Genetica Molecular

Biologa.
2 bachillerato
Unidad 14. Gentica molecular
Gentica molecular
14
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
Biologa. 2 bachillerato
Gentica molecular
14 1. El ADN como depositario de la informacin
gentica.
2. Concepto molecular de gen.
3. Replicacin del ADN
1. Etapas de la replicacin
2. Diferencias entre el proceso replicativo en
procariotas y eucariotas.
4. Expresin de la informacin gentica: dogma
central de la biologa molecular.
5. Transcripcin.
6. El cdigo gentico
7. Traduccin.
8. El genoma de procariotas y eucariotas
9. El proyecto genoma humano.
10. Concepto de proteoma y protemica.
Aplicaciones en biociencias.
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1. El ADN como portador de informacin gentica
Interfase
A principios del
siglo XX se saba
Anlisis de los
Cromosomas.
(ADN + protenas)
Collar de
perlas
Fibra de ADN
unida a protenas
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El ADN como portador de informacin gentica
Interfase
Qu molcula posee la
informacin gentica?
El ADN o las protenas?
Collar de
perlas
Fibra de ADN
unida a protenas
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Interfase
Las protenas en
su secuencia de
aminocidos?
Collar de
perlas
Fibra de ADN
unida a protenas
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Interfase
El ADN en su
secuencia de
nucletidos?
Collar de
perlas
Fibra de ADN
unida a protenas
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1. ADN COMO MATERIAL GENTICO
Primeras evidencias:
Las protenas. El ADN tiene
una estructura demasiado
sencilla. Las protenas son ms
complejas y tienen funciones
catalticas.
Quin es el
depositario de la 1928. Experimento de
informacin Griffith (buscando vacuna contra
la neumona provocada por
gentica? Streptococcus pneumoniae)
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1. ADN COMO MATERIAL GENTICO
Streptococcus
pneumoniae
(bacteria causante de la
neumona, presenta dos
variantes o cepas distintas)
Cepa S: (del ingls smooth, liso). Poseen

cpsula gelatinosa de polisacridos que
impide que el sistema inmunolgico del
ratn las ataque. Provocan la
enfermedad
Cepa R: (del ingls rough, rugoso). Sin

cpsula gelatinosa de polisacridos.
Forman colonias rugosas. No provocan la
enfermedad ya que el sistema inmune del
ratn las ataca rpidamente.
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Experiencias de F. Griffith
Bacterias S
Bacteria con cpsula muertas por
(virulenta) calor
Tipo S
1 De los ratones muertos se extraen bacterias 2 De los ratones inoculados no se extraen

vivas de la cepa S bacterias vivas
Bacterias R
Bacteria sin cpsula vivas Bacterias S
(no virulenta) muertas por
Tipo R calor
3 De los ratones inoculados no se extraen 4 De los ratones muertos se extraen bacterias

bacterias vivas, pues no crecen en el animal. vivas de la cepa S
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CONCLUSIN. En las bacterias muertas (cepa S) exista algo,

llamado PRINCIPIO TRANSFORMANTE que era captado por las
bacterias vivas no virulentas (cepa R) y transformaba sus
caracteres hereditarios convirtindose en virulentas.
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1. Se inoculan ratones con cepas S, contraen la enfermedad y mueren. De ellos se extraen

bacterias S vivas.
2. Los ratones inoculados con cepas R no contraen la enfermedad. De ellos se extraen bacterias
vivas pues no crecen en el animal
3. Se inoculan ratones con cepas S, muertas por el calor. No contraen la enfermedad. De ellos no
se extraen bacterias vivas.
4. Los ratones inoculados con cepas S, muertas por el calor y, simultneamente, cepas R vivas
contraen la enfermedad y mueren. De ellos se extraen bacterias vivas S.
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EXPERIMENTO DE AVERY (1944) (CULTIVO DE BACT. R EN

UN MEDIO CON DNA PURIFICADO PROCEDENTE DE
BACTERIAS S)
Cultivaron las bacterias en tubos de

ensayo (in vitro)
Fueron destruyendo, uno por uno,
todos los componentes bioqumicos
de las clulas S para evitar la
transformacin e identificar el
responsable.
Degradaron polisacridos de la
pared y al inyectarlas en el ratn la
transformacin se produca. A
continuacin degradaron protenas y
la transformacin se produca.
As sucesivamente hasta que atacar
al ADN de las bacterias. La
transformacin no se produca
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BACTERIAS S)
La molcula de ADN contiene la

informacin necesaria para
convertir las bacterias R no
virulentas en bacterias S
virulentas.
Demostraron adems, del papel
biolgico del ADN, que las
bacterias pueden intercambiar
material gentico
(transformacin)
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BACTERIAS S)
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En 1944 Avery y colaboradores demostraron que el principio

transformante era el ADN, que determinaba o no la produccin de
la cpsula bacteriana.
CONCLUSIN
El ADN era el material gentico

en bacterias.
En 1952 se demostr que era el

material gentico en el resto de
organismos
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2. El concepto molecular de gen

Gentica clsica
Un gen contiene informacin
para un determinado carcter
El concepto de gen ha ido

cambiando segn
aumentaban los
conocimientos sobre
gentica molecular.
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2. CONCEPTO MOLECULAR DE GEN
1941. Experimento de G. Beadle y E. Tatum con el hongo Neurospora

crassa
Slo precisa una fuente

de carbono, biotina y
ciertos minerales.
Sometieron al hongo a
ciertas dosis de rayos X.
Obtuvieron mutantes
incapaces de sintetizar
determinados
aminocidos, por lo que
solo sobrevivan al aadir
al medio los aminocidos.
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Experimento de G. Beadle y E. Tatum con el hongo Neurospora

crassa
Descubrieron:
A cada mutante le faltaba

el enzima especfico que
catalizaba algn paso de
la sntesis del aminocido
al que haban alterado.
Los mutantes se
diferenciaban de la cepa
salvaje en un solo gen.
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Experimento de G. Beadle y E. Tatum con el hongo Neurospora

crassa
Descubrieron:
Si se altera el gen, no se
fabrica la enzima
correspondiente y la ruta
se bloquea.
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1 gen 1 enzima
1 gen 1 protena
1 gen 1 cadena
polipeptdica
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Desde el punto de vista funcional:

