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Universidade Federal de Juiz de Fora (UFJF)

Instituto de Cincias Exatas


Depto. de Qumica

QUI 154/150 Qumica Analtica V


Anlise Instrumental

Aula 1 Introduo a Qumica Analtica Instrumental


Parte 2

Prof. Julio C. J. Silva

Juiz de Fora, 2o Semestre, 2015


Amostras e Mtodos Analticos
Amostras e Mtodos Analticos
Amostras e Mtodos Analticos
AMOSTRAGEM

O objetivo da amostragem coletar uma poro representativa para anlise,


cujo resultado fornecer uma imagem mais prxima do universo
estudado

No importando que a amostragem seja simples ou complexa, todavia, o


analista deve ter a certeza de que a amostra de laboratrio representativa
do todo antes de realizar a anlise

Freqentemente, a amostragem a etapa mais difcil e a fonte dos maiores


erros. A confiabilidade dos resultados finais da anlise nunca ser maior que a
confiabilidade da etapa de amostragem
AMOSTRAGEM
AMOSTRAGEM

Unidades de
amostragem
Nmero de Amostras de Laboratrio

Farmacopeia

Exemplo: O limite mximo de Arsnio em alimentos de 5 mg/kg. Qual


massa de amostra deve ser tomada para a realizao da anlise?
Resposta: 4 gramas
Nmero de Amostras de Laboratrio

Exemplo: Verificou-se que a estimativa de variabilidade do teor de nquel


num carregamento de minrio, com base em 16 determinaes, era de
1,5%. Quantas amostras devem ser tomadas para ser obtido (a 95% de
confiana) um erro de amostragem menor que 0,5% de nquel?
Resposta: 41 amostras
Nmero de Amostras de Laboratrio

L(%) = (100 x E)/z


L Intervalo de confiana
E Erro absoluto (xi x0)
Z Valor aproximado (em %) do analito

Exemplo: Estime o nmero adequado de anlises repetidas (a) para


determinar aproximadamente 2% de Cl- em uma amostra, se o desvio
padro das determinaes for 0,051, (b) para 20% de Cl, com desvio de
0,093.
Resposta: (a) n=3, (b) n=2
Mtodos de Calibrao
Grficos De Calibrao Em Anlise Instrumental

Calibrao um conjunto de operaes que estabelece, sob condies


especificadas, a relao entre valores indicados por um instrumento de
medio ou sistema de medio ou valores representados por uma medida
materializada ou um material de referncia, e os valores correspondentes
estabelecidos por padres

ANVISA - Guia para Qualidade em Qumica Analtica: Uma


Assistncia a Acreditao ANVISA, 1.ed. Braslia, 2004.
Correlao e Regresso
Em anlise instrumental normalmente necessrio calibrar o instrumento

A maneira usual para realizar calibrao submeter pores conhecidas da quantidade


(p. ex. usando-se um padro de medida ou material de referncia) ao processo de
medio e monitorar a resposta da medio

Curva de calibrao grfico da resposta do instrumento (eixo y) em relao a


concentrao dos padres (eixo x)

Curva e amostra desconhecida devem estar nas mesmas condies experimentais para
que a concentrao da amostra desconhecida seja determinado por interpolao grfica
da curva

Condies a serem verificadas:


Verificar se o grfico linear ou no
Encontrar a melhor curva que se ajusta aos pontos
Quais so os erros e IC para a inclinao e intercepto da linha?
Quais erros e o IC para a concentrao determinada?
Qual o limite de deteco (LD = a menor concentrao
do analito que pode ser detectado com um predeterminado nvel de confiana)
Coeficiente de Correlao
Coeficiente de correlao de Pearson (r) verificar se existe uma relao
linear entre duas variveis xi e yi

n = n pontos experimentais
r = 1 (r +1 correlao positiva)
r = 1 (r -1 correlao negativa)
r = 1 (r 0 sem correlao, ou curva no linear)
Coeficiente de Correlao
Coeficiente de Correlao

Significncia do valor de r: : Rejeitar H0 = 0 se o valor absoluto de r for maior do


que o valor dado na tabela

Teste t para a significncia da correlao, para n -2 graus de liberdade


Regresso Linear (mtodos dos mnimos quadrados)
Mtodo dos mnimos quadrados: estabelecer a melhor reta que passa pelos
pontos (modelo de regresso), quando o erro em x considerado desprezvel

Equao da reta y = bx + a
b = inclinao da reta (slope)
a = interseo no eixo x (coeficiente linear)
y = varivel dependente (resposta)
x = varivel independente (concentrao)

Parmetros da reta de regresso


Regresso Linear (mtodos dos mnimos quadrados)
Erros na inclinao e na interseo da reta
Erro da inclinao

Resduo = yi (bxi + a)
Erros na inclinao e na interseo da reta

Desvio padro da inclinao (b)

Desvio padro da interseo da reta (a)


Erros na estimativa da concentrao

Y0 = resposta de y para a concentrao desconhecida (x0)


m = nmero de replicatas
n = nmero de pontos as curva

Os erros aleatrios tambm podem influenciar a exatido dos resultados


obtidos a partir de curvas de calibrao.

