REKAYASA GENETIKA

(GENETIC ENGINEERING)

DR.Restu Syamsul Hadi, MKes.

 What is genetic engineering?
Definisi:
Perubahan genetik suatu organisme, atau keturunan,
teknik untuk menghilangkan karakteristik bahan
yang tidak diinginkan atau untuk menghasilkan
bahan yang baru yang diinginkan.

Penambahan, penghapusan, atau manipulasi sifat tunggal

dalam organisme untuk menciptakan perubahan yang
diinginkan
Isolasi dan pemurnian DNA
Isolasi DNA bakteri
Isolasi DNA plasmid
Pemurnian secara kimiawi dan enzimatis

Berbagai jenis dan karakterisasi vektor

vektor plasmid
vektor yeast
vektor bakteriofag

Enzim restriksi dan ligase

Jenis enzim restriksi
Faktor yang berpengaruh terhadap enzim restriksi
Faktor yang berpengaruh terhadap enzim ligase
Teknik Elektroforesis dan PCR
Faktor yang berpengaruh dalam elektroforesis
Faktor yang berpengaruh terhadap PCR

DNA sekuensing dan hibridisasi

southern blot
northern blot
western blot

DNA rekombinan dan Transformasi

Isolasi
Restriksi
Sel kompeten
Transformasi
 Rekayasa genetik pada :
Rekayasa genetik pada hewan
Rekayasa genetik pada tumbuhan
Rekayasa genetika pada manusia

Produk transgenik, keamanan dan bioetika

Biosafety
bioetika
GMO dan genetically modofied foods
 Rekayasa genetika, juga dikenal sebagai
teknologi DNA rekombinan, berarti mengubah
gen dalam organisme hidup untuk menghasilkan
Genetically Modified Organism (GMO)
dengan genotipe baru
Berbagai jenis modifikasi genetik yang mungkin:
memasukkan gen asing dari satu spesies menjadi
- spesies lain,
- membentuk organisme transgenik;
- mengubah gen yang ada sehingga produknya berubah, -
mengubah ekspresi gen sehingga ditranslasikan lebih sering
atau tidak sama sekali
 MENGAPA ILMUWAN MENGEMBANGKAN REKAYASA GENETIKA..?

Awalnya manipulasi genetik secara tradisional

seperti : pemuliaan selektif untuk meningkatkan nilai gizi tanaman
terlalu lambat

Pengenalan gen dari satu spesies yang berasal dari organisme ke organisme
dari spesies yang berbeda (organisme transgenik)
Kloning gen untuk menentukan fungsinya
Mengubah fenotip suatu organisme untuk meningkatkan sifat
yang diinginkan

Rekayasa genetika dengan teknik molekuler

Memungkinkan untuk menciptakan perubahan genetik lebih besar
pada kecepatan yang jauh lebih cepat
Produksi bahan farmasi dalam jumlah besar
 Teknik Dasar Rekayasa
Genetika
Selective Breeding
Tanaman atau hewan dengan karakteristik yang diinginkan paling banyak
digunakan untuk pemuliaan lebih lanjut

Hybridization (Crossbreeding)
Menggabungkan strain yang berbeda spesies untuk menggabungkan
karakteristik terbaik dari keduanya.
(burung dara + perkutut = sinom)
Recombinant DNA Technologies
Transformasi
Basic steps in genetic engineering

1. Isolasi gen
2. Insersi ke dalam host menggunakan
vector
3. Perbanyak copy DNA sebanyak mungkin
4. Pemisahan produk gen yang dihasilkan
5. Ekstraksi produk gen yang diinginkan
 Fluorescent proteins are a useful tool in
biotechnology
Menjadi petanda adanya ekspresi gen dan protein target dalam
sel-sel hidup suatu organisme

Paling banyak digunakan adalah green fluorescent protein (GFP) pertama kali
diisolasi dari Victoria aequorea (ubur-ubur), dapat dilekatkan ke hampir semua
protein dan yang menarik dan masih dapat menjadi fluorescent
molecule.

Dapat digunakan untuk melokalisasi protein yang sebelumnya belum di-

karakterisasi untuk memvisualisasikan dan melacak protein untuk lebih
memahami peristiwa selular.

