V.D.R.L.

RPR
(SIFILIS)
 INTRODUCCIN

Aunque esta infeccin existe en todo el planeta existen 3

teoras de donde se origin la Sfilis.

LA TEORA PRECOLOMBINA sostiene que las lesiones en

esqueletos de la edad neoltica se deben a la sfilis

LA TEORA DEL INTERCAMBIO COLOMBINO menciona que la

sfilis se origin en Amrica y fue llevada a Europa por
Cristbal Colon.

LA TEORA DE LA GUIADA creada por el historiador Alfred Syphilis sirve morbus gallicus
Crosby
SFILIS. LA MALDICIN DE VENUS

LA DOCTORA ESTADOUNIDENSE DEBORAH HAYDEN

En su libro Pox: genius, madness and the mysteries of
syphilis (genio, locura y los misterios de la sfilis)
SISTEMA BASICO PARA EL CONTROL DE UNA ITS

SISTEMA MASIVO

ETIOLOGICO

SINDROMICO
 GENERO TREPONEMA

NO CULTIVABLES ( Patogenos ) CULTIVABLES (No patogenos)

Treponema pertenue (frambesia trpica, thymosis, yaws o pian)

Treponema endmicum, (treponematosis como el bejel)
la pinta (Treponema carteum)
 Treponema pallidum
Taxonoma
Dominio: Bacteria
Filo: Spirochaetes
Orden: Spirochaetales
Familia: Spirochaetaceae
Gnero: Treponema
Especie: Pallidum
Subespecie pallidum, pertenue,
carateum, endemicum

Espiroqueta gramnegativa, mvil, que mide

de longitud de 6-20 um y dimetro de 0,5 um

Es microaeroflica, intracelular obligatoria;

es destruida por el calor, el fro, la mayora
de los desinfectantes y es el agente
etiolgico de la sfilis

Las subespecies causantes del bejel

(endemicum), mal del pinto
(carateum), pian (pertenue) son
indistinguibles morfolgica y
serolgicamente de T. paliidum
 Estructura de Treponema pallidum

Su estructura consiste de una membrana interna, una pared delgada de peptidoglucano y

una membrana externa; en el espacio periplsmico se hallan endoflagelos que le confieren
movilidad
Estructura de las membranas externa y citoplasmtica de T. pallidum
No posee LPS en su membrana
externa y dados su limitados
recursos metablicos no sintetiza
molculas como cidos grasos,
nucletidos, aminocidos, ATP,
etc., lo que imposibilita su cultivo
Adems el agente slo puede
replicarse en un rango muy
estrecho de pH (7.2-7.4) y de
temperatura (30-37 Co)
Formas de Transmisin
A travs del contacto sexual, ya sea por va vaginal, anal u oral.
Por el contacto directo con la lesin o herida hmeda de la sfilis.
Tambin puede pasarse al besar o a travs del contacto manual u otro contacto personal cercano. O
inoculacion accidental por compartir jeringas.
Durante el embarazo, antes del parto (Sfilis Congnita) y por el canal del parto (S. connatal )
Transfusiones sanguneas tambin se busca Sfilis en la sangre.
 SIFILIS CUATERNARIA
Paralisis general progresiva
Tabes dorsal: desmielinizazacion cordal
posterior
 Exmenes Inmunolgicas
Antecedentes Histricos
Exmenes No Treponmicas
1906 Reaccin de Wassermann
1928 Reaccin de Kahn
1946 VDRL (Venereal Disease Reference Laboratory)
1957 RPR (Rapid Plasma Reagin)
1968 ART (Automated Reagin Test)
1983 RST (Reagin Screen Test)
1987 USR (Unheated Serum Reagin)
Exmenes Treponmicos
1949 TPI (Treponema pallidum Inmobilization Test)
1964 FTA Abs (Fluorescent Treponemal Antibody Absorption Test)
1965 TPHA (Treponema pallidum Hemagglutination Assay)
1975 EIA (Enzyme Immuno Assays)
1985 Immunoblotting
 METODOS DE LABORATORIO