Fragmento del ADN que lleva la informacin para
fabricar una cadena polipeptdica de una
protena, necesaria para que se exprese un
carcter en un individuo
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REPASEMOS ALGUNOS CONCEPTOS
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REPASEMOS ALGUNOS CONCEPTOS Unidad 14. Gentica molecular
El ciclo celular
Fase permanente en clulas
que no entran nunca en mitosis. Sntesis de protenas y
Estado de quiescencia. aumento del tamao celular.
Fase G1
Fase G0
Replicacin del ADN y
sntesis de histonas.
Citocinesis
Divisin del
Fase S
citoplasma
Interfase
Fase de
mitosis
Divisin celular
Transcripcin y traduccin de genes que

codifican protenas necesarias para la
Fase G2
divisin. Duplicacin de los centriolos
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3. REPLICACIN (DUPLICACIN) DEL ADN
Capacidad de hacer copias de si mismo.

Esto permite transmitir la informacin gentica a las
clulas hijas.
La replicacin permite a las

clulas hijas contener el mismo
ADN que la clula madre.
Las clulas duplican su ADN

antes de la divisin celular (en
eucariotas en la fase S de la
interfase).
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3. REPLICACIN DEL ADN Cmo se produce la duplicacin?

3 hiptesis
Hiptesis Hiptesis Hiptesis
semiconservativa conservativa dispersiva
Cadena antigua Cadena nueva
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TEORA CONSERVATIVA
Una doble hlice conserva las dos cadenas originales, y

la otra est formada por las dos cadenas de nueva
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sntesis.
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TEORA DISPERSIVA
ADN copia
Cada una de las dos cadenas hijas contiene fragmentos
de la cadena original y fragmentos de la nueva
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sntesis
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TEORA SEMICONSERVATIVA
Cada doble hlice conserva una hlice de las dos

originales y sintetiza una nueva (Watson y Crick)
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La duplicacin del ADN

Experimento de Meselson y Stahl (1958)
Medio N15 Medio N14
ADN N14
ADN N14-15
ADN N15
ADN inicial ADN despus ADN despus ADN despus

de la 1. de la 2. de la 3.
duplicacin duplicacin duplicacin
1- Cultivaron bacterias en un medio con N-15 (Las bases nitrogenadas incorporaron el istopo).
2- Transfirieron las bacterias a un medio con N-14. El ADN obtenido tenia la misma proporcin N14,
N15. Cada bacteria haba heredado la mitad de ADN de su progenitora y la otra mitad la sintetizaba
de los componentes del medio. C.E.M HIPATIA-FUHEM
3- Aparecan ADN hibrido (N14-N15) y ADN solo con N14 Miguel ngel Madrid
3. La duplicacin del ADN
Ncleo (eucariotas)
Nucleoide (procariotas)
Dnde ocurre? Matriz (mitocondrias)
Estroma (cloroplastos)
FASE S DEL
Cundo ocurre? CICLO CELULAR
(en interfase)
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Principales caractersticas de la
replicacin
Es semiconservativa. Cada molcula de ADN est formada por una

cadena de ADN original y otra recin formada.
Se produce por adicin de mononucletidos en sentido 5 3`
Es bidireccional. Se forman dos horquillas de replicacin que
avanzan en sentidos opuestos.
En virus y bacterias hay un nico punto de inicio, mientras que en
eucariotas hay varios.
Es semidiscontinua. En una cadena (llamada conductora) se
sintetizan fragmentos bastante grandes de forma continua, mientras
que en la otra (llamada retardada) la sntesis es discontinua, es decir,
se sintetizan pequeos fragmentos de forma separada y despus se
unen (los llamados fragmentos de Okazaki). Ello se debe a que las
dos cadenas son antiparalelas y a que la sntesis es siempre en
sentido 5 3
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Qu necesitamos?
- ADN molde
- Nucletidos: ATP, GTP, CTP, TTP
- Protenas SSB (impiden que se enrede el ADN)
- Enzimas:
- Helicasas: rompen puentes de H entre las dos cadenas complementarias,
separndolas.
- Topoisomeras (girasas). Desenrollan ADN, evitan tensiones
- ADN ligasas (unen fragmentos ADN mediante enlaces fosfodister). As sellan el
hueco entre dos fragmentos de Okazaki.
- ARN polimerasas (tambin llamadas primasas). Sintetizan fragmentos de ARN
(llamados ARN cebador) usando como molde ADN y acta como iniciador de la
sntesis de ADN.
- Nucleasas. Rompen enlaces fosfodister entre nucletidos, escinden ARN cebador y
reparan lesiones en el ADN.
- ADN polimerasas. Catalizan la formacin de enlaces fosfodister entre nucletidos.
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Sintetiza el ARN
ARN POLIMERASA
cebador usando
(primasa)
como molde el ADN
ARN polimerasa
5`
ARN cebador 3`
ADN
(40-50 nucletidos)
3`
5`
ADN molde
ADN polimerasa
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Funcin polimerasa
3. La duplicacin del ADN Precisa ARN cebador (primer o iniciador) y la
cadena molde de ADN
Recoore la hebra de ADN, es decir lee en sentido
3 5, y por tanto la hebra nueva crece en
sentido 5-> 3
ADN POLIMERASA
Funcin exonucleasa
Detecta errores, elimina nucletidos cuyas bases
estn mal emparentadas y fragmentos de
ARN cebador
ARN polimerasa
ARN cebador ADN

