Dr. Felix Andueza. MSc.

PhD
1. INTRODUCCION

2. BIORREMEDIACION

A) BIOVENTING
3. TIPOS DE BIORREMEDIACIN B) PILAS
C) ATENUACION NATURAL

4. FUNDAMENTOS DE LA BIODEGRACION

5. FACTORES LIMITANTES
El aumento de la poblacin y el desarrollo industrial sin precedentes
alcanzados durante el siglo XX han elevado la presencia de
contaminantes slidos y lquidos a niveles crticos.

La consecuencia ha sido la aparicin de problemas de

contaminacin que antes se desconocan y para los cuales la
sociedad no estaba preparada.
 La industria qumica produce gran cantidad de compuestos
xenobiticos, cuya estructura qumica difiere de los compuestos
organicos naturales.

Algunos de estos compuestos xenobiticos, con grupos

halgenos y nitrogenados, utilizados como propelentes,
refrigerantes, disolventes, bifenoles policlorados(PCB),
plsticos, detergentes, explosivos y plaguicidas, son
resistentes (recalcitrantes) a la biodegradacin.
 Otros se degradan muy lentamente, de modo
co-metablico slo en presencia de un segundo
sustrato, que es empleado como fuente primaria de
energa, o dan lugar a residuos ,a veces polimricos,
peligrosos para el ambiente.

Algunos de los xenobiticos ms recalcitrantes sufren un

proceso de biomagnificacin en las redes trficas.
Este proceso se inicia con los microorganismos y causa la
acumulacin del xenobitico en los niveles trficos superiores,
donde provoca graves daos ecolgicos.
 Aunque los hidrocarburos del petrleo no sean xenobiticos, su
uso a gran escala y los vertidos accidentales como el caso del
Prestige han provocado daos ambientales graves.

La compresin cientfica de estos fenmenos complejos y

del papel que los microorganismos desempean en ellos es
esencial para prevenir o controlar los daos que pueden
ocasionar los vertidos o fugas de hidrocarburos y
xenbioticos.
 La degradacin de estos contaminantes es un proceso
que se puede dar de forma natural por los microorganismos
autctonos de la zona contaminada siempre que tengan las
vias metablicas apropiadas..

Para mejorar estas posibilidades que los

microorganismos nos pueden ofrecer se estn
desarrollando tecnologas basadas en el uso de los
microorganismos con amplias capacidades
biodegradadoras para su uso en la prevencin y
remediacin de la contaminacin.
 LA BIORREMEDIACIN UTILIZA LA CAPACIDAD NATURAL DE
LOS ORGANISMOS COMO BACTERIAS, HONGOS, LEVADURAS O
PLANTAS QUE ACUMULAN O DEGRADAN LOS ELEMENTOS
TOXICOS EN EL AMBIENTE.
LOS SISTEMAS DE BIORREMEDIACION CONSISTEN PRINCIPALMENTE
EN EL USO DE MICROORGANISMOS NATURALES
(LEVADURAS, HONGOS O BACTERIAS) EXISTENTES EN EL
MEDIO AMBIENTE PARA DESCOMPONER O DEGRADAR
SUSTANCIAS PELIGROSAS EN SUSTANCIAS DE
CARCTER MENOS TXICO O BIEN INOCUAS
PARA EL MEDIO AMBIENTE Y LA SALUD HUMANA

Derrame de petrleo
 LA BIORREMEDIACION O MEDIDAS BIOCORRECTIVAS SE HAN
VENIDO UTILIZANDO EN LA DESCONTAMINACIN DE SUELOS Y
AGUAS CONTAMINADAS CON HIDROCARBUROS DESDE
HACE MUCHOS AOS CON BASTANTE EXITO.

ESTAS TCNICAS BIOLGICAS PUEDEN

SER
DE TIPO:
1) AEROBICO ( EN PRESENCIA DE
OXGENO) O
2) ANAEROBICO (EN AUSENCIA DE
OXGENO)
EXISTEN TRES TIPOS DE BIORREMEDIACION DE
TIPO AEROBICO:

BIOVENTING Ventilacin forzada

del aire en el suelo.

