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PROTEINURIA

La proteinuria se define como la excrecin urinaria de protenas, en


cantidad superior a los 150mg/24h o de 0 a 8 mg/dl en el caso de
tratarse de una prueba rpida con tira reactiva (muestra al azar).
PATOGENIA
La protenuria es un indicador sensible de la
funcin renal.
En condiciones normales, no estn presentes
en la orina porque los espacios en la
membrana basal glomerular son demasiados
pequeos para atravesar.

Si la M.G se daa,(glomerulonefritis), los


espacios se agrandan y la protena (casi
siempre albumina porque es una molcula
mucho mas pequea que las globinas) entra a
travs del filtro y se excreta en la orina.
LA SELECTIVIDAD DEL CAPILAR GLOMERULAR
DEPENDE PRINCIPALMENTE DE CUATRO FASES:
A) El tamao de la molcula proteica.
Molculas de pequeo tamao como la inulina (PM: 5.200) = COMPLETO.
La albumina (PM: 69.000) = se filtra en cantidades LIMITADAS.
La mioglobilina (PM: 17.000)= se filtra mas que la albumina pero menos
que la inulina.

B) La carga elctrica de la molcula.


En el plasma la albumina se encuentra cargada negativamente, lo
cual disminuye su permeabilidad, debido a la existencia del polianion
(-) que recubre los pedicelos de las celulas epiteliales de los capilares
glomerulares y que la repele.
Lo que provoca una elevada proteinuria.

C) La diferencia de gradiente proteico a ambos lados de la


pared capilar.
D) Los cambios en el flujo sanguneo renal.
FISIOPATOLOGIA DE LA PROTEINURIA

Normalmente, las protenas en orina son


30% albumina, 30% globulinas sricas y
40% protenas tisulares, de las cuales el
mayor componente es la protena de
Tamm-Horsfall.

Aproximadamente 15kg de protenas


pasan diariamente a travs del rin de
un adulto, gracias a la barrera glomerular
selectiva, en orina solo se excretan de
100-150mg.
VALORES NORMALES:
La cantidad normal de proteinuria es de 100 a 150mg/24h.
Estos niveles pueden ser transitorios, permanentes, ortostticos, monoclonales o por sobrecarga.

ADULTOS NIOS

Proteinuria normal: < 150mg/dia. Proteinuria normal: < 4mg/ dia


Proteinuria mnima: > 0,5 g/dia. Proteinuria anormal: 4-40 mg/dia
Proteinuria moderada: 0,5-3 g /da.
Proteinuria intensa: >3g/dia.

La proteina albumina en la orina,(albuminuria), es la proteinuria mas comn, siendo el primer indicio


de la existencia de una posible enfermedad de los riones. Son normales los valores inferiores a 30mg
/24h. Se denomina microalbuminuria cuando los niveles se encuentran entre 30-300mg/24h y
macroalbuminuria cuando el valor es > 300mg/24h.
LAS PROTENAS ENCONTRADAS NORMALMENTE EN LA ORINA:
Proceden:
Del plasma (2/3).
Tercio restante del propio rin y de las vas urinarias.

PROTENAS DE ORIGEN PLASMTICO: PROTENAS DE ORIGEN RENAL:


La albumina constituye el 40%, La principal es la mucoproteina de Tamm-
Horsfall o uromucoide, procedente de la
El resto son globulinas, residuos de molculas de secrecin tubular de la rama ascendente del
inmunoglobulinas, sobre todo cadenas ligeras, etc. asa de Henle y de las clulas del tbulo distal.
CLASIFICACIN DE LAS PROTEINURIAS
SEGN SU DURACIN:
LA PROTENA ESPORDICA O AISLADA:
Es aquella que se presenta sin manifestaciones clnicas.

La proteinuria transitoria: es temporal. Aparece


ocasionalmente en nios y adultos jvenes. Presenta
generalmente un curso benigno, nunca supera los
150mg/24horas
La proteinuria intermitente: aparece en el 50% de la
orinas tomadas al azar y desaparece al cabo de 5-10
aos.
La proteinuria ortostatica o postura: aparece cuando el
paciente esta en posicin erecta y desaparece en
posicin tumbada. Es frecuente en nios, adolescentes y
jvenes, desaparece antes de los 20 anos. Tiene
carcter benigno y puede deberse a una situacin de
hiperlordosis fisiolgica.
LA PROTEINURIA PERMANENTE:
Es siempre patolgica, y debe se motivo de preocupacin.
Puede aparecer sola o acompaada con otras alteraciones urinarias asintomticas (hematuria,
leucocituria, cilindruria, etc).

