PRUEBAS

SEROLOGICAS
 VDRL
Las "reaginas", presentes en individuos infectados por T.
pallidum se detectan en suero por la reaccin con un
antgeno cardiolipnico purificado y estabilizado. Si la
muestra contiene reagina, sta se unir al antgeno
produciendo una floculacin visible en microscopio. Las
reacciones inespecficas se evitan con el empleo de
antgeno altamente purificado y el agregado de cloruro de
colina caracterstica de la tcnica USR (Unheated Serum
Reagin) en la que no es necesario inactivar la muestra
PROCEDIMIENTO
Tanto los reactivos como la muestra deben estar a temperatura ambiente antes de
realizar la prueba.
I- PRUEBA CUALITATIVA EN SUERO
Se coloca 50 ul del suero del paciente enfrentado con 1 gota del reactivo (gotero),
se agita horizontalmente la placa a 180 rpm durante 4 minutos. Por ultimo se
puede observar en el aglutinometro o en tal caso en el microscopio con poco
aumento (60 a 100 X).
II- PRUEBA SEMICUANTITATIVA EN SUERO
Preparar diluciones de la muestra 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 y 1:32 con solucin
fisiolgica.
III- PRUEBA CUALITATIVA PARA LCR
Diluir el Reactivo A 1:2 con solucin de cloruro de sodio 10
g/dl. Emplear dentro de las 2 horas de preparacin.
Se coloca 50 ul de la muestra con una aguja calibre 6 y lo
enfrentamos con una gota del reactivo, por ultimo se mezcla
bien y se debe agitar horizontalmente durante 8 minutos a
180 rpm
Screening de sfilis.
Monitoreo para seguimiento de sfilis congnita.
Diagnstico de sfilis precoz: un paciente sospechoso de sfilis una VDRL negativo se debe volver a repetir en
prximos estudios. Ante un paciente con lcera genital o de otra localizacin sospechada de ser sifiltica se debe
realizar una VDRL, tres meses despus del inicio de la clnica.
Una VDRL negativo excluye el diagnstico de sfilis como causa de la lesin.
El diagnstico de sfilis precoz en pacientes que previamente han tenido sfilis tienen la FTA-ABS positiva y si no ha
transcurrido mucho tiempo tambin tiene la VDRL positiva. Para diagnosticarla se debe observar un aumento del
ttulo de la VDRL aunque ello pueda deberse a un falso positivo biolgico.
Diagnstico de sfilis secundaria: ya que todos los pacientes tienen una VDRL positiva con ttulos superiores de
1:16.en pacientes con clnica atpica y/o ttulos bajos se debe repetir la determinacin y confirmar con FTA-ABS.
Diagnstico de Sfilis latente: se encuentra VDRL positiva en ausencia de hallazgos en la exploracin y/o la historia
clnica. La exclusin de falsos positivos puede realizarse repitiendo la prueba en el momento y a intervalos de 6
meses. La categora de sfilis latente precoz o tarda segn la infeccin tenga menos o ms de un ao de duracin.
Diagnstico de neurosfilis: la exploracin del liquido cefalorraqudeo se recomienda en
pacientes con signos y /o sntomas sugerentes de neurosfilis, se debe realizar en sfilis de
ms de un ao de duracin, la VDRL es especifica para neurosfilis, pero en ocasiones da
resultados falsos negativos; esta baja sensibilidad es mayor en pacientes con tabes dorsal.
El V.D.R.L. es positivo en lquido cefalorraqudeo en el 70% de neurosifilis.
Screening en uveitis o inflamacin ocular inexplicable.
Monitoreo del tratamiento: se debe realizar el seguimiento a los 3,6 y12 meses despus
del tratamiento en los casos de sfilis precoz y congnita y una prueba adicional a los 24
meses en los casos de sfilis de ms de un ao de duracin.
En la sfilis precoz la VDRL cuantitativas muestran un descenso hasta volverse no
reactivas o dbilmente positivas en el curso de un ao de tratamiento. Cuando la
enfermedad es ms larga los ttulos descienden ms lentamente y a veces se alteran poco.
 PCR
Su nombre se debe a la capacidad para precipitar los polisacridos C de los
pneumococos. Su determinacin es importante debido a que aumenta
rpidamente al comienzo de la enfermedad, 14 a 26 horas luego de la
inflamacin o injuria tisular y desaparece en la etapa de recuperacin,
apareciendo slo durante la fase activa del proceso inflamatorio. La PCR se
encuentra comnmente aumentada en: artritis reumatoidea activa,
infecciones virales, tuberculosis, fiebre reumtica activa, infarto agudo de
miocardio, etc. Tambin se la puede hallar luego de una operacin
quirrgica y en gran porcentaje luego de transfusiones sanguneas. La
determinacin de PCR no slo indica la intensidad de la enfermedad sino
tambin la respuesta del paciente a un tratamiento dado.
La PCR se detecta en suero por reaccin con un anticuerpo
especfico adsorbido sobre un soporte inerte de ltex.
La PCR se une a los anticuerpos adsorbidos produciendo la
aglutinacin de las partculas de ltex.
 Procedimiento
I- TECNICA CUALITATIVA
Muestra o Control 25 ul Reactivo A 1 gota (25 ul) Mezclar con un palillo descartable hasta
obtener una suspensin uniforme en toda la superficie del crculo. Inmediatamente
disparar un cronmetro, balancear suavemente la placa y observar macroscpicamente el
resultado bajo un haz luminoso dentro de los 2 minutos.