BIOPILAS Compostaje de suelos

ATENUACIN NATURAL Biorrecu-

peracin natural del suelo.
 Estos sistemas de descontaminacin se basan en la digestin de las
sustancias orgnicas por los microorganismos, de la cual obtienen la
fuente de carbono necesaria para el crecimiento de sus clulas y una
fuente de energa para llevar a cabo todas las funciones metablicas
que necesitan sus clulas para su crecimiento

Para que estos procesos metablicos

se lleven a cabo, y puedan ser
utilizados como una tcnica
remediativa, ser necesario que existan
en el medio unas condiciones fisico-
qumicas ptimas
En general, se necesitar la existencia
de determinadas poblaciones de
microorganismos autctonos
capaces de utilizar los hidrocarburos
como fuente nutricional y de energa
Para el diseo de estos sistemas de tratamiento se llevan a
cabo varias etapas de trabajo:

Investigacin y caracterizacin de la contaminacin

Anlisis y eleccin de las medidas biocorrectivas

Evaluacin de la efectividad del sistema elegido

Diseo y evaluacin del sistema

Evaluacin del control y seguimiento

Anlisis e interpretacin de resultados

 La tcnica del bioventing es un tratamiento de biorrecuperacin
de tipo in situ, consistente en la ventilacin forzada del suelo
mediante la inyeccin a presin de oxgeno (aire) en la zona no
saturada del suelo a travs de pozos de inyeccin.

Debido a la aireacin del suelo se va a favorecer la degradacin

de los hidrocarburos por dos motivos:

- por volatilizacin, facilitando la migracin de la fase voltil de

de los contaminantes y

- por biodegradacin, ya que al incrementar la oxigenacin del

suelo se va a estimular la actividad bacteriana.
Los factores a tener en cuenta en la aplicacin del bioventing o inyeccin de aire natural
son:

Se degradarn ms fcilmente las molculas ms pequeas (hasta C20), siendo ms

fcilmente biodegradables los compuestos parafinados o de cadena lineal que los
compuestos aromticos. En general, son favorables los compuestos de alta volatilidad
(presin de vapor mayor de 10 mm de Hg a 20C).

Los suelos deben contener bajos contenidos en arcilla y ser lo ms homogneamente

posible, con un valor de permeabilidad al aire adecuado (> 10-10 cm2).

El principal problema es la biodisponibilidad de losmicroorganismos. Cuanto menor

es la solubilidad de los contaminantes menor ser la biodisponibilidad .

Los aportes de oxgeno deben ser suficientes, as como la existencia de fuentes de

carbono, aceptores de electrones y energa suficientes
 No debe existir producto libre en flotacin sobre el nivel fretico.

Deben existir unas condiciones ptimas de pH (6 y 8), de humedad (12-30% en peso),

potencial redox mayor de -50 mV, temperatura entre 0 y 40 C y los nutrientes del
suelo en relacin N:P de 10:1.

Necesidad de tiempos de actuacin cortos (meses) y coste medio-alto

Derrame de petrleo
 A continuacin hay un esquema que ilustra un ejemplo de
biorremediacin in situ de un acufero contaminado por hidrocarburos.
Biorremediacin in-situ: se intenta acelerar el proceso en el mismo
ambiente modificando las condiciones ambientales o por inoculacin
microbiana.
La tcnica de biopilas es un tratamiento de biorrecuperacin de tipo ex situ

La tcnica consiste en la formacin de pilas de material biodegradable de

dimensiones variables, formadas por suelo contaminado y materia orgnica
(compost) en condiciones favorables para el desarrollo de los procesos de
biodegradacin de los contaminantes.

Estas pilas de compost pueden ser aireadas de forma activa, volteando la pila, o
bien de forma pasiva, mediante tubos perforados de aireacin.
Entre los factores que influyen en la aplicacin de las biopilas destacan:

Los hidrocarburos deben ser no halogenados y deben encontrarse en el suelo

en concentraciones menores a 50.000 ppm.

Dada la necesidad de excavacin y posterior depsito del suelo contaminado,

se requiere una superficie de trabajo relativamente grande cuyas dimensiones
dependen del volumen de suelo a tratar.

Necesidad de una densidad de poblaciones microbianas (>1.000 CFU/gramo

de suelo), condiciones de humedad (40-85% de capacidad de campo),
teperatura (10 y 45C), textura (baja proporcin de arcillas), pH del suelo
adeciadas (6 y 8) y baja presencia de metales pesados (< 2.500 ppm).
Entre los factores que influyen en la aplicacin de las biopilas destacan:
(continuacin)
La concentracin de nutrientes en el suelo cuyo rango normal de C:N:P sea
de 100:10:1.

El tiempo de actuacin puede ser alto (meses a aos) y el costo bajo.