(40-50 nucletidos) 5` 3`
3`
5`
ADN molde
ADN polimerasa
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En procariotas distinguimos:
ADN POLIMERASA I
(Retira fragmentos ARN cebador: exonucleasa
Sintetiza ADN en los huecos: polimerasa
Es correctora, ya que repara errores de la sntesis de
ADN)
ADN POLIMERASA II
(Interviene en procesos de reparacin del ADN
Tiene actividad polimerasa en sentido 5` 3y
exonucleasa en 3 5)
ADN POLIMERASA III

(Sintetiza ADN en sentido 5 3: polimerasa)
RECUERDA
La ADN polimerasa:
Precisa ARN cebador
Lee en sentido 3 5
Sintetiza en sentido 5 3
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RECUERDA
La actividad polimerasa
consiste en catalizar la
unin de nucletidos a la
cadena de cido nucleico
que se est sintetizando.
La actividad exonucleasa
consiste en escindir
nucletidos de los extremos
de los cidos nucleicos.
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Fases de la replicacin: elongacin

Junto a las enzimas que participan en la iniciacin, en esta fase actan las ADN polimerasas.
EXONUCLEASA POLIMERIZACIN
POLIMERASA INICIACIN
direccin funcin direccin funcin
elimina
5 3
I cebador
5 3 sntesis no
3 5 reparacin
II 3 5 reparacin 5 3 sntesis no
III 3 5 reparacin 5 3 sntesis no
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3. La duplicacin del ADN: Mecanismo de la duplicacin en procariotas
Fase de iniciacin
Fase de elongacin
Fase de terminacin
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Fases de la replicacin: iniciacin

Consiste en el desenrollamiento y apertura de la doble hlice de ADN
Origen de replicacin Ori C (abundan secuencias

ricas en GATC)
La replicacin empieza en un
punto del ADN donde abundan
las secuencias de bases
GATC (Ori C)
En l se separan las dos
cadenas de ADN por accin de
las enzimas.
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Consiste en el desenrollamiento y apertura de la doble hlice de ADN
Ori C (abundan secuencias
ricas en GATC) Evitan las tensiones debidas a un superenrrollamiento
Girasa
Topoisomerasa
Protenas
especficas
Protenas SSB
Impiden que el ADN

se vuelva a enrollar
Helicasa
Las protenas
especficas se
unen al punto La helicasa rompe los
de iniciacin enlaces de hidrgeno
entre las bases y abre la
doble hliceC.E.M HIPATIA-FUHEM
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Resultado: se forma una burbuja de replicacin en la que hay

dos zonas en forma de Y, llamadas horquillas de replicacin,
donde se sintetizan las nuevas cadenas de ADN
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1. La primasa (ARN polimerasa)

sintetiza un fragmento de ARN
3 cebador, de unos 10 nucletidos que
es complementario del fragmento 2. La ADN polimerasa III
correspondiente de ADN
5 reconoce los nucletidos
de la cadena molde y los
empareja segn
Cadena complementariedad de
continua bases (A-T y G-C)
conductora
3
FRAGMENTO DE OKAZAKI ( 5
procariotas: 1000 2000
nucletidos, en eucariotas Cadena
de 150 a 200 nucletidos) retardada
5
3
3
La primasa (ARN polimerasa)

sintetiza un ARN cebador o
primer
La ADN
5 polimerasa III
La ADN poli I va eliminando el sintetiza un corto
cebador y rellenando los fragmento de ADN
nucletidos de ADN. Finalmente
la ADN ligasa suelda todos los
fragmentos obtenidos C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
RECUERDA
La ADN polimerasa III:
Precisa ARN cebador
Lee en sentido 3 5
Burbuja de
replicacin
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
El mecanismo de elongacin o formacin de las

nuevas cadenas de ADN
La ADN polimerasa recorre las hebras molde en el sentido 3-5 uniendo
los nuevos nucletidos en el extremo 3.
5
Una de las hebras se
5 sintetiza de modo contnuo
3 por la ADN polimerasa III.
Fragmentos de Es la conductora o lider.
5 Okazaki
3 3
3
5 3
La ADN polimerasa III necesita
un fragmento de ARN (cebador
o primer) con el extremo 3 libre
para iniciar la sntesis.
5
RECUERDA La otra hebra se sintetiza de modo

discontinuo formndose fragmentos que
La ADN polimerasa:
se unirn ms tarde. Es la retardada.
Precisa ARN cebador
Lee en sentido 3 5
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Miguel ngel Madrid
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Tema 6: Estructura
45 y
Miguel ngel Madrid
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
El mecanismo de elongacin (II)

1 La primasa (ARN polim) sintetiza un cebador en 2 Las ADN polimerasa III comienzan la sntesis
cada hebra de la burbuja de replicacin. de la hebra conductora por el extremo 3 de
cada cebador.
Cebador
Primasas
Cebador
3 La primasa sintetiza un nuevo cebador sobre 4 La ADN polimerasa III comienza a sintetizar un
cada hebra retardada. fragmento de ADN a partir del nuevo cebador.
Hebra retardada
Hebra retardada
5 Cuando la ADN polimerasa III llega al cebador 6 La ligasa une los fragmentos de ADN.
de ARN, lo elimina y lo reemplaza por ADN.
Nuevo cebador
Ligasas
Nuevo cebador
C.E.M HIPATIA-FUHEM
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Sntesis de nuevas cadenas de ADN

Horquillas observadas
5 3
3 5
Ninguna polimerasa aade

Punto de inicio nucletidos en estos puntos
5 3
3 5 3
5
3 5
Origen de
Crecimiento Crecimiento
replicacin
continuo discontinuo
5 3
5
3
Fragmentos
de Okazaki
C.E.M HIPATIA-FUHEM
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Fases de terminacin
Tiene lugar cuando las dos horquillas de replicacin del cromosoma circular de E. coli
se encuentran, y se han formado dos cromosomas completos que permanecen ligados
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Burbuja de
replicacin
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CORRECCIN DE ERRORES DE LA ADN