Pode-se observar que o desvio padro na concentrao Sx0 do analito,


obtido de uma curva de calibrao, mnimo quando a resposta (previso
de y) se aproxima do valor mdio (previso mdia de y).

O ponto x(mdia), y (mdia) representa o centro da reta de regresso. Os


pontos prximos desse valor so determinados com mais certeza que
aqueles mais distantes da regio central.
Erros na estimativa da concentrao
Regresso Linear (mtodos dos mnimos quadrados)
Regresso Linear (mtodos dos mnimos quadrados)
Exemplo: Na determinao de um frmaco por fluorescncia em meio
cido foram obtidos os seguintes resultados:
Concentrao de quinina 0,00 0,10 0,20 0,30 0,40
(mg L-1)

Valores de fluorescncia 0,00 5,20 9,90 15,30 19,10

a) Calcule o valor de r e a equao da reta

b) Considerando que a intensidade de uma amostra desconhecida foi de 16,1,


calcule o valor estimado de quinina na amostra.
c) Calcule os desvios padres e os intervalos de confiana a 95% da inclinao
e da interseo da reta.
d) Calcule o erro da concentrao Sx0 para a concentrao de [x] e seu IC
(95%)
Resposta: r = 0,9987; b = 48,3; a = 0,24; [x] = 0,32 mg L-1; Sb = 1,427; IC(b)
= 48,3 4,54; Sa = 0,3496; IC(a) = 0,24 1,11; Sx0 = 0,016 e IC(x0) = 0,32
0,05 mg L-1
MTODOS DE CALIBRAO
ERROS NO COEFICIENTE ANGULAR (Y) E NO INTERCEPTO (X)
MTODO DAS ADIES DE PADRO

y = b.xE + a, y = 0 xE = - a/b
Mtodo do Padro Interno (PI)

No mtodo do padro interno, uma quantidade conhecida da espcie que


atua como referncia adicionada a todas as amostras, padres e
brancos. Ento o sinal de resposta no aquele do prprio analito, mas
sim da razo entre o sinal do analito e o da espcie de referncia.

preparada, como de maneira usual, uma curva de calibrao na qual o


eixo y a razo entre as respostas e o eixo x, a concentrao do analito
nos padres.

Adio de quantidade conhecida de elemento nos padres e na amostra

Corrige variaes no sinal analtico devido a mudanas nas condies de


anlise
Mtodo do Padro Interno (PI)
Validao de mtodos e Figuras de Mrito

Validao
Faixa de trabalho
Linearidade
Sensibilidade
Limite de deteco
Limite de quantificao
Exatido (CRM)
Teste de hiptese (teste t = 95%)
Adio e recuperao (spike)
Repetitividade (p-alto e p-baixo, n=10)
Correo de interferncias (adio de padro)
Registro de validao
Robustez
Ensaio interlaboratorial
Incerteza de medio
Validao de mtodos e Figuras de Mrito

Limite de deteco (LD) e Quantificao (LQ): a menor


concentrao que pode ser distinguida com um certo nvel de
confiana. Toda tcnica analtica tem um limite de deteco.

Um valor de k de 3 corresponde a um nvel de confiana de 98%


Validao de mtodos e Figuras de Mrito

Adio e recuperao (spike): Amostra gravimetricamente


contaminada
Referncias
-Cadore, S. Notas de aula. IQ, UNICAMP, 2004.
-Santos, M., Notas de aula. Depto Qumica, UFJF. 2009
-D. A. SKOOG, D. M. WEST, F. J. HOLLER e S. R. CROUCH
Fundamentos de Qumica Analitica, 1a ed., Thomson, 2006.
- Baccan, N., Qumica Analtica Quantitativa Elementar. 3a Ed.
Edgard Blucher LTDA
- James N. Miller & Jane C. Miller. Statistics and Chemometrics for
Analytical Chemistry, fourth edition. Person Education.
- ANVISA - Guia para Qualidade em Qumica Analtica: Uma
Assistncia a Acreditao ANVISA, 1.ed. Braslia, 2004.
- Lowinsohn, D., Notas de aula. Depto. de Qumica, UFJF. 2009.