Su caracterstica principal es la utilizacin de los procesos fisico-quimicos de
interaccin contaminante-suelo y los procesos de biodegradacin que tienen
lugar de forma natural en el medio. Estos procesos se conocen como procesos
de biotransformacin natural
 Tambin se conoce como:

Biorremediacin intrnseca: se deja que el propio ambiente natural

resuelva el problema si se determina que en el propio ambiente hay las
poblaciones y condiciones optimas( temperatura, pH, nutrientes etc...).
An as se sigue un control para asegurarse que no se producen
compuestos txicos secundarios. A continuacin se muestra una figura
que esquematiza los procesos de degradacin intrnseca que dispone
el ambiente:
 Los procesos de biotransformacin natural son aquellos que van a reducir la
concentracin de los contaminantes y entre los que se encuentran la dilucin,
dispersin, volatilizacin, adsorcin, biodegradacin y aquellas reacciones
qumicas que se producen en el suelo o en el agua y que contribuyen de
alguna forma a la disminucin de la contaminacin.

Esta tcnica se aplica en aquellos casos en los que exista contaminacin

tanto en suelos como aguas subterrneas producida por hidrocarburos de
tipo halogenado o no halogenado.
Entre los factores que influyen en la eficacia y viabilidad de la atenuacin
natural se destacan:

La exigencia de proteccin y el riesgo de los potenciales receptores durante el

tiempo que dura la atenuacin.

La existencia de unas condiciones geolgicas y geoqumicas favorables.

Las necesidades de reduccin de la masa contaminante en un intervalo

razonable de tiempo (meses a aos), tanto en la superficie del suelo como en
la zona ms subsuperficial del mismo, as como de la calidad de las aguas
subterrneas.

Confirmacin de la existencia de los tipos y nmero de poblaciones de

microorganismos que puedan biodegradar los contaminantes.
 Entre los factores que influyen en la eficacia y viabilidad de la
atenuacin natural se destacan: (continuacin)

Produccin y conservacin en el medio de subproductos de carcter persistente o

ms txicos que los iniciales, durante y despus de la atenuacin natural.

No existencia de producto libre en flotacin sobre el nivel fretico

Para condiciones aerobias la condicin ambiental ptima de concentracin de

oxgeno disuelto en el agua debe ser superior a 0,5 mg/l.
La concentracin de los compuestos utilizados como aceptores de electrones en
condiciones anaerobias debe ser superior a 0,21 mg/l para nitratos, la de Fe3+
para que pueda ser reducido a Fe2+ debe ser superior a 21,8 mg/l y la de
sulfatos mayor de 0,21 mg/l.
 Entre los factores que influyen en la eficacia y viabilidad de la
atenuacin natural se destacan: (continuacin)

El potencial redox debe estar situado entre un rango de -400 y 800 mV.

Existencia de un coeficiente de retardo favorable para que se produzcan los

fenmenos de sorcin con suficiente eficacia.

Que se produzca una dilucin suficiente para que la concentracin se vea

disminuida aguas abajo del foco contaminante.

La dispersin de los contaminantes aguas abajo del foco y en la direccin de flujo

debe ser adecuada para que exista una mayor disponibilidad proporcin entre los
contaminantes y los aceptores de electrones.
 FUNDAMENTO BIOQUMICO DE LA
BIODEGRADACIN

El fundamento bioqumico de la biorremediacin se basa en que en la

cadena respiratoria, o transportadora de electrones de las clulas,
se van a producir una serie de reacciones dexido-reduccin cuyo
fin es la obtencin de energa.

La cadena la inicia un sustrato orgnico (compuestos

hidrocarburados) que es externo a la clula y que acta
como dador de electrones, de modo que la actividad metablica
de la clula acaba degradando y consumiendo dicha sustancia.
 FUNDAMENTO BIOQUMICO DE LA
BIODEGRADACIN
Los aceptores ms comnmente utilizados por los
microorganismos son el oxgeno, los nitratos, el hierro (III),
los sulfatos y el dixido de carbono.

Cuando el oxgeno es utilizado como aceptor de electrones la

respiracin microbiana se produce en condiciones aerobias,
y los procesos de biodegradacin sern de tipo aerobio;

sin embargo, si utiliza los sulfatos o el dixido de carbono se

produce en condiciones reductoras o anaerobias, y los
procesos de biodegradacin sern de tipo anaerobio

Degradacin aerobia:
Sustrato + O2 biomasa + CO2 + H2O

Degradacin anaerobia:
Sustrato + (NO3-, SO42-, Fe3+, Mn4+, CO2) Biomasa + CO2 + (N2, Mn2+, S2+, Fe2+, CH4)
 FUNDAMENTO BIOQUMICO DE LA
BIODEGRADACIN

La concentracin y composicin de la comunidad

microbiana y la tasa de transformacin de contaminantes
est influenciada por diversos factores:

1.- NECESIDAD DE NUTRIENTES. Los nutrientes necesarios para

el desarrollo de los microbios son el fsforo y el nitrgeno. Por
lo general suelen estar presentes en el suelo en cantidades
suficientes, si no los hay es necesario aadirlos al suelo.