POLIMERASA
Durante la replicacin, es frecuente que se produzcan
errores y se incorporen nucletidos incorrectos.
Gracias a la accin exonucleasa, la ADN polimerasa
elimina nucletidos mal apareados y adiciona los
correctos.
Nmero de errores 1 por cada 100 000 bases
Aunque el mecanismo de
correccin de errores es
muy eficiente, a veces
queda alguno sin corregir.
Esos errores suelen ser
importantes en la evolucin
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Miguel ngel Madrid
Replicacin en los eucariontes

Es muy parecida a la de los procariontes, salvo en algunas diferencias:
Los fragmentos de Okazaki en eucariotas son ms cortos, entre 150-200 nucletidos (en
procariotas de 1000 2000 nucletidos)
La replicacin se inicia simultneamente en carios puntos del cromosoma llamados replicones.
Existen cinco tipos de ADN polimerasas (, , , , y ).

Las histonas se duplican durante la replicacin. Junto al ADN formarn el nucleosoma. Los
nuevos nucleosomas se incorporan a la hebra retardada y los viejos en la conductora.
Telmero
Cuando se elimina el ltimo 3
cebador, la ADN polimerasa 5 3 5
no podr rellenar el hueco, 5
5
al no poder sintetizar en Cebador ltimo cebador
direccin 3 - 5.
Debido a esto el extremo del 3
5
cromosoma (telmero) se va
acortando cada vez que la
clula se divide. Esto se 5
La ADN polimerasa polimeriza Eliminacin
asocia al envejecimiento y
desde el extremo 3 libre de cebadores
muerte celular.
3
Hebra ms corta
5
C.E.M HIPATIA-FUHEM 5
Miguel ngel Madrid
El mecanismo de duplicacin del ADN en eucariotas

Hebra conductora Origen de la replicacin Origen de la replicacin
Hebra
Horquilla
retardada
de replicacin
Hebra
retardada
Burbujas de replicacin
Nucleosomas
Hebra
conductora
Nuevos nucleosomas
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Miguel ngel Madrid
LA TELOMERASA
En las clulas que se dividen continuamente
(clulas madre de los gametos, clulas
embrionarias y clulas cancerosas) hay
una enzima, denominada telomerasa, que
impide el acortamiento de los telmeros.
Se forma por una porcin proteica y ARN que
acta como molde.
A partir de este molde, la enzima sintetiza
ADN para completar la hebra retardada.
Recuerda: los telmeros son los extremos de los cromosomas

La telomerasa podra detener el envejecimiento, pero guarda
una estrecha relacin con el cncer. Los investigadores
trabajan con ratones para alargar la vida sin aumentar el riesgo
de cncer.
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
Mara Blasco. Centro de

Investigaciones oncolgicas
La telomerasa podra detener el

envejecimiento, pero guarda una estrecha
relacin con el cncer. Los investigadores
trabajan con ratones para alargar la vida sin
aumentar el riesgo de cncer.
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
4. La expresin del mensaje gentico
En 1970 Francis Crick enunci el Dogma Central de la Biologa Molecular.
ARNt
ADN ARNm PROTENA

Transcripcin Traduccin
Replicacin NCLEO RIBOSOMAS
Este esquema fue considerado durante muchos aos el dogma central de la biologa molecular.,
pero los cirus son una excepcin a este dogma
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
REDEFINICIN DEL DOGMA CENTRAL DE

LA BIOLOGA MOLECULAR
Algunos virus poseen ARN replicasa, capaz de obtener copias de su ARN. Otros poseen
transcriptasa inversa que sintetiza ADN a partir de ARN mediante un proceso de retrotranscripcin.
Transcriptasa
inversa ADNc
ADNc
(complementario)
bicatenario
ARN
vrico
Transcriptasa
Envoltura inversa
RETROVIRUS
Transcriptasa Transcriptasa
inversa inversa
ADNc
Membrana plasmtica Degradacin monocatenario
de la clula husped del ARN
DOGMA CENTRAL DE LA BIOLOGA MOLECULAR
Transcripcin
ADN ARN PROTENAS
inversa
Replicacin Replicacin
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
4. La expresin del mensaje gentico
Las secuencias de ADN que pueden moverse

a diferentes partes del genoma de una clula
se conocen como transposones o genes
saltarines. Fueron descubiertos por Brbara
McClintock, por lo que recibi el premio
Nobel en 1983.
ADN ARNm Protena
Transcripcin
inversa
Duplicacin
Duplicacin
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Miguel ngel Madrid
DOGMA
DOGMACENTRAL
CENTRALDE
DELA
LABIOLOGA
BIOLOGAMOLECULAR
MOLECULAR Biologa. 2 bachillerato
3 5
Hebra
Hebramolde
molde
Transcripcin
Transcripcin
5 3
Traduccin
Traduccin
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
TRIPLETE
Qu es un triplete y un codon?
ADN
AATTCGAGCTAGCAGCCACTTACGAGTACGTAC
ARN
ACUUUCCCGACGCAAAACGUUUUUCGAACUU
CODON
Triplete: Cada una de las secuencias posibles de tres
nucletidos en el ADN.
Codon: Secuencia de tres nucletidos en el ARN
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
Sntesis de ARN: requisitos previos

La sntesis de ARN o transcripcin necesita:
CADENA DE ADN QUE ACTE COMO MOLDE ARN polimerasa I ARNr
ARN -POLIMERARAS En eucariotas ARN polimerasa II ARNm
ARN polimerasa III ARNt y ARNr

RIBONUCLETIDOS TRIFOSFATO DE A, G, C y U
Bases
Ribosa
Ribonucletido
trifosfato
Dnde ocurre?. NCLEO C.E.M HIPATIA-FUHEM

