PRCTICA N 5: DETERMINACIN DE

GLUCOSA
CURSO: BIOQUMICA GENERAL
ESCUELA PROFESIONAL DE TECNOLOGA MDICA
 GLUCEMIA

GLUCEMIA BASAL O EN AYUNAS: Cantidad de

glucosa que esta presente en la sangre por la
maana en ayunas, despus del descanso
nocturno. (ayuno de 10-16 horas)
GLUCEMIA POSTPRANDIAL: Cantidad de glucosa
que est presente en la sangre despus de haber
ingerido alimento
 Muestras para la determinacin de glucosa
Suero
Plasma
Lquido cefalorraquideo
Orina (glucosuria)
MTODOS PARA LA DETERMINACIN DE GLUCOSA
a) Metodos basados en el poder reductor
de los hidratos de carbono (reaccion de
Benedict, metodo de la o-toluidina)

b) Metodos enzimaticos: son los mas

utilizados, utilizan enzimas como reactivos
(ej. glucosa oxidasa, hexoquinasa) a fin de
aumentar la especificidad.
MTODOS PARA LA DETERMINACIN DE GLUCOSA
b) Metodos enzimaticos:

En la primera reaccion (especifica), catalizada por la enzima hexoquinasa, se

fosforila la glucosa formandose glucosa 6-fosfato.
La glucosa 6-fosfato, en una reaccion posterior (reaccion indicadora), se
transforma en 6-fosfogluconato produciendose NADPH (1 mol por cada
molecula de glucosa).
La produccin de NADPH origina un aumento de absorbancia a 340nm.
 PROCEDIMIENTO

Preparar los tubos de acuerdo a lo que se indica en la siguiente tabla:

BLANCO ESTNDAR PRUEBA (1-4)

Reactivo R 1 ml 1 ml 1 ml
Agua destilada 0.01 ml - -
Estndar - 0.01 ml -
Muestra (1-4) - - 0.01 ml
Mezclar e incubar 5 minutos a 37C.
Encender el espectrofotmetro por lo menos 15 minutos antes y seleccionar la de 500 m
Ajustar el espectrofotmetro con el Blanco.
Realizar las lecturas de los tubos y anotar la absorbancia en la tabla 2.
DETERMINACIN DE GLUCOSA
POR PRUEBA ENZIMTICA
 CLCULO
Factor=Concentracin Calibrador/Abs.calibrador
Glucosa (mg/dl) = Factor x Abs. Muestra
Ejemplo:
 GLUCEMIA valores normales

GLUCEMIA BASAL O EN AYUNAS: 70-110 mg/dL

GLUCEMIA POSTPRANDIAL: hasta 140 mg/dL
 GLUCEMIA valores normales

Hiperglucemia: >110 mg/dL en ayunas

Hipoglucemia: <45-50 mg/dL
DIAGNSTICO DE DIABETES
 PRUEBAS ADICIONALES
Curva de glucosa (Prueba de tolerancia a glucosa)

Test de OSullivan
Hemoglobina glicosilada