1. La proteinuria discreta es la excrecin >1g/24 h, este tipo de


proteinuria puede aparecer en la glomerulonefritis crnica,
enfermedad poliqustica renal, diversas tubulopatias y en
varias patologas de las vas bajas del tracto urinario.
2. La proteinuria moderada presenta una excrecin urinaria de
protenas que oscila entre 1 y 3g/24h. Este tipo de
proteinuria aparece en la mayor parte de las enfermedades
renales; glomerulonefritis crnica, mieloma mltiple,
nefropatia diabtica, preeclampsia y diversos processos
inflamatorios o malignos del tracto urinario.
3. La proteinuria intensa se caracteriza por la excrecin de mas
de 3,5g/24h, es siempre sintomtica. Es tpica del sndrome
nefrtico, pero tambin aparece en casos severos de
glomerulonefritis, esclerosis renal, amiloidosis renal, y lupus
eritematoso diseminado.
CLASIFICACIN DE LAS PROTEINURIAS
SEGN EL PUNTO DE VISTA ANATMICO:
PROTENA DE BENCE JONES
Son un grupo de protenas anormales
de bajo peso molecular (PM 22.000
44.000), constituidas por cadenas
ligeras de las Igb capa o lambda, en
condiciones normales es filtrada por el
glomrulo.
Se encuentran en el suero, orina o
ambos, en un 60-80% aprox. de los
casos de mieloma mltiple, y otras
enfermedades que afectan a la medula
sea.
ESTRUCTURA DE LA PROTEINA DE BENCE JONES
PATOGENIA
En los casos de Mieloma mltiple estas
protenas, son producidas por clulas
plasmticas neoplsicas(linfocitos B).
PRUEBA DE PRECIPITACION POR CALOR
La protena de Bence-Jones precipita a temperaturas de entre 40 y
60C, pero se vuelve a disolver a 100 C. al enfriarse, el precipitado
reaparecer alrededor otra vez por debajo de los 40C.

PROCEDIMIENTO:

1. Colocar 10ml de orina centrifuga en


un tubo y acidificar la orina a un pH
5,0-5,5 usando acido actico al 10%.
2. Calentar a bao Mara a 56 C
durante 15min. La formacin de un
precipitado indica protena de
Bence-Jones.
4. Si hay precipitacin, colocar el tubo en agua hirviendo y
dejar hervir por 3min. Una disminucin de la precipitacin
se debe a la presencia de la protena de Bence-Jones, en
tanto que un aumento obedece a otras protenas.
5. Si la precipitacin aumenta a 100 C, filtrar la orina
mientras esta caliente para eliminar las protenas que
interfieren. La protena de Bence-Jones estar en solucin
a esta temperatura y, por lo tanto, permanecer en el
filtrado.
(-)
6. Al enfriarse, la protena de Bence-Jones reaparecer en
el filtrado a aproximadamente 60 C y se disolver
nuevamente por debajo de 40 C. (+)

RESULTADO FALSO NEGATIVO:


Precipitacin muy fuerte de la protena Bj a 56C.
Por lo que se debe repetir el procedimiento en orina diluida.
PRUEBA DE ACIDO TOLUENO
SULFONICO
El reactivo acido tolueno precipita la protena de Bence-Jones y puede
detectar concentraciones de tan solo 0,03 mg/ml.
No precipita la albumina, pero el resultado de la prueba ser positivo
para globulinas, si las concentraciones son superiores a 500 mg/100mL.