Miguel ngel Madrid
5. La transcricpcin. Sntesis de ARN
RECUERDA
LA ARN polimerasa RECORRE LA

CADENA DE ADN EN SENTIDO
3` 5Y AADE LOS NUCLETIDOS
COMPLEMENTARIOS A LOS DE LA
CADENA DE ADN QUE SE
TRANSCRIBE
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
5. La transcricpcin. Sntesis de ARN
Fase de iniciacin
Fase de elongacin
Fase de terminacin
Fase de maduracin
C.E.M HIPATIA-FUHEM
Miguel ngel Madrid
El proceso de la transcripcin
1 INICIACIN
La ARN-polimerasa reconoce los centros promotores (ricos en
A y T). Cola poli-A
Luego abre la doble hlice para que los ribonucletidos se unan

a la cadena molde. Poli-A
TERMINACIN 3 polimerasa
La ARN-polimerasa reconoce en el ADN unas seales

de terminacin que indican el final de la transcripcin.
En procariontes son secuencias palindrmicas.
Punto de
En eucariontes
corte
2 ELONGACIN
La ARN-polimerasa avanza en sentido 3-5 y sintetiza
el ARN en sentido 5-3. . Seal de
Cadena molde de ADN (transcrita) corte
ARN
ARN - polimerasa
NO OLVIDES
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Cadena inactiva de ADN La ARN polimerasa lee en direccin
Miguel ngel Madrid 3` 5
5. Transcripcin: maduracin en procariotas

Promotor ARN-polimerasa
5 3
3 5 No existe maduracin del
ARNm, se unen a los
ribosomas y se traducen
Iniciacin
5 3
3 5
Los ARNr y ARNt (transcritos
ARN primarios) precisan de un
Elongacin proceso de maduracin
5 3
3
para ser funciones
5
Finalizacin Los ARN que se forman son

5 3
3 5 policistrnicos (contienen
informacin para la
sntesis de varios
ARN transcrito completo polipptidos)
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Miguel ngel Madrid
Transcripcin: maduracin en procariotas

Promotor ARN-polimerasa
5 3
3 5
Iniciacin
5 3
3 5
ARN
Elongacin
5 3
3 5
Finalizacin
5 3
3 5
ARN transcrito completo
C.E.M HIPATIA-FUHEM
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Los ARN que se forman son

Transcripcin: maduracin en eucariotas
monocistrnicos
Promotor Unidad de transcripcin
5 3
Iniciacin
3 5
ARN
ARN-polimerasa
1. Tras la unin de
los 30 primeros
ribonucletidos 5 3
se aade una 3 5
caperuza de
metilguanosina
en 5 m7-Gppp
Elongacin Capucha 5'
5 3
3 5
m7-Gppp CONTINUAR
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Transcripcin en eucariotas
5 3
Finalizacin
3 5
2. Despus de
PoliA-polimerasa
la separacin
del ARN, una
m7-Gppp enzima la poliA-
polimerasa
Capucha 5' aade una
OH
secuencia de
unos 200
nucletidos de
adenina (cola
de poli A)
ARN heterogneo
nuclear
Cola de poli-A
m7-Gppp OH
Capucha 5'
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Transcripcin en eucariotas. Proceso de maduracin

Maduracin 5 3
Exn 1 Intrn Exn 2
Protena
RNPpn
Espliceosoma.
5 3
3. Eliminacin Mecanismo de
de intrones splicing
(segmentos de
ARN que no se
traducen)
Intrn
Exn 1 Exn 2 El ARNm ya est en

condiciones de salir del ncleo
ARNm 5 3
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LO SABAS?
La toxicidad de la Amanita phalloides (provoca diarreas,
vmitos, dolores abdominales e incluso la muerte) se
debe a una sustancia, 1 alfa amanitina, que no se destruye
con la coccin y se comporta como un inhibidor de la ARN
polimerasa II en eucariotas, lo que bloquea la sntesis de
ARNm
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COMPARACIN TRANSCRIPCIN
PROCARIOTAS EUCARIOTAS
Localizacin Nucleoide (citoplasma) Ncleo
Genes Continuos Fragmentos (intrones y
exones)
ADN Bajo grado de Muy empaquetado
empaquetamiento
ARN polimerasa 1 ARN polimerasa que ARN poli I: ARNr
sintetiza ARNm, ARNr, ARN poli II: ARNm
ARNt ARN poli III: ARNt
Tipos de genes Policistrnicos Monocistrnicos
Maduracin ARNr y ARNt ARNm
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6. El cdigo gentico
Cmo se pasaba de un
lenguaje de cuatro
letras a otro lenguaje
formado por 20
elementos distintos?
Se necesitaba un Ese diccionario es el

diccionario cdigo gentico
ARN polmero lineal de 4 nucletidos diferentes.

Protenas: polmeros de 20 aminocidos
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El cdigo gentico
Si solo fuese 1 base

41 = 4 aa
INSUFICIENTE
Si solo fuesen 2 bases

42 = 16 aa 3 bases
INSUFICIENTE 43 = 64 aa
SUFICIENTE
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El cdigo gentico
3 bases
43 = 64 aa
SUFICIENTE, pero sobran
palabras, lo que significa
que varios tripletes son
sinnimos, porque
codifican (significan) el
mismo aminocido
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EL CDIGO GENTICO
AUG
Iniciacin Ej. Qu aminocido est codificado

por el codn GAC?
UAG UAA UGA Terminacin C.E.M HIPATIA-FUHEM
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El cdigo gentico
El cdigo gentico
establece una
relacin de
correspondencia
entre las bases
nitrogenadas del ARN
y los aminocidos
que codifica
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Caractersticas del cdigo gentico

UNIVERSAL DEGENERADO
Existen ms codones (64) que aminocidos (20).