DIRECTA INDIRECTA

SEROLOGICAS
MICROSCOPIA EN
CAMPO OSCURO
IFD
PCR
RIT (Rabit Infectivy NO TREPONEMICAS TREPONEMICAS
test)

NO
NO CONFIRMATORIAS CONFIRMATORIAS
CONFIRMATORIAS

VDRL
USR ELISA(Ac treponem) FTA-ABS
RPR INMUNOCROMATOGR MHTA-TP
TRUST AFIA WESTERN BLOT
ELISA(Ag-VDRL)
 VDRL (El laboratorio de investigacin de
enfermedades venreas prueba)

FUNDAMENTO

CARDIOLIPINA REAGINAS (Ac IgM IgG)

COMPONENTES:
( Antgeno no Treponmico)

Lecitina..0,2%
Soluc. Madre- Ag
Cardiolipina.0,03%
Colesterol.0,9%

Buffer .. pH 6,0 +/- 0,1 ( 1,0% NaCl).

Formaldehdo neutro 0,5ml
Na2HPO4 anhidro 0,037g
KH2PO4 0,170 g
NaCl 10.00 g
Agua destilada 1000 ml
 A.- REACCION DE VDRL CUALITATIVA, EN
SUERO
I. Preparacin de la suspensin de trabajo (antgeno).

0,5 ml
0,4 ml
buffer
Soluc. 4,1 ml
madre buffer

II. Preparacin de las muestras y sueros control

Suero
Inactivar a Estabilidad del suero por 4
56 C en Horas de trabajo
BM x 30
min NOTA: temperatura ambiente (Ta). Para obtener resultados
confiables y reproducibles, las muestras de suero control, el antgeno
y los sueros a testear deben estar a una Ta de 23 a 29 C en el
momento de la determinacin.
III. Procedimiento(suero)
50 uL
Suero
inactiv.
+
17 uL
Susp.
trabajo

180 rpm
Diametro circ. de
1,9 cm
14mm X 4 min.

Inmediato
obs. Microsc.
10X
PRUEBA SEMICUANTITATIVA

PRUEBA SEMICUANTITATIVA : El titulo estar dado por la

inversa de la ltima dilucin que se observe reactiva
B.- REACCION DE VDRL CUALITATIVA, EN
LCR

I. Preparacin de la "Suspensin de antgeno sensibilizada":

a)Preparar la suspensin de antgeno como describe el fabricante para
la reaccin en suero.
b)Aadir una parte de solucin salina al 10 % a una parte de
suspensin del antgeno.
c)Mezclar bien por rotacin o inversin del tubo y dejar en reposo
durante 5 minutos por lo menos, pero no ms de 2 horas, antes de
utilizarla.

II. Preparacin del LCR:

Centrifugar y decantar el LCR.
El LCR se analiza sin calentarlo previamente. Las muestras que a
simple vista se vean contaminadas o que contengan sangre no son
adecuadas para la reaccin..
III. Procedimiento (LCR)
50 uL
LCR
+
10 uL
Susp. De
Ag
sensib.

180 rpm
Diametro circ. de
1,9 cm
14mm X 8 min.

Inmediato
obs. Microsc.
10X
 USR ( VDRL modificado )

COMPONENTES
( Antgeno no Treponmico)

