UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE NICARAGUA, MANAGUA

(UNAN-MANAGUA)
Recinto Universitario Rubn Daro (RURD)
Instituto Politcnico de la Salud
Departamento de Microbiologa

GESTION Y CONTROL DE CALIDAD

Tema:
Control de Calidad Interno que se lleva a cabo en el Diagnstico Serolgico en el Centro Nacional de
Diagnstico de Referencia (CNDR) en el periodo comprendido Marzo a Abril del ao 2017.
Integrantes:
Kelvin Josu Rugama Rivera.
Carlos Antonio Sols Soza.
Eduardo Francisco Sirias Palacios.
Alexander Antonio Mercado Latino
Managua, 5 de Julio del 2017
En Nicaragua, el laboratorio de Virologa del Centro Nacional de Diagnstico y Referencia (CNDR) del
Ministerio de Salud ha estandarizado un mtodo serolgico para la deteccin del Dengue, conocido
como MAC- ELISA, la cual consiste en la deteccin de anticuerpos del paciente en la etapa aguda
(IgM).

Es considerado un mtodo rpido, sencillo y econmico, que tiene una elevada sensibilidad y
especificidad, por lo que constituye el sistema de eleccin para la vigilancia seroepidemiolgica del
Dengue. Los resultados de esta tcnica deben interpretarse con cuidado, porque dependen en gran
medida del momento en que se tome la muestra y del tipo infeccin (primaria o secundaria) que
presente la persona afectada.

El control de calidad interno que se realiza en este centro, garantiza la confiabilidad de los
resultados, uniformizando los criterios para su interpretacin y validacin; as como, el cumplimiento
los requisitos y procedimientos especficos para esta tcnica. De esta manera, reducir los errores
que vinculen en la calidad del estudio serolgico como son la recoleccin, manipulacin, transporte,
almacenamiento y preparacin de muestras ensayadas.
 Habana Validacin de los sueros pareados procesados por el MAC-ELISA
Cuba 2005

El Instituto de Medicina Tropical Pedro Kour, realizo control de calidad a 624 muestras de
Habana suero procedentes de individuos con sntomas de enfermedad eruptiva febril, colectadas durante
Cuba 2005 epidemias de dengue, se obtuvo una sensibilidad de 97,27 % y una especificidad de 97,47 %

El Centro de Investigaciones en Enfermedades Tropicales, evaluaron las caractersticas

Colombia operativas de la prueba de ELISA-IgM. La prueba evidenci sensibilidad: 29,9%; especificidad:
2008 99,1; valor predictivo positivo (VPP): 96,2%; valor predictivo negativo: 65,6%

Evaluacin sobre la concordancia entre la prueba rpida Dengue Duo IgM & IgG y el MAC ELISA en
Costa Rica el Centro Nacional de Referencia de Virologa (CNRV)
2008
La amenaza del Dengue no se debe, ni se puede enfrentar aisladamente en las actuales condiciones
mundiales. Los pases centroamericanos deben actuar conjuntamente y de manera coordinada para
solucionar este problema. En el caso especfico del diagnstico de laboratorio, se debe realizar una
integracin de la metodologa que se utiliza para de esa forma mejorar la calidad de los resultados y dar
respuesta oportuna ante una situacin emergente.

En Nicaragua, el laboratorio de Virologa del Centro Nacional de Diagnstico y Referencia (CNDR) del
Ministerio de Salud ha estandarizado un mtodo serolgico para la deteccin del Dengue, conocido como
MAC- ELISA, la cual consiste en la deteccin de anticuerpos del paciente en la etapa aguda (IgM). Es
considerado un mtodo rpido, sencillo y econmico, que tiene una elevada sensibilidad y especificidad, por lo
que constituye el sistema de eleccin para la vigilancia seroepidemiolgica del Dengue.