El mismo para todos los organismos, incluso
A excepcin de la metionina y el triptfano, un
los virus.
aminocido est codificado por ms de un codn.
El cdigo ha tenido un solo origen evolutivo.
Esto es una ventaja ante las mutaciones.
Existen excepciones en las mitocondrias y
algunos protozoos. CARECE DE SOLAPAMIENTO
SIN IMPERFECCIN Los tripletes se disponen de manera lineal

y continua, sin espacios entre ellos y sin
Cada codn solo codifica a un aminocido. compartir bases nitrogenadas
Posibilidad de solapamiento
Met Gli Tre His Ala Fen Ala
Met Leu Leu Pro

Codones de iniciacin C.E.M HIPATIA-FUHEM
Solapamiento
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7. La traduccin. Biosntesis de protenas
Si te has fijado, el proceso de transcripcin es un

proceso de copia donde no se cambia de idioma,
pues se pasa del idioma del ADN a ARN
Sin embargo, en la traduccin, que no es un

proceso de copia, si se cambia de idioma, se pasa
del idioma de los cidos nucleicos (A,G,C,U) al de
las protenas (20 aminocidos)
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EL PROCESO DE TRADUCCIN
ocurre
RIBOSOMAS LA SNTESIS DE PROTENAS
necesita
ENZIMAS Y ARN DE
RIBOSOMAS AMINOCIDOS ARN MENSAJERO ENERGA TRANSFERENCIA
Formados por Donde se unen los Como la

Tiene
SUBUNIDAD dos
Donde se une el
AMINOACIL-ARNt zonas
GRANDE
-SINTETASA
Por donde
SUBUNIDAD se une al
PEQUEA
ANTICODN
Donde se
EXTREMO 3
Donde se sita el
SITIO A AMINOCIDO une el

Tienen
tres SITIO P POLIPPTIDO
lugares
SITIO E ARNt C.E.M HIPATIA-FUHEM
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La traduccin. Biosntesis de protenas
Veamos primero cmo es un ribosoma Cadena

polipeptdica
en formacin
Aminocido
ARNt
Aminoacil-ARNt
Subunidad mayor
Anticodn
3
5
ARNm
Subunidad menor
ZONA E: liberacin: de donde salen los ARNt libres

ZONA P: peptidil: donde se va formando la cadena polipeptdica
ZONA A: aminoacil, donde entran los aminocidos
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Otra imagen por si no te queda claro
ZONA E: liberacin: de donde salen los ARNt libres

ZONA P: peptidil: donde se va formando la cadena polipeptdica
ZONA A: aminoacil, donde entran los aminocidos
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Recordemos como era un ARNt
(Unin a la (Unin al
peptidil- ribosoma)
transferasa en
el ribosoma
NOTA.- EXISTEN TANTOS RNAt como aminocidos,

uno para cada uno, en total 20 clases de RNAt (Unin al codon complementario
del RNAm en el ribosoma)
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Una imagen ms simple del ARNt por si no te quedaba claro

COOH
H C NH2 Aminocido
(serina)
CH2
OH Aqu en el extremo 3`es donde se une

el aminocido al ARNt
Extremo 3`
ARNt
Anticodn
UC G
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Paso previo:
ESTA FASE PREVIA
Activacin de los aminocidos
TIENE LUGAR EN EL
CITOPLASMA Y NO EN
LOS RIBOSOMAS ARNt
Aminoacil-ARNt
Aminoacil-ARNt-sintetasa
Cada aminocido se une a una molcula de ARNt

especifica gracias a la enzima aminoacil-ARNt-
sintetasa CONTINUAR
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La traduccin. Sntesis de protenas
Fase de iniciacin
Fase de elongacin
Fase de terminacin
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Iniciacin de la sntesis
3
U
5
A C Metionina
5 A
U 3
G
ARNt iniciador
E
A
GDP
GTP
3 3
5 5
Subunidad
menor
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Elongacin de la cadena polipeptdica
Aminocido
El aminocido se Se libera el ARNt que ha
Enlace traslada al otro ARNt cedido el aminocido
Anticodn peptdico
ARNt
P A P P
A
E A
E
E
GDP GDP
GTP GTP 3
3 3 3
5 5
5 5
Complementariedad El ribosoma se
entre codn trasloca un codon
y anticodn
CONTINUAR
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Finalizacin de la sntesis
Polipptido
libre
ltimo ARNt
P
A
E
3
3
5
5
Factor de
El codn de finalizacin liberacin
puede ser UAA, UAG o UGA
Separacin del ARNm y las

El triplete de terminacin no es reconocido por ningn
subunidades ribosmicas
ARNt, y s por unos factores de liberacin de naturaleza
proteica que se sitan en el sito A, y hacen que la peptidil
transferasa separe la cadena polipetdica del ARNt
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Polirribosomas en eucariotas
Si el ARN a traducir es lo suficientemente largo puede ser ledo por ms de un
ribosoma a la vez, formando un polirribosoma o polisoma. La sntesis ocurre a razn
de unos (15 aminocidos unidos por segundo. Una protena media (300 aa) se
sintetizara en unos 15 segundos. Despus, el RNAm es destrudo ARNm
Protena en
formacin
Microfotografa electrnica (MET, Ribosoma

falso color) de un polirribosoma.
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LO SABAS?
Determinados antibiticos se utilizan como dardos para
destruir bacterias, al actuar sobre dianas moleculares
relacionadas con la traduccin y bloquear algunas etapas
de la sntesis e protenas
Estreptomicina: trisacrido que se une a la subunidad 30

S del ribosoma procariota e interfiere en la iniciacin de la
sntesis.
Eritromicina: bloque la traslocacin del ribosoma e inhibe
la elongacin.
Tetraciclina: Se une a la subunidad 30 s del ribosoma y
bloquea el sitio A, impidiendo la entrada del ARNt
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1. Estructura del genoma en procariotas y eucariotas