II- TITULACION
Los sueros positivos pueden titularse efectuando diluciones seriadas en 8 tubos.
a) Colocar 0,5 ml de solucin fisiolgica en cada uno de los tubos.
b) Agregar 0,5 ml de suero al tubo N 1 y mezclar. Transferir 0,5 ml de esta dilucin al
tubo N 2 y mezclar, continuando as las diluciones hasta el ltimo tubo. Las diluciones
as obtenidas equivalen a 1:2, 1:4, 1:8, 1:16, etc.
c) Ensayar cada dilucin segn la TECNICA I
 FR- Latex
FUNDAMENTO DEL MTODO
Los factores reumatoideos (FR) sricos provocan una
aglutinacin de las partculas de ltex recubiertas con
gamma-globulina humana. La aglutinacin de las partculas
de ltex es proporcional a la concentracin de FR y puede
ser cuantificada por turbidimetra
ANTIGENOS
FEBRILES
 SIGNIFICADO CLINICO
Antgenos Febriles es un trmino referido a un grupo de suspensiones
bacterianas, representativo de un nmero de bacterias patgenas para la especie
humana y responsables de la aparicin de infecciones (brucelosis, salmonelosis y
ciertas rickettsiosis) que cursan con un cuadro febril en el husped infectado. La
mejor forma para establecer la etiologa de una enfermedad infecciosa es el
aislamiento e identificacin del agente causal de la misma. Sin embargo, estos
medios de diagnstico no son siempre de fcil aplicacin y es ah donde radica la
importancia del uso de las suspensiones bacterianas en la deteccin de los
anticuerpos presentes en el suero del paciente (mtodo indirecto de diagnstico).
En el diagnstico clnico, los resultados obtenidos con el uso de los Antgenos
Febriles deben ser considerados siempre en relacin a los hallazgos clnicos y
otras pruebas de laboratorio
 ANTIGENOS FEBRILES
PRUEBA CUALITATIVA
Equilibrar reactivos y muestras a temperatura ambiente.
Resuspender el antgeno con suavidad. Aspirar y vaciar varias veces el cuentagotas para
asegurar su homogeneidad antes del ensayo.
Depositar 50 L de suero problema en uno de los crculos de la tarjeta visualizadora.
En la deteccin de anticuerpos antibrucela, 20 L de muestra es suficiente
En crculos adicionales, depositar 1 gota de control positivo y 1 gota de control negativo.
Aadir a cada crculo 1 gota de la suspensin antignica, prxima a la muestra a analizar.
Efectuar la mezcla con ayuda de un palillo desechable, extendindola de forma que cubra por
completo la superficie interior de cada anillo. Emplear palillos distintos para cada mezcla.
Mover la tarjeta a mano o con agitador rotatorio (100 r.p.m.) durante 1 minuto. Observar de
inmediato con la ayuda de una luz adecuada, la aparicin de cualquier signo de aglutinacin.
PRUEBA SEMICUANTITATIVA
Para cada muestra a analizar, pipetear 80, 40, 20, 10 y 5 L
de suero en cada uno de los crculos de la placa
visualizadora.
Ensayar cada una de las diluciones tal como se describe en
los pasos de la Prueba Cualitativa.
PRUEBA EN TUBO
Agitar la suspensin antignica apropiada y aadir 1 gota
en cada uno de los tubos de la serie. Mezclar. Las diluciones
finales del suero sern: 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320,
1:640.
Incubar a 37C durante 24 horas.
Examinar macroscpicamente la presencia de aglutinacin.
 VDRL en embarazadas
EN UNA EMBARAZADA CONTAGIADA DE SFILIS, EL TREPONEMA
PALLIDUM ATRAVIESA LA BARRERA PLACENTARIA, DESDE LOS
1eros., HASTA LOS LTIMOS MESES DEL EMBARAZO. EN EL FETO
EN GESTACIN SE PRODUCE UNA DISEMINACIN HEMATGENA
DEL TREPONEMA, LO QUE ORIGINA UN COMPROMISO
MULTISISTMICO (SEPSIS). POR ESTA CAUSA EN LOS R.N. QUE
LOGRAN SOBREVIVIR, SE OBSERVA QUE LAS MANIFESTACIONES
DE SFILIS CONGNITA CUANDO ESTN PRESENTES, SON
SIMILARES A LAS ETAPAS 2rias. y 3rias. DE LA SFILIS ADQUIRIDA
Y NO HAY LESIN INICIAL (CHANCRO PRIMARIO).
LA PESQUISA DE SFILIS EN LA EMBARAZADA ES UNA
NECESIDAD CATEGRICA Y SE REALIZA MEDIANTE EL
EXAMEN SEROLGICO VDRL.
1er. VDRL = 1er. CONTROL DE EMBARAZO
2do. VDRL = 28 SEMANAS DE GESTACIN
3er. VDRL = 32 - 34 SEMANAS DE GESTACIN
4to. VDRL = DA DEL PARTO
 CASO CLINICO
8 de marzo 9 marzo
VDRL: NR 2dil
B: NR
AcHBs <2.00
Leuco: 6730 6460
Hemtaties: 2680000 2500000
Hb: 7.9 7.4
Hto: 25 24
CASO CLINICO
8 de marzo
VDRL: NR
B: NR
AcHBs <2.00
Leuco: 6730
Hemtaties: 2680000
Hb: 7.9
Hto: 25