INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLGICAS

QUMICO FARMACUTICO INDUSTRIAL

DEPARTAMENTO DE MICROBIOLOGA

TEMA: AISLAMIENTO Y MORFOLOGA COLONIAL DE

ACTINOMICETOS

ASIGNATURA: MICROBIOLOGA GENERAL

PROFESORAS: DRA. MARGARITA JUREZ MONTIEL

MVZ MYCHEL A. PREZ GARCA

E1/L3: CABEZA FLORES ALEJANDRA

GIL RUIZ LUIS NGEL
E2/L4: AGUILAR RESNDIZ ARACELI
HERNNDEZ RUIZ JUAN VICTOR
 Actinobacterias
Gram + con alto
Gram + con alto contenido de A-T
contenido de G-C
Actinobacterias
Actinomicetos
Actinomicetos.

Los actinomicetos constituyen un grupo grande y diverso de

microorganismos gram positivos.

Pared de peptidoglicano
Filamentosos Grampositivos
gruesa

Procariotes Alto porcentaje de

guanina - citocina
 Dnde se encuentran?

Loa actinomicetos se encuentran en todos los ecosistemas del mundo.

Suelo (64% de la biomasa bacteriana)

Pantas y animales (mucosas, tracto gastrointestinal)

- pueden ser patgenos oportunistas
 Los actinomicetos reciclan nutrientes

La mayora de los
actinomicetos son quimio
hetertrofos:

Usan la materia orgnica

como fuente de energa
(celulosa, quitina, lignina).

-Saprofitos: obtienes
nutrientes y energa a partir
de productos de desecho
(cadveres, excremento).

Ciclo del nitrgeno

 Frankia

Gnero de bacterias filamentosas fijadoras de nitrgeno que viven en

simbiosis con plantas angioespermas (actinoricica).

Aproximadamente 15% de las reservas de nitrgeno

Ndulos de fijacin de nitrgeno

 Streptomyces

A B
Los antibiticos limitan la
competencia por nutrientes
al inhibir o destruir a otros
microorganismo

Halos de inhibicin de A) Sterichia coli

y B) Staphilococus aureus
por Streptomyces sp

Streptomyces
griseus

Bioq. Selman Abraham descubridor de la

Estreptomicina, primer frmaco contra la
tuberculosis.
 Diversidad de aplicaciones
Streptomyces produce ms de dos tercios de los antibiticos clnicamente tiles:
COLONIAS DE ACTINOMICETOS

Secas Duras
Lisas
(algunas)

Ornamentadas.
Mate

Hundidas en el Hidrofbicas
medio de
cultivo
Algunas pueden
producir pigmentos
que son secretados
al medio de cultivo
 MORFOLOGA MICROSCPICA.

Corynebacterium. Mycobacterium.
Steptomyces. Nocardia.
Micelio microsifonado.
 Tipos de esporas.

Artrosporas. Conidiosporas.
Esporangiosporas.
 Gneros.

Streptomyces
Actinomicetos
Nocardia
aerobios
Rhodococcus parcialmente
Gordonia AAR
Tsukamurella
 Objetivo

Aislar y observar los actinomicetos de acuerdo

con su morfologa colonial y microscpica.
 Metodologa

I. Siembra en los medios de cultivo.

Diluciones a
Extender
. . . partir de la Inocular 0.1
con varilla
muestra de ml
acodada.
suelo
4.5 ml

0.1 ml
AGC Calcular Contar colonias en sembrar
nmero de cajas que tengan por estra
UFC/Ml. entre 25 y 250 cruzada

II. Descripcin de la morfologa colonial.

Describir las once

caractersticas de
morfologa colonial de las
colonias sospechosas de
ser actinomicetos
 III. Descripcin de la morfologa microscpica

Teir un frotis
con la tcnica
de Gram
Observar a inmersin y
describir:
Hacer dos frotis de
- Presencia de micelio
cada una de las
microsifonado.
colonias descritas
- Esporas.
Teir un frotis con
la tcnica de
Ziehl- Neelsen.
Medios de cultivo.