GENOMA
Conjunto de genes de un organismo
NO TODO EL ADN CONTENIDO EN LOS CROMOSOMAS CODIFICA PARA
PROTENAS, EXISTE GRAN CANTIDAD DE GENES REGULADORES
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1. Estructura del genoma en procariotas y

ORGANIZACIN DEL GENOMA EN PROCARIOTAS
1 Cromosoma circular (ADNdc)

Presencia de plsmidos (nmero variable
segn tipo de bacteria). Contienen genes no
esenciales para el crecimiento y la
reproduccin de la clula. Replicacin
independiente
1 200 12 000 genes
Genes continuos (toda la informacin
contenida en los genes se traduce en
protenas)
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ORGANIZACIN DEL GENOMA EN VIRUS
1 Sola molcula lineal o circular de ADN o

ARN
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ORGANIZACIN DEL GENOMA EN EUCARIOTAS
La mayor parte localizado en el ncleo.

(repartido en los diferentes cromosomas
lineales)
Una pequea parte en mitocondrias y
cloroplastos (vegetales): ADNdc (similar
procariotas)
Humanos: genoma nuclear:

25 000 genes que codifican protenas
(exones) y los diversos tipos ARN (1,5 %
del total); Genoma mitocondrial: 37
genes
ADN no codificante (98,5 %)
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ADN NO CODIFICANTE ADN basura *
ADN repetitivo o satlite: situados en los

extremos de los cromosomas y centrmeros.
No se transcriben nunca (no codifican
protenas)
ADN regulador (promotores: Mucho de l

hasta la fecha de funcin desconocida
Intrones: situados en los extremos de los

cromosomas y centrmeros. No se
transcriben nunca
(*) Se le llam ADN basura pues se pensaba que no tena funcin

alguna; estudios recientes creen que regula la expresin diferencial
de los genes.
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Lo sabas En septiembre de 2008, investigadores americanos

afirmaron haber descubierto una secuencia de ADN basura,
responsable de que los humanos hayan desarrollado la capacidad
de agarrar o manipular objetos o herramientas.
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8. Genoma en organismos eucariontes

No existe relacin directa entre la complejidad del organismo y la cantidad de ADN.
La mayor parte del ADN no codifica protenas: ADN no codificante
Una parte del genoma se encuentra en los ADN repetitivo satlite

cloroplastos y las mitocondrias.
ADN repetitivo intermedio
ADN de intrones
ESTRUCTURA DE UN GEN EN EUCARIONTES
Gen
Gen
regulador
Intrones
Operador Exones: secuencias
codificantes
Promotor
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EL PROYECTO GENOMA HUMANO

1955. Joe Hin: establece en 46 el nmero de cromosomas humanos.
1977. Se inicia secuenciacin del ADN
1981. Se completa la secuenciacin del genoma mitocondrial

humano
1995. Se completa la secuenciacin del genoma de la bacteria

Haemophilus influenzae.
1996. Secuenciacin del genoma del primer eucariota:

Saccharomyces cerevisiae
2000. Se completa la secuenciacin del genoma del primer

organismo pluricelular, el gusano Caenorhabditis elegans.
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2000. Secuenciacin del genoma de Drosophila melanogaster
2000. Secuenciacin del genoma de la planta Arabidopsis thaliana
2001. Publicacin del borrador de la secuencia completa del

genoma humano
2003. (Coincidiendo con el 50 aniversario del descubrimiento de la

estructura del ADN) Se completa la secuenciacin del genoma
humano.
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GENMICA: Estudia el genoma de los diferentes organismos
1988: Congreso de los EEUU. Autorizacin de financiacin. Creacin

del consorcio pblico, dirigido por J.D. Watson. Colaboracin con
Reino Unido, Francia, Alemania, China y Japn. Nacimiento del PGH.
1996. Craig Venter solicit la patente de uno de los genes

secuenciados. Abandono del Consorcio pblico. Creacin de Celera
Genomics (privado)
26 junio 2000. El Consorcio Pblico y Celera Genomics dieron a

conocer los borradores del PGH
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El 26 de junio de 2000 dos prestigiosas revistas cientficas dieron a

conocer las dos versiones del borrador del PGH
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OBJETIVOS DEL PROYECTO GENOMA

HUMANO
1. Conocer en qu orden estn colocados los
genes
2. Determinar la distancia que existe entre

los genes (elaboracin de mapas gnicos)
3. Secuenciar cada gen. (averiguar secuencia

de nucletidos de cada gen)
4. Determinar la funcin de cada gen
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Aplicaciones del PGH

1. Permite conocer nuestros orgenes al
comparar nuestro genoma con el de otras
especies.
2. Permite el desarrollo de la medicina

gentica y personalizada (hoy sabemos ya
que diferencias en un solo nucletido en un
gen estn asociadas a la enfermedad de
Alzheimer)
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Conclusiones del PGH

1. El nmero de genes es relativamente bajo
(menos de 25 000) comparado con el de
otros genomas. Tenemos unos 3 200
millones de nucletidos
2. Cada gen puede codificar para unas 5

protenas diferentes, gracias al
procesamiento alternativo del ARNm
3. Slo el 1,5 % del ADN constituye genes

que codifican protenas. El resto es ADN
basura cuya funcin se desconoce.
4. Nos diferenciamos del chimpanc en un 1

