESTACIONARIA.- Los nutrientes
son deficitarios y el acondicionamiento fsico
y qumico no son adecuados, por lo que la
poblacin de microalgas DEJA DE
INCREMENTARSE; consecuentemente la
TASA DE CRECIMIENTO ES IGUAL 1:1 a la
TASA DE MORTALIDAD. se han acumulado
MAS los metabolitos producidos por la alta
poblacin, y la alta densidad ha reducido
MS la actividad fotosinttica por la POCA
disponibilidad a la LUZ.
MICROALGAS.-. Obtenindose una curva
donde se aprecian las siguientes fases:
E.- FASE DE MUERTE.- Los nutrientes se
han consumido y el acondicionamiento fsico
y qumico no son tan adecuados, por lo que
la poblacin de microalgas DISMINUYE;
consecuentemente la TASA DE
CRECIMIENTO SERA MENOR que la la
TASA DE MORTALIDAD, obtenindose
0.5:1. La acumulacin de los metabolitos
producidos por la alta poblacin, ES ALTA y
genera un ecosistema contaminado.
8.- BENEFICIOS DE LAS MICROALGAS

EN LA CRIANZA DE LARVAS DE PECES.-.
Son los siguientes:
-Pueden producir LIPOSACRIDOS que
influyen positivamente en los sistemas
INMUNOLOGICOS de las larvas.
-Generan y estabilizan el oxgeno disuelto en
el agua.
-Mantienen el pH del agua estable y en el
rango de 7,5 a 8,5.
-Producen sustancias bactericidas y
fungicidas, que eliminan a las bacterias y a
los hongos del agua de crianza
-Mejoran la calidad del agua dado que
utilizan los metabolitos producidos por las
larvas en criaza, especialmente los
nitrogenados , como por ejemplo los
NITRATOS.
-Mejoran e incentivan el apetito de las larvas
as como la produccin de enzimas
digestivas.
Esta tcnica de crianza es conocida como la
de AGUA VERDE y se ha demostrado que
incrementa la sobre vivencia, el crecimiento
y viabilidad de las larvas.

Modulo #3 Cultivo de Microalgas

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Modulo #3 Cultivo de Microalgas

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4.

a.- RUSTICIDAD.- Las

b.- VALOR NUTRICIONAL.- Las Especie Protenas Glcidos Lpidos

Actinocyclus normanii (Vista frontal) Dunaliella sp. Thalassiosira sp

Hatchery del Centro de Acuicultura Morro Sama

2.- LA TEMPERATURA.- La fisiologa de las

2.- LA TEMPERATURA.- La fisiologa de las

Se logra luego de haber utilizado el calor

2.- LA LUZ.- artificial debe tener la

Anabaena sp. Tetracelmeis sp.

Isochrysis sp Chaetoceros sp.

Promedio de las Masificaciones de 1500ml, 3000ml y 7000 ml.

TRATAMIENTO PROTEINAS GRASAS

5.- pH del agua.- Todas estas reacciones

A un 50% de HCO3 y de CO-3 el pH ser

5.- pH del agua.- Por esta razn el pH

6.- Salinidad del agua.- Comprende

2.- CLASES DE CULTIVOS.- Son los

EXTERNA MEDIO AMBIENTAL

2.- FILTRACIN.- Es un proceso que nos

b.-Filtracin biolgica .-El objetivo es eliminar el

Es muy importante la relacin de superficie/volumen,

c.-Filtracin Qumica .-El objetivo es tambin eliminar el amoniaco y los productos

TRATAMIENTO RED ELEMENTOS

3.- LA DESINFECCIN.- significa la

El mtodo mas comn es utilizando Hipoclorito

En VOLUMEN = 1 mL / 1m3 se INTERPRETA 1 mL / 1000000 mL y se lee una parte por milln de

X = 200 g de H.S X 250000 g de agua de mar = 50 g de H.S.

200 g de H.S. 1000000 g de agua de mar

3.- LA DESINFECCIN.- Con CLORO y

4.- LA ESTERILIZACIN.- Procesos fsicos y

8.- BENEFICIOS DE LAS MICROALGAS

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