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Isabel Oliveira
As modificaes genticas surgiram
como uma consequncia do cultivo
A representao de
sementes de plantas
boas aumentava
em geraes
subsequentes
Variao
natural entre
a populao
Atualmente
DNA recombinante:
Descrito primeiramente em 1972 por Paul Berg
DNA recombinante
DNA Recombinante so molculas de DNA que possuem
fragmentos de DNA derivados de duas ou mais fontes
http://www.labome.com.br/method/DNA-Extraction-and-
Purification.html
1) Plasmdeos
2) Fagos
3) Cosmdeos
4) Fagemdeos
5) Cromossomos artificiais
de bactrias
6) Cromossomos artificiais
de leveduras
7) Vrus
Plasmdeo
Pequenas molculas de DNA
dupla fita circulares
Geralmente no codificam
genes fundamentais mas
conferem resistncia a
antibiticos
Presente em bactrias e
algumas leveduras
Aceitam insertos de DNA de
at 5 kb
(principal desvantagem)
No muito eficiente (menos
de 1 em 1000 plasmdeos
so transformados)
Enzima de restrio
Existem 3 tipos
Tipo II a mais importantes
Reconhecem segmentos de 4-8 bp, precisam de
Mg2+ como cofator
Sequncia palindrmicas
Cliva em dois lugares
DNA Recombinante
DNA de interesse(inserto)
Vetor
Enzima de restrio
DNA Ligase
Clula hospedeira
Transformao
Insero do plasmdeo na bactria (ou seja, inserir o
vetor recombinante dentro do hospedeiro)
Outros exemplos:
Biobalstica
Injeta partculas (geralmente metais
pesados) recobertas com preparaes de
DNA (plasmdeos) que contm o gene de
interesse, diretamente no citoplasma das
clulas alvo.
Microinjeo
Seleo de clulas transformadas
Resistncia a antibiticos
Seleo de clulas transformadas
Fluorescncia
DNA
Recombinante
Transformao:
Eletroporao
Choque trmico
Biobalstica
Microinjeo