2.- pH DEL SUELO. El crecimiento de la mayora de los

microorganismos es mximo dentro de un intervalo de
pH entre 6 y 8.
3.- TEMPERATURA. Generalmente las bacterias y los hongos
crecen bien a temperaturas entre los 15 y los 45 oC. Decreciendo
a temperaturas por encima de los 45 o inferiores o inhibindose
a temperaturas inferiores a los O oC.
 FUNDAMENTO BIOQUMICO DE LA
BIODEGRADACIN

4.- HUMEDAD : los microorganismos requieren unas condiciones

mnimas de humedad para su desarrollo. Un exceso de humedad
puede reduce la concentracin de oxgeno en el suelo inhibiendo
el crecimiento bacteriano.

5.- ESTRUCTURA QUIMICA DEL HIDROCARBURO. Los factores

que ms afectan son la existencia de ramificaciones, la poca
solubilidad en el agua y la carga atmica.
 Al estudiar la biorremediacin hay que tener en
cuenta otros factores que puedan influir
en el rendimiento

Es decir no sirve de nada tener una cepa maravillosa con una

alta eficiencia degradadora y que conozcamos muy bien su
regulacin si hay factores que limiten su verdadera
potencialidad degradadora.

Por lo tanto a parte de la eficiencia de las rutas catablicas y los

procesos microbianos de re-mineralizacin hay que tener en cuenta
que la etapa limitante de la biodegradacin o detoxificacin de la
mayora de compuestos en el medio ambiente se relacionan con la
biodisponibilidad.
 Por eso en este captulo vamos a tratar dos caractersticas
microbianas que pueden aumentar esta biodisponibilidad y
podran ser utilizadas en tcnicas de biorremediacin.

1.- PRODUCCIN DE BIOSURFACTANTES

2.- PAPEL DE LA QUIMIOTAXIS

Es evidente que si el sustrato no es disponible para la clula esta no

lo podr utilizar como sustrato y desgraciadamente esto es lo que sucede con
los hidrocarburos que son altamente insolubles en agua o pueden hacer
uniones hidrofbicas con substratos ( rocas) haciendo difcil su eliminacin.
 Como hemos dicho los hidrocarburos son molculas
muyhidrofbicas que forman micelas entre ellas altamente
insolubles en agua. Esto hace que la superficie de actuacin que
tienen los microorganismos diminuya mucho, por lo tanto disminuye
la biodisponibilidad del sustrato.

Y es que un paso esencial en la degradacin de hidrocarburos

es que estos entren en contacto directo con la membrana para
que sea interiorizado y puedan actuar las oxigenasas.

Por eso dentro de la versatilidad microbiana no es sorprendente que

algunos microorganismos puedan producir una gran variedad de
molculas emulsionantes ( biosurfactantes) que como se ha
demostrado estimula el crecimiento de estas bacterias degradadoras
acelerando por tanto la biorremediacin.
La funcin principal de estos biosurfactantes son:

- Reducir las tensiones entre-fases ( agua-roca por ejemplo).

-Dispersar el petrleo aumentando la superficie de contacto

- Aumentan la biodisponibilidad de compuestos hidrofbicos.

- Tambin tiene funciones evolutivas para los propios

microorganismos.
 La quimiotaxis es la habilidad que tienen algunos microorganismos
flagelados para detectar y responder a compuestos ambientales. Su
respuesta puede ser positiva si se dirige hacia el estmulo (presencia
de alimento) negativa si se aleja del estmulo (sustancias txicas o
desagradables).

En que aspectos podra la quimiotaxis acelerar el proceso de

biorremediacin

la razn mas obvia es que estas cepas sern capaces de entrar en

contacto con el compuesto a degradar reduciendo problemas de
biodisponibilidad.
 Bacterias Hongos
Achrornobacter Leumthrix Allescheria Oidiodendrum
Acinetobacter Moraxella Aspergillus Paecylomyses
Actinomyces Nocardia Aureobasidium Phialophora
Aeromonas Peptococcus Botrytis Penicillium
Alcaligenes Pseudomonas Candida Rhodosporidium
Arthrobacter Sarcina Cephalosporium Rhodotorula
Bacillus Spherotilus Cladosporium Saccharomyces
Beneckea Spirillum Cunninghamella Saccharomycopisis
Brevebacterium Streptomyces Debaromyces Scopulariopsis
Coryneforms Vibrio Fusarium Sporobolomyces
Erwinia Xanthomyces Gonytrichum Torulopsis
Flavobacterium Hansenula Trichoderma
Klebsiella Helminthosporium Trichosporon
Lactobacillus Mucor

Todos los ecosistemas acuticos y marinos contienen algn tipo de microorganismos

degradadores de petrleo