Cardiolipina
Lecitina
Colesterol
EDTA
CLORURO DE COLINA
EDTA, elemento que hace ms estable la tcnica
CLORURO DE COLINA evita inactivar (calentar) las muestras.
Incrementa la reactividad del anticuerpo en suero no calentado
 The RPR Card antigen suspension is a
carbon particle cardiolipin antigen
that detects reagin.
Reagin is an antibody like substance
present in serum or plasma from
individuals with syphilis.
The reagin binds to the test antigen
which consists of cardiolipin-lecithin
coated particles that cause
macroscopic flocculation.
 When a specimen such as serum or plasma contains
antibody, flocculation occurs with the resulting
aggregation of the carbon particles.
The flocculation appears as black clumps against the
white background of the plastic coated card.
 Antibodies associated with syphilis begin to appear in
the blood 4 to 6 weeks after infection. Nontreponemal
tests determine the presence of reagin. Reagin is a
nontreponemal autoantibody directed against cardiolipin
antigens.
 RPR Test Cards
RPR Control Cards
RPR Antigen
Distilled Water
Dispenstirs
Rotator
 The RPR test uses a white plastic coated card that consist
of several circles that are 18 mm in diameter.
The controls which are strongly reactive, moderately
reactive, and non-reactive are contained on the control
card in a dried form.
A. Use Dispenstir to draw up distilled water
B. Drop 1 drop on the card test circle for each
patient sample.
C. Invert Dipenstir and spread the water in
the circle until the dried control is completely
reconstituted.
D. Add antigen as described for the patients
E. Rotate for 8 minutes at 100 rpm
The following reactions should be observed
to compare against the test results:
Reactive control - characteristic strong
clumping.
Reactive moderate control - moderate
clumping.
Non-reactive control - smooth, grayish
appearance of unclumped particles
 The test results should be reported as reactive (even if
minimally reactive) or non-reactive.
All test results that are nonreactive should be
quantitated.
4 DILS

8DILS
16
DILS
16
DILS
 A positive reaction is not conclusive for syphilis. Several
conditions produce biologic false positive results for
syphilis. (False positive means that the test revealed a
positive reaction when it was actually negative).
False positives may reveal the presence of other serious
diseases.
DIAGNOSTICO

Sfilis primaria
Se realiza por las lesiones tpicas y examen de campo
oscuro.
Requiere en primer lugar que la serologa inespecfica VDRL
o RPR sea positiva. La FTAABS, deber confirmar si hay
dudas en las lesiones o reafirmar la VDRL o RPR positiva.
En la Sfilis precoz la serologa puede ser negativa durante
tres meses, lo que exige la repeticin de la RPR o VDRL, a
la semana, al mes, a los tres y a los seis meses ante una
sospecha clnica alta.
La FTA-ABS sigue siendo positiva despus del tratamiento
de la sfilis, por lo que el seguimiento se har con la VDRL
DIAGNSTICO

Sfilis secundaria
Mediante el Test de campo oscuro del aspirado de los
ganglios linfticos.
Ante una VDRL o RPR positiva, confirmar con FTA-ABS o
MHA-TP.
Una VDRL inferior a 1:16 aconseja repetir la VDRL y la
FTA-ABS
 DIAGNOSTICO

Sfilis latente o tarda

En ste periodo si la FTA-ABS es positiva hay que tratar, por
que la VDRL en sta fase slo tiene un 70% de sensibilidad.
En caso de realizar un examen de LCR y el lquido de
positivo para el VDRL, nos indicar Neurosfilis. Slo se da
en un 22-69% de los casos. Si la FTA-ABS es negativa las
posibilidades de Neurosfilis son escasas.
En la Sfilis Latente de ms de 1 ao recomienda el estudio
de LCR en presencia de:
Sntomas neurolgicos.
Fracaso teraputico.
Ttulo reagnico> 1:32
Sfilis congnita
En sfilis congnita, la determinacin de anticuerpos treponmicos de tipo IgM es de
gran utilidad. Su presencia en el suero del neonato se considera diagnstico presuntivo
de sfilis congnita, aunque la prueba negativa no descarta esta posibilidad, y
debe repetirse todos los meses durante los tres primeros meses de vida, as como
tambin debe realizarse RPR o VDRL ( descenso a los 3 meses y desaparece a los 6
meses).
Las causas de resultados falso-negativos son:
por infeccin tarda durante el embarazo, por supresin de IgG en el neonato por
altos niveles de IgG materna y por un sistema inmune poco desarrollado del recin
nacido.
Las pruebas no treponmicas deben negativizar a los 3 a 6 meses de recibido
tratamiento. En casos de transferencia pasiva de anticuerpos al neonato, la prueba
de anticuerpos treponmicos de tipo IgG, debe estar negativa a los 6 meses del
nacimiento
INTERPRETACION DE RESULTADOS
PRUEBAS NO TREPONEMAICAS