El propsito de este trabajo es de obtener un amplio conocimiento acerca del control de calidad interno que
se realiza en este centro de referencia; as como, evaluar el cumplimiento los requisitos y procedimientos
especficos para esta tcnica, con el fin de brindar a la poblacin un resultado valido y veraz que contribuya
a la identificacin ms temprana de la enfermedad.
Cul es el Control de Calidad Interno que se lleva a cabo en el Diagnstico
Serolgico en el Centro Nacional de Diagnstico de Referencia (CNDR) en el
periodo comprendido Marzo a Abril del ao 2017?
PREGUNTAS DIRECTRICES
Cmo verificaremos los controles aplicados a ensayos individuales para evaluar la
validez de los resultados obtenidos?
Qu identificaremos las posibles fuentes potenciales de errores aplicados en esta
tcnica, as como en los requisitos y procedimientos especificados al momento de la
realizacin del mtodo?
Cmo comprobaremos que se han llevado a cabo las medidas preventivas o
correctivas en las etapas del proceso de la muestra?
Objetivo General
Evaluar el Control de Calidad Interno que se lleva a cabo en el Diagnstico
Serolgico en el Centro Nacional de Diagnstico de Referencia (CNDR) en el
periodo comprendido Marzo a Abril del ao 2017

Objetivo Especficos
Verificar los controles aplicados a ensayos individuales para evaluar la
validez de los resultados obtenidos
Identificar las posibles fuentes potenciales de errores aplicados en esta
tcnica, as como en los requisitos y procedimientos especificados.
Comprobar que se han llevado a cabo las medidas preventivas o correctivas
en las etapas del proceso de la muestra.
ELISA (Enzyme Linked Inmuno Sorbent Assay) es una tcnica sensible que nos
permite detectar antgenos o anticuerpos en fluidos biolgicos. Este inmunoensayo
involucra la fijacin de antgeno o anticuerpos sobre una fase slida. En ambos
casos se formar el complejo antgenoanticuerpo, el cual ser unido por una anti-
inmunoglobulina marcada inmunoenzimaticamente.
Tipos de ELISA:
ELISA Directo
ELISA Indirecto
ELISA Competitivo
ELISA Sndwich (Antigens M Antibody-capture)
Principio de la tcnica
Las tiras sern sensibilizadas con una Inmunoglobulina de carnero anti IgM humana, la cual
reaccionara con los anticuerpos de clase IgM presentes en la muestra del paciente. Al adicionar
el antgeno del virus del Dengue (VD) este reaccionara con las Inmunoglobulinas M capturadas
previamente si estas son especficas para el VD.
Posteriormente se adiciona el conjugado, formado por
inmuglobulinas anti VD acopladas a la enzima peroxidasa
del rbano. Si las reacciones previas han sido especficas
el conjugado reaccionar con el antgeno del VD. Cuando se
adiciona el substrato este es degradado por la enzima
peroxidasa traducindose en un cambio de color en la
reaccin en las muestras positivas.
Obtencin e identificacin de la muestra
Toda muestra a analizar debe ser considerada como material potencialmente
infeccioso y seguir las medidas de bioseguridad establecidas en el Manual de
Procedimientos Tcnicos para el Diagnostico del Dengue. Debe ser acompaada con el
envo con la ficha clnica y epidemiolgica completa.
Transporte y almacenamiento de la muestra al
laboratorio.
Las muestras a procesar deben ingresar en medio de
transportes adecuados y sin dalo alguno. De la misma manera
han de estar rotuladas con el cdigo y fecha de obtencin de
muestra y ser conservadas en refrigeracin (4C), hasta su
respectivo procesamiento.
Control de almacenamiento de los reactivos
Para llevar a efecto el control del almacenamiento de los reactivos es preciso, en primer
lugar, realizar un registro de los reactivos en uso y reserva. Tambin se debe procurar
que su conservacin tenga lugar segn las condiciones del fabricante, marcando los
contenedores con su contenido, concentracin, requerimientos de conservacin y fecha de
preparacin.
Segn la naturaleza y componentes de los reactivos se han de
tener diversas precauciones. Los antgenos se mantendrn a la
temperatura requerida y, preferiblemente, liofilizados.

Los sueros patrn se titularn frente a su antgeno y se

conservarn a 20 C en pequeos viales. Por su parte, el agua
tiene otras implicaciones
Mantenimiento y calibracin de equipos
La validez del ensayo debe de hacerse de acuerdo a las indicaciones del kit ms el suero
control de calidad interno.
Calcular el valor de corte y la zona indeterminada segn indicaciones del kit. Todo kit debe
indicar la zona gris o indeterminada
Utilice protocolos de trabajo de acuerdo a la tcnica a utilizar
Emplear equipos e instrumentos en buenas condiciones de operatividad con mantenimiento
preventivo y calibrado (incubadora, lector ELISA, lavador de placas, pipetas).
Seguir los instructivos de uso de cada equipo, chequear los filtros del lector ELISA antes de
iniciar los ensayos y llevar el registro de tiempo de uso.
Preparar los protocolos de trabajo o mapas de distribucin de muestras que sern
procesadas.
Realizar y registrar el control diario de la temperatura ambiental del laboratorio y de los
siguientes equipos: Refrigerador donde se conservan los kits, incubadora empleada para los
pasos de incubacin 37 C y congeladora donde se conservan los sueros controles y otros
reactivos.
 Etapa Analtica