Gelosa Czapek + Cicloheximida

Gelosa Arginina Glicerol + Cicloheximida

Gelosa Czapek.

Composicin: Cultivo de bacterias y hongos del

Sacarosa 30.00 g suelo.
Nitrato sdico 2,00 g La nica fuente de Carbono es la
Fosfato dipotsico 1,00 g Sacarosa
Sulfato de magnesio 0,50 g La nica fuente de Nitrgeno es el
Cloruro de potasio 0,50 g nitrato sdico.
Sulfato ferroso 0,01 g El tiempo y la temperatura de
Agar agar 15,00 g incubacin vara segn las
Agua, aforar a 1000 mL especies.
Ajustar el pH a 7.3
Gelosa Czapek + Cicloheximida

Cicloheximida: Inhibe la
sntesis proteca en
organismos eucariotes.

Concentracin
final de 50g
 Glicerol Arginina Agar.
Medio selectivo para los
actinomicetos.
Arginina 1.0 g
Glicerol 12.5 g
Cicloheximida (50 g / ml) K2 HPO4 1.0 g
NaCl 1.0 g
MgSO4 .7H2 O 0.5 g
Fe2 (SO4 )3 .6H2O 0.01 g
CuSO4 .5H2O 0.001 g
Para evitar el crecimiento de hongos. ZnSO4 .7H2O 0.001 g
MnSO4.H2O 0.001 g
Agar 15g
La base para la selectividad es la
alta relacin carbono / nitrgeno, Agua, aforar a 1000 mL
que favorece a los actinomicetos Ajustar pH a 6.9 7.1
sobre las bacterias unicelulares
 Resultados

Cuenta variable de actinomicetos (UFC/g) del suelo.

Gelosa Czapek + --

cicloheximida

Gelosa Arginina Glicerol + 4x103

Cicloheximina
 Descripcin de la morfologa colonial.
Caractersticas Colonia 1 Colonia 2
Medio de cultivo AGC AGC
Tamao 3 mm 2 mm
Color Blanco Blanco
Forma Circular Circular
Elevacin Convexa Plana
Superficie Filamentosa Filamentosa
Bordes Entero Ciliado
Luz reflejada Mate Mate
Luz transmitida Opaca Traslcida
Aspecto Seco Seco
Consistencia Dura Dura
Color del micelio areo Blanco Blanco
Color del micelio Caf Gris
vegetativo
Pigmento difusible Caf -----
 Descripcin de la morfologa microscpica
Caracterstica Colonia 1 Colonia 2
Micelio microsifonado + +
Presencia de esporas - -
Tipo de esporas - -
Tincin de Gram + +
Tincin de Ziehl- Neelsen - -

Figura 1. Tincin de Figura 2. Tincin de Figura 3. Tincin de

Gram de la colonia 1 Gram de la colonia 2 Ziehl Neelsen de la
100 X 100 X colonia 1
100 X
Fig 4. Tincin de Ziehl- Fig 5. Tincin Gram (+)
Nelsen esperada para esperada.
actinomicetos NAAR.
 Cuestionario.
1.-A que dominio Woese pertenecen los actinomicetos?
R= Al dominio bacteria.

2.-Cules son las caractersticas sobresalientes de morfologa

colonial y microscpica que permiten distinguir a los actinomicetos
de otros grupos microbianos?
R= Morfologa colonial: Colonias secas, duras, mate, ornamentadas o
lisas, hundidas en el medio de cultivo e hidrofbicas.
Morfologa microscpica: Filamentosos con micelio microsifonado.

3.- Mencione con ejemplos tres campos del conocimiento en donde

los actinomicetos sean importantes.
R= -Produccin de antibiticos y vitaminas. (Biotecnologa y medicina)
-Promocin de crecimiento vegetal. (Biofertilizantes y agrcolas)
-Actividad anticancergena. (Quimioterapia)

4.-Mencione cinco ejemplos de actinomicetos (genero y especie)

productores de antibiticos.
R= -Streptomyces griseus. -Streptomyces brasiliensis.
-Marinispora sp.
-Streptomyces orientalis.
-Streptomyces mediterranei.