REACTIVO:
Acido p-tolueno sulfonico-12g
Acido actico glacial C.S.P.100 Ml.
PROCEDIMIENTO:

1. Colocar 2 ml de orina clara en un tubo de


ensayo.
2. Agregar 1ml, de acido tolueno sulfnico
dejando que se deslice lentamente por la
pared del tubo (aadir el reactivo
demanda 15-30 segundos.)
3. Tapar el tubo con un dedo para mezclar.
4. La formacin de un precipitado al cabo de
5min, indica la presencia de cadena ligeras
libres
RESULTADOS (ELECTROFORESIS PROTEICA)
Un resultado normal (negativo) significa que la muestra tiene tipos normales de
inmunoglobulinas.
El nivel de una inmunoglobulina, no es ms alto que ningn otro o se mantiene dentro de los
valores normales.

VALORES NORMALES:
MUESTRA: ORINA 24/h
Cadena ligera Kappa total: < 0,68 mg/dl
Cadena ligera Lamdda total: < 0,40 mg/dl
Cociente Kappa/lambda: 0,7 6,2

FACTORES QUE PUEDEN MODIFICAR LOS RESULTADOS:


La orina diluida puede dar lugar a un resultado falso negativo.
Las dosis altas de penicilinas o acido acetilsalicilico pueden producir resultados falsos
positivos.
RESULTADOS ANORMALES
NIVELES AUMENTADOS

Mieloma multiple (80%).


Amiloidosis.
Leucemia linfoctica crnica.
Linfoma.
Tumores metastasicos.
Macroglobulinemia de waldenstrom.
Gammapatia monoclonal de sig.
Incierto (GMSI).
Enfermedades reumaticas.
PROTEINURIA RENAL:
LA PROTEINURIA GLOMERULAR:
Se debe al aumento de la cantidad de protenas filtradas en el glomrulo. Las fracciones que se
encuentra en la orina son las mismas del plasma, pero en distintas proporciones.

1. La proteinuria glomerular selectiva esta compuesta casi


exclusivamente de albumina, que constituye mas del 80%
de la proteinuria con pequeas cantidades de globulinas de
pequeo peso molecular, sobre todo beta-globulinas
(transferrina). Solo atraviesa el filtro glomerular.
2. La proteinuria glomerular no selectiva se caracteriza por la
perdida renal de albumina y grandes cantidades de
globulinas de alto peso molecular (gammaglobulinas y alfa-
2 macroglobulina). Suelen acompaar a enfermedades
renales, sobre todo glomerulares de mala evolucin y peor
pronostico.
LA PROTEINURIA TUBULAR:
Esta compuesta por protenas, principalmente globulinas, de bajo peso molecular
(globulinas alfa-2 y beta). Es la llamada triple globinuria de Traeger, con pesos
moleculares inferior a la albumina (entre 10.000 y 20.000 daltons).

Suele aparecer en diversas enfermedades renales, como:


Pielonefritis aguda.
Pielonefritis cronica en actividad.
Enfermedad quistica medula.
Trastornos tubulares congenitos o adquiridos, como el
sindrome de Fanconi.
LAS PROTEINURIAS POSTRENALES:
Son de origen parenquimatoso renal estn constituidas por molculas proteicas del
rin o de las vas urinarias, que pasan a la orina.
Se encuentra la mucoproteina de Tamm-Horsfall, enzimas de membrana, protenas
celulares, protenas derivadas de las hemorragias de las vas urinarias del tracto
urinario, la litiasis renal y la prostatitis son las causas mas frecuentes.

Su estudio presenta escaso


inters desde el punto de
vista diagnostico.
MICROALBUMINURIA LATEX
La importancia clnica de una microalbuminuria est dada en casos como control de embarazo
diabticos, embarazos de riesgo, demostracin precoz de una proteinuria tubular, diagnstico precoz de
una nefropata diabtica.

OBJETIVO: Cuantificacin de protenas en muestras de orina.

FUNDAMENTO:
El mtodo se basa en una reaccin
immunoqumica de aglutinacin donde las
partculas de ltex sensibilizadas con
anticuerpos anti-albmina humana
reacciona con la albmina presente en la
muestra de orina en forma sensible y
especifico, produciendo una aglutinacin
visible macroscpicamente.
Muestra: se recomienda muestras frescas de las primeras
MATERIALES: horas de la maana o 24h. La muestra se debe centrifugar a 1500
rpm durante 5 minutos o filtrar la misma.