Es una de las fases del control de calidad donde se realizan las pruebas solicitadas a los
anlisis, obtenindose su resultado y siendo validadas e interpretadas por los facultativos
especialistas en laboratorio

Control de la preparacin Variacin analtica Parmetros de validacin Estudio estadstico de

de la muestra los datos serolgicos

Errores Sistemticos Sensibilidad Medidas de posicin y

Control de realizacin del
Errores Aleatorios Especificidad variabilidad de los
ensayo
Control de calidad de Valor Predictivo datos
la prueba de ELISA Positivo (VPP)
Evaluacin de los Valor Predictivo Monitoreo de los
mtodos serolgicos Negativo (VPN) procesos serolgicos del
Indicadores del valor tamizaje
de las pruebas de
tamizaje
Control Interno
Grficas de Control
Uso del suero Control interno
Esta fase comprende la distribucin de informes y el archivo de muestras. Se suelen
incluir en esta fase procesos transversales como la gestin del almacn, la gestin de la
calidad y el anlisis estadstico.
Todos los datos del control de calidad se deben revisar,
firmar por el supervisor o director del laboratorio y
guardar, al menos, durante dos aos en un lugar
fcilmente accesible para su posterior revisin en caso
necesario, siempre cumpliendo la legislacin sobre
proteccin de datos del enfermo.
 Tipo de
estudio
rea de
estudio

Mtodos y Universo y
tcnicas Muestra
Diseo
metodolgico

Criterios de Criterios de
exclusin inclusin
 Variables Concepto Indicador Valor Criterio Instrumento
Es una sustancia de la misma Criterios CPA > 0.500
naturaleza que la muestra problema, de CPB > VC Positivo
Sueros con los parmetros de uno o varios Validacin Grfica de Levey
Controles analitos presentes, valorados y Jennings
de la
certificados que validan los resultados CN < 0.150 Negativo
de una tcnica analtica. Prueba
Es la diferencia entre el valor
Errores de verdadero y el obtenido Sistemticos Presente
Reglas de Grfica de Levey
Procedimiento experimentalmente, la cual no sigue
Westgard Aleatorios Ausente Jennings
s una ley determinada y su origen est
en mltiples causas.
Son las normas que minimizan los
Pre-analtica Grfica de Levey
errores que estn presentes en las Cumplen
Medidas Etapas de Jennings
etapas de procesos, con el fin de Analtica
Preventivas Procesos No cumplen
mantener un trabajo eficiente y de
Post-analtica
calidad.
 El control de calidad supone necesariamente la puesta en marcha de sistemas que en todo momento
permitan verificar la rectitud con que se realiza en la etapa analtica. Se evalu el control de calidad interno en
la determinacin serolgica del virus del Dengue en el Centro Nacional de Diagnostico de Referencia (CNDR).
La evaluacin y se observacin se hizo a travs de grficas LeveyJennings, la cual cuyos valores de media y
desviaciones estndar fueron calculados, presentando algunos variaciones en los resultados.

Bsicamente, el error ms comn ha sido el aleatorio, ya que la mala tcnica de pipeteo de los operarios pudo
haber afectado la reproducibilidad e inclusive dejndolo impreciso. No obstante, no todos los mtodos
analticos estn sujetos a las mismas fuentes de error. Ciertos problemas se dan con mayor frecuencia con
algunos sistemas ms que con otros. Debido a las importantes decisiones que se toman a partir de los datos
obtenidos por los instrumentos de anlisis es necesario para llevar a cabo un programa de control de calidad.

Los operadores habituales con frecuencia pueden reconocer los problemas ms comunes en un sistema
analtico dado y son ms hbiles en la resolucin problemas que los operadores no habituales. Por dichas
razones, el conocimiento ganado con la experiencia debera ser aprovechado para ayudar a que otros
operadores identifiquen los problemas y tomen acciones correctivas apropiadas, gracias a la aplicacin de las
reglas de Westgard o a partir de las grficas de Levey Jennings que a partir de estas herramientas surge la
necesidad de crear medidas preventivas o correctivas,