PRAKTIKUM HEMATOLOGI

PENENTUAN GOLONGAN DARAH A B O

CROSSMATCH DAN COOMBS TEST

REVERSE GROUPING
 Pendahuluan

Imunohematologi
Reaksi imunologik berkaitan dengan kom
ponen darah
Klinis penting untuk kasus:
-Transfusi
-Transplantasi
-Aloimunisasi(Antigen Rh)
-Dx Pemeriksaan Destruksi eritrosit
-Kedokteran Forensik
 Kenapa Belajar Imunohematologi?
- Membran eritrosit mampu memicu antibodi, kenapa?

Ada pengaturan gen untuk gol.darah

Ada enzim yang menentukan gol.darah

Ada senyawa yang membentuk gol darah

Gol.Darah merupakan substrat antigen yang terdapat pada

permukaan sel darah, cairan, dan jaringan.

Inilah yang mendasari terjadinya reaksi imunohematologi

I. PENENTUAN GOLONGAN DARAH ABO
A. Metode Kaca Obyek
1. Prinsip : reaksi Ag-Ab
2. Indikasi
3. Alat & bahan
4. Cara kerja :

1 tts serum 1 tts darah

Aglutinasi ?

Garam Faali
Anti A

Anti B
 5. Hasil : lihat adanya aglutinasi
6. HR :
aglutinasi serum anti A : gol darah A
anti B : B
anti A+B: AB
tidak terjadi aglutinasi : O

B. Metode Tabung
1. Prinsip : Reaksi Ag-Ab
2. Indikasi
3. Alat dan Bahan
4. Cara Kerja :
a. buat suspensi eritrosit:

3x 1000 RPM Supernatan

1' dibuang
2 tts darah
+
Lart saline

Pencucian ulang 3x 98 tts saline

1 tts
b.

Anti A Anti B Anti AB Anti D kontrol

+ 2 tts 1000 RPM

Suspensi eritrosit campur
1
5. Hasil : lihat adanya aglutinasi
6. HR

Aglutinasi pada Penilaian

Anti A Anti B Anti Anti D Saline Gol dar Rh
AB ah
+ - + + - A +
- + + - - B -
+ + ++ - - AB -
- - - - - O -
II. REAKSI SILANG & COOMBS TEST
1. Prinsip :
Rx silang mayor : serum P + suspensi eritrosit D
Rx silang minor : serum D + suspensi eritrosit P
2. Indikasi
3. Alat & Bahan
4. Cara kerja :
a.
3000 RPM Pisahkan plasma
3 dan endapan
P D
1 tts 1tts
b. Plasma P Plasma D

M m
 c.
1cm Dengan pipet tetes
Campur naik-turun 1000 RPM
NaCl 3 menit
P D

endapan
Supernatan
Dibuang
1tts Ulangi 3X
darah cuci
d.
+ 24 tts
NaCl Campur suspensi
dg pipet

P D
e. 1 tts suspensi D 1 tts suspensi P

1 tts plasma P 1tts plasma D

M m

1000 RPM
3 mnt ?

f. 2 tts bovin

1000 RPM
Inkubasi 37*
1 ?
15

M m
 g. NaCl
campur 1000 RPM Supernatan
3 mnt Dibuang
M m
Ulangi 3X
(spt awal)

2 tts Coombs

3000 RPM
1
5. Hasil
e) aglutinasi : tdk cocok, hentikan tes
f ) aglutinasi : tdk cocok, hentikan tes
tdk hemolisa : lanjutkan dgn Coombs test
g) aglutinasi : Coombs +
tdk aglutinasi : Coombs -
 Harga Rujukan
Cross Match
M m Keterangan

+ + Tdk boleh utk

transfusi
_ + Lihat titer AB,
walaupun titer
rendah tetap tidak
boleh utk transfusi
+ _ Tdk boleh utk
transfusi
_ _ Boleh utk transfusi
 III. Reverse Grouping
1.Prinsip: Utk Mengetahui aglutinin serum probandus dgn a
ntigen yang sudah diketahui
2.Indikasi
3.Alat dan Bahan
4.Cara kerja: plasma
darah

sentrifuge 3000 rpm

3ment

eritrosit
 Reverse Grouping(Cont)
2 tts plasma 2 tts plasma

2 tts Suspensi eritrosit A 2 tts Suspensi eritrosit B

Lihat ada tidaknya

aglutinasi
 Harga rujukan
Eritrosit A Eritrosit B Aglutinin Gol.darah

+ _ Anti A B

_ + Anti B A

+ + Anti A O
Anti B
_ _ _ AB
TERIMA KASIH