% del genoma.
5. Con el anlisis del genoma es imposible

distinguir una etnia de otra.
6. Los seres humanos nos diferenciamos

entre s aproximadamente en un nucletido
de cada mil. Somos idnticos en un 99,9 %
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3,5 mil millones de pares de bases, unas 25

enciclopedias de tipo medio de 20 tomos cada
una y con las letras:
........................................TTAGCCTATATATCCTAGGCGCATTAGCTAGCTAGCCTTACCTTAACCTAAACCTAGGCCTAG
CCTACGGCTGCTAGCTGACTGAAGGCTTGAGCTATATTAGCCTATATATCCTAGGCGCATTAGCTAGCTAGCC
TTACCTTAACCTAAACCTAGGCCTAGCCTACGGCTGCTAGCTGACTGAAGGCTTGAGGCCAGCTATATTAGT
TAGTAGCCTTACCTTACCTACGGCTGCTAGCTGACTGAAGGCTTGGCCAGCTATATTAGCCTATATATCCTAG
GCGCATTAGCTAGCTAGCCTTACCTTAACCTAAACCTAGGCCTAGCCTACGGCTGCTAGCTGACTGCTAGCT
GACTGAAGGCTTGAGGCCAGCTATATTAGCCTATATATCCTAGGCGCATTAGCTAGCTAGCCTTACCTTAACC
TAAACCTAGGCCTAGCCTACGGCTGCTAGCTGACTGAAGGCTTGGCCAGCTATATTAGCCTATATATCCTAGG
CGCATTAGCTAGCTAGCCTTACCTTAACCTAAACCTAGGCCTAGCCTACGGCTGCTAGCTGACTCTAGCCTTA
CCTTAACCTATAGCTGACTGAAGGCTTGAGGCCAGCTATATTAGCCTATATATCCTAGGCGCATTAGCTAGCT
AGCCTTACCTTAACCTAAACCTAGGCCTAGCCTACGGCTGCTAGCTGACTGAAGGCTAGCTGACTGAAGGC
TTGAGGCCAGCTATATTAGCCTATATATCCTAGGCGCATTAGCTAGCTAGCCTTACCTTAACCTAAACCTAGGC
CTAGCCTACGGCTGCTAGCTGACTGTCCTAGGCGCATTAGCTAGCTAGCCTTACCTTAACCTAAACCTAGGC
CTAGCCTACGGCTGCTAGCTGTCCTAGGCGCATTAGCTAGCTAGCCTTACCTTAACCTAAACCTAGGCCTAG
CCTACGGCTGCTAGCTGTCCTAGGCGCATTAGCTAGCTAGCCTTACCTTAACCTAAACCTAGGCCTAGCCTA
CGGCTGCTAGCTGAAGGC........................................................
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PROTEMICA: disciplina que realiza un estudio

sistemtico del conjunto de protenas codificadas por el
genoma de un individuo. La protemica utiliza las
siguientes tcnicas:
extraccin de protenas del tejido del individuo.
Separacin e identificacin.
Anlisis e identificacin con bancos de datos
Las protenas presentes en la especie

humana supera el nmero de genes, y son
estas ( y no los genes) las que desempean
las actividades de la clula.
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Biologa.

1. El ADN como portador de informacin gentica

El ADN como portador de informacin gentica

El ADN como portador de informacin gentica

El ADN como portador de informacin gentica

1. ADN COMO MATERIAL GENTICO

1. ADN COMO MATERIAL GENTICO

Cepa S: (del ingls smooth, liso). Poseen

Cepa R: (del ingls rough, rugoso). Sin

1 De los ratones muertos se extraen bacterias 2 De los ratones inoculados no se extraen

3 De los ratones inoculados no se extraen 4 De los ratones muertos se extraen bacterias

CONCLUSIN. En las bacterias muertas (cepa S) exista algo,

1. Se inoculan ratones con cepas S, contraen la enfermedad y mueren. De ellos se extraen

EXPERIMENTO DE AVERY (1944) (CULTIVO DE BACT. R EN

Cultivaron las bacterias en tubos de

EXPERIMENTO DE AVERY (1944) (CULTIVO DE BACT. R EN

La molcula de ADN contiene la

EXPERIMENTO DE AVERY (1944) (CULTIVO DE BACT. R EN

En 1944 Avery y colaboradores demostraron que el principio

El ADN era el material gentico

En 1952 se demostr que era el

2. El concepto molecular de gen

El concepto de gen ha ido

2. CONCEPTO MOLECULAR DE GEN

1941. Experimento de G. Beadle y E. Tatum con el hongo Neurospora

Slo precisa una fuente

2. CONCEPTO MOLECULAR DE GEN

Experimento de G. Beadle y E. Tatum con el hongo Neurospora

A cada mutante le faltaba

2. CONCEPTO MOLECULAR DE GEN

Experimento de G. Beadle y E. Tatum con el hongo Neurospora

2. CONCEPTO MOLECULAR DE GEN

2. CONCEPTO MOLECULAR DE GEN

Desde el punto de vista funcional:

REPASEMOS ALGUNOS CONCEPTOS

Transcripcin y traduccin de genes que

3. REPLICACIN (DUPLICACIN) DEL ADN

Capacidad de hacer copias de si mismo.

La replicacin permite a las

Las clulas duplican su ADN

3. REPLICACIN DEL ADN Cmo se produce la duplicacin?

Cadena antigua Cadena nueva

Una doble hlice conserva las dos cadenas originales, y

Cada doble hlice conserva una hlice de las dos

La duplicacin del ADN

Medio N15 Medio N14

ADN inicial ADN despus ADN despus ADN despus

3. La duplicacin del ADN

3. La duplicacin del ADN

Es semiconservativa. Cada molcula de ADN est formada por una

3. La duplicacin del ADN

3. La duplicacin del ADN

ARN cebador ADN

ADN POLIMERASA III

Fases de la replicacin: elongacin

III 3 5 reparacin 5 3 sntesis no

3. La duplicacin del ADN: Mecanismo de la duplicacin en procariotas

Fases de la replicacin: iniciacin

Origen de replicacin Ori C (abundan secuencias

Fases de la replicacin: iniciacin

Impiden que el ADN

Fases de la replicacin: iniciacin

Resultado: se forma una burbuja de replicacin en la que hay

1. La primasa (ARN polimerasa)