Un resultado Un resultado no
reactivo puede reactivo sin
evidencia clnica:
indicar Puede indicar que no hay
Infeccin presente o pasada con Treponemas
patgenos. infeccin por treponemas o
Puede ser una reaccin falso positiva, lo cual
se detecta mediante una prueba
que el tratamiento fue
confirmatoria efectivo

El incremento en
Un resultado no
cuatro veces el ttulo
reactivo con inicial indica Infeccin o re-
evidencia clnica: infeccin
Puede observarse en sfilis primaria o en sfilis La disminucin de
secundaria por exceso de anticuerpos
(prozona) cuatro veces el ttulo
indica un tratamiento efectivo
INTERPRETACIN SEROLGICA
(Prueba No treponmica y
treponmica)
SEGUIMIENTO SEROLGICO
Las pruebas no treponmicas (USR, VDRL
o RPR)

La MHA-TP o TP-PA y la FTA-abs

Es importante que el control se realice en

el mismo laboratorio, con la misma prueba
no treponmica y, de ser posible, con la
misma marca de reactivo a fin de obtener
resultados comparables
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
 REACCIONES INESPECFICAS DE LOS ENSAYOS
NO TREPONMICOS

CAUSAS BIOLGICAS DEPENDIENTES DEL CAUSAS

DEPENDIENTES DE
PACIENTES
LAS CONDICIONES DE
ENSAYO

ENFERMEDADES CAUSAS
INFECCIOSAS ENFERMEDADES NO
INFECCIOSA
FISIOLG
ICAS
MTODO
EN QUE CASOS SE USA LAS TECNICAS
TREPONEMICAS
NO OLVIDAR EL DIAGNSTICO
DE LA SFILIS
1. El laboratorio solo debe ofrecer pruebas para diagnstico y
tratamiento, que estn suficientemente evaluadas y
ESTANDARIZADAS.
2. EL SEGUIMIENTO CLNICO o de contactos de un
paciente, se debe hacer en el mismo laboratorio y con la
misma tcnica (prueba no treponmica).
3. Se considera como DIFERENCIA SIGNIFICATIVA EL
INCREMENTO O LA DISMINUCIN DE 4 VECES EN UN
TTULO (lo que equivale a un cambio en dos diluciones)
Ejemplo: 1:16 a 1:4 o de 1:8 a 1:32 Esta situacin permite
hablar de xito en el tratamiento, recaida o reinfeccin.
4. El DIAGNSTICO de sfilis se hace con las pruebas no
treponmicas y se CONFIRMA con las pruebas treponmicas
(en poblacin de bajo riesgo).
5. La nica prueba aprobada para ayuda en el diagnstico de
NEUROSFILIS es el VDRL.
6. El diagnstico de SFILIS CONGNITA se hace en la
madre.
 PRUEBAS RPIDAS:
INMUNOCROMATOGRAFA

Muchas de las pruebas rpidas se basan en la

tcnica de inmunocromatografa.
Son membranas de nitrocelulosa donde se
colocan pptidos recombinantes de T.
pallidum (como los de 47, 17 y 15 kDa.) en
lneas separadas y antiglobulina IgG marcada
con partculas de oro coloidal, mediante
fuerzas capilares las partculas unidas a los
analitos migran lateralmente a las
denominadas zonas de captura (que es
donde estas partculas se unen a los ligandos
inmovilizados en la tira).
 PROCEDIMIENTO
Esta prueba es del tipo de pruebas point of care o pruebas rpidas,
aquellas que se realizan a la cabecera del paciente, y que no
requieren personal con entrenamiento en laboratorio, ni equipos
sofisticados, pero si deben ser realizadas por personal mdico o
enfermeras, siguiendo estrictamente las instrucciones para su
proceso y las normas de bioseguridad.
Adems se debe corroborar todos los resultados positivos con
pruebas confirmatorias.