Reactivo necesario:
Kit comercial para la determinacin
de microalbuminuria- ltex

Tubos para ensayo de 10ml.


Gradilla.
Pipeta automtica de 20 L.
Pipeta automtica de 500 L.
Equipo: Centrifuga.
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS
1. Negativo: No aparece una aglutinacin visible hasta el tiempo indicado en la
tcnica.
2. Positivo: Aparece una aglutinacin visible en el tiempo indicado en la tcnica.
Esto indica un contenido de albmina en la muestra es superior a 0.02g, se debe
proceder a realizar las diluciones propuestas e informar la concentracin que
corresponde a ltima dilucin donde se observa la aglutinacin

INTERVALO DE REFERENCIA:
Normal: <0.02g/l
Microalbuminuria: 0.02 g/l 0.2 g/l
Macroalbuminuria: >0.2 g/l
ACIDO SULFOSALICILICO PARA LA DETERMINACIN DE
PROTEINURIA
El cido sulfosaliclico es el cido de prueba que se utiliza con mayor
frecuencia por que no requiere el uso del calor.
El cido Sulfosaliclico se emplea para la determinacin cualitativa y
cuantitativa de proteinuria.
METODO DE EXTON ROSE
REACTIVO DE EXTON:
COMPOSICION:
Sulfato de sodio 88g.
cido sulfosaliclico 50g.

PROCEDIMIENTO:
1. Centrifugar una alcuota de orina de 10 ml y luego
utilizar el lquido sobrenadante.
2. Mezclar los volmenes iguales del lquido
sobrenadante y del reactivo de Exton.
3. Clasificar el grado de turbidez.
4. La turbidez es proporcional a la cantidad de
protenas presentes en la orina.
INFORME DE LA TURBIDEZ CON SSA
MTODO COLORIMTRICO CUANTITATIVO PARA LA
DETERMINACIN DE PROTENAS EN ORINA
FUNDAMENTOS DEL METODO:
Las protenas presentes en la muestra reaccionan en medio cido con el complejo Rojo de Pirogalol-
Molibdato originando un nuevo complejo coloreado que se cuantifica espectrofotomtricamente a 600 nm.

REACTIVOS PROVISTOS: Kit Proti-U/LCR


Reactivo (A):
Solucin estabilizada de Rojo de Pirogalol, molibdato de sodio
en buffer.
Standard (S):
Solucin de albmina 100 mg/dl.
REACTIVOS NO PROVISTOS
- Agua destilada.
- Solucin fisiolgica.
- Pipetas y micro pipetas.
- Bao mara a 37o C.
- Espectrofotmetro o fotocolormetro.
MUESTRA : Orina/LCR
a) Recoleccin: obtener orina ocasional o de 24 horas.
b) En caso de que las muestras sean turbias, es conveniente centrifugarlas.
c) Medir la diuresis.

ESTABILIDAD DE LA MEZCLA DE REACCION


FINAL:
El color de la reaccin es estable durante 30
minutos por lo que la absorbancia debe ser
leda dentro de ese lapso.
VALORES DE REFERENCIA :
Orina de 24 horas:
30-140 mg/24h (160 mg/24h en embarazadas)
Orina ocasional:
25 mg/dl
Ante una proteinuria glomerular es interesante el estudio electrofortico de las protenas de
la orina, ya que el tamao de las protenas separadas electroforticamente permite extraer
mltiples conclusiones sobre los diferentes niveles de lesin de la nefrona.
Cuando existen graves alteraciones de la membrana basal glomerular aparecen en la orina
macroproteinas tales como:
La alfa-2-macroglobulina (PM: 900.000).
La IgG (PM: 155.000).
La transferrina (PM:90.000).
AUTOMATIZACION ELECTROFORESIS
Los nuevos equipos de reactivos para
electroforesis de inmunofijacin (EIF)
estn destinados a la identificacin
cualitativa inmunolgica de
componentes monoclonales en suero
humano, orinas/LCR concentrados.
Gracias al nuevo Easy Interlab G26, el
procedimiento de inmunofijacin es
extremadamente rpido y fcil de usar y
en solo 43 minutos se completan los
resultados del primer gel.
Los equipos de reactivos han sido
diseados para su uso con los
instrumentos totalmente automatizados.