Dapat digunakan untuk melihat proses perkembangan

 Hewan Transgenik

Tikus transgenik dapat digunakan untuk mempelajari sistem kekebalan

tubuh dan penyakit genetik

Babi : Faktor VIII pada pembekuan darah, organ-organ untuk transplantasi

Hewan lain : hormon pertumbuhan IL-2 (kanker), albumin

 Organisme rekombinan

Tanaman tahan hama

jagung (gen toksin dari Bacillus thuringiensis
yang dapat membunuh serangga)
Tanaman tomat
Golden rice (beta-carotene)
Plant-based vaccines
Genetically Modified Organisms

Herbicide-resistant plants
Bt cotton/corn (toxin gene from
Bacillus thuringiensis that kills insects)
Flavr-Savr tomatoes
Golden rice (beta-carotene)
Plant-based vaccines
 Genetic engineering of Bt-resistant corn (Bt-corn)

Clone Bt toxin gene from bacteria and express in plants

Bt-transgenic plants are resistant to insects, no need for spraying

insecticide
Tanaman jagung tidak perlu lagi insektisida, serangga/ulat akan mati bila
memakan jagung
 Contoh penerapan rekayasa genetika pada tanaman
Golden Rice containing genes for production of vitamin A

Rice is a major staple food for half of the worlds population.

Rice grains (endosperm) lack several essential nutrients,
including vitamin A and its precursors (-carotene).
Vitamin A deficiency causes blindness and weakness of the
immune system (effects ~ 400 million people worldwide).
 HUMAN GENETIC ENGINEERING
Rekayasa genetika manusia berarti mengubah gen dalam sel manusia
yang hidup

Misalnya pada penderita penyakit paru-paru yang disebabkan oleh

gen yang cacat dalam sel paru-paru. Dengan cara memperbaiki gen-
gen memungkinkan akan sembuh .

Mengubah gen dalam sel hidup dengan menempatkan gen baru yang
diinginkan ke virus yang diperbolehkan untuk masuk ke sel-sel
manusia dan yang memasukkan gen baru ke dalam sel bersama
dengan sebelumnya
HUMAN GENETIC ENGINEERING
 "Somatic "genetic engineering
Rekayasa genetika yang menargetkan gen di organ
tertentu dan jaringan tubuh orang yang ada tanpa
mempengaruhi gen dalam telur atau sperma.
Percobaan transfer gen somatik sedang menjalani
uji klinis, dengan hasil yang beragam sampai saat
ini. Suatu hari nanti mungkin akan dapat digunakan
dengan efektif
 "Germ line" genetic engineering

Rekayasa genetika yang menargetkan gen dalam

telur, sperma, atau embrio sangat awal
Perubahan yang mempengaruhi setiap sel dalam
tubuh individu yang dihasilkan, dan diwariskan
kepada semua generasi berikutnya

[note: The term "somatic" comes from the Greek "soma" for "body."
The term "germline" refers to the "germ" or "germinal" cells, the eggs
and sperm.
Produk DNA Recombinant untuk terapi
pada manusia

Insulin (diabetics)
Factor VIII (males w/hemophilia A)
Factor IX (hemophilia B)
Human growth hormone
Erythropoietin (anemia)
Angiostatin/endostatin(anti-cancer drugs)
leptin
Genetically Engineering Humans

Bone marrow supplies stem cells

Successful replacement of gene

for enzyme needed for
lymphocyte development
DESIGNER
BABY
 Kesulitan pada Rekayasa Genetika
Manusia

Inserting gene in correct cells

Inserting gene so it is expressed correctly
Orientation
Regulation
Controlling virus vector
Ethical issues
 Genetic engineering of plasmid

Some considerations:
- Ti plasmid is 200 kb - too big for easy cloning
need to remove tumor-inducing genes from T-DNA
 Rekayasa Genetika
di bidang Farmasi

Pharmacology-preparation, use, and affect of drugs

tied to health and medicine
potential production of drugs is great
hormone production-natural in endocrine system of
mammalian body

-bacteria engineered to produce hormone

-fermentation known as bioprocessing
 DNA
protein

drugs are so complex they can only be synthesized in a living system