RECUPERACION Y PURIFICACION DE

PRODUCTOS BIOTECNOLOGICOS
INDUSTRIALES

Microbiología industrial
 I.- MICROBIOLOGIA Y BIOTECNOLOGIA

•La aplicación de los procesos microbianos en

la obtención de productos industriales, es una
aplicación biotecnologica.
•El Convenio sobre la Diversidad Biológica de
las Naciones Unidas (1992) define
biotecnología como: “toda aplicación
tecnológica que utilice sistemas biológicos y
organismos vivos o sus derivados para la
creación o modificación de productos o
procesos, para usos específicos” (CNDBT,
2003b).
 II.- PRODUCTOS Y SERVICIOS DE LA
MICROBIOLOGÍA INDUSTRIAL
•Se pueden agrupar en cuatro bloques:
•1. Producción de células, como levaduras, algas, hongos,
con diferentes finalidades:
• -La levadura es necesaria para la producción de pan.
• -Algunas células se usan para la alimentación
humana y de animales, (SCP, hongos o algas).
•2. Enzimas y otras proteínas de elevado valor añadido.
• Existen enzimas de interés industrial (amilasas, proteasas,
etc)
• Algunas proteínas de uso especial: la insulina, el interferón
•3. Productos químico industriales. Como:
•- ácidos; cítrico, láctico, propionico, etc.
•- Polisacáridos, aditivos alimentarios, etc.
•- Bioplásticos
•- Ciertas vitaminas
•4. Depuración de residuos.
•- Aguas residuales. Estas aguas se tratan biológicamente,
para eliminar la materia orgánica disuelta, por procesos de
metabolismo oxidativo.
•- Residuos sólidos. Procesos de digestión anaerobia, que
reduce el volumen de los residuos, convirtiendolos a biogás:
CH4 y CO2.
•- Xenobióticos. (Producidos químicamente por el hombre, no
producidos por ningún ser vivo). Se han descubierto una serie
de organismos capaces de degradarlos.

•5. Lixiviación. Recuperación de metales a partir de

minerales y restos de minas, con contenidos de metales
demasiado bajos, por acción de Thiobacillus ferrooxidans.
 Producción de enzimas
•Las células solo producen la cantidad necesaria de
enzimas.

•Un método para incrementar la síntesis de una enzima

es el de inducción.
•Las enzimas pueden ser inducibles y constitutivas.
•Los genes estructurales para la síntesis de una enzima
están normalmente inactivos en ausencia del sustrato para
dicha enzima, y se dice que está reprimida la producción de
una enzima y solamente cuando se agrega el sustrato
requerido, o un análogo, el gen estructural es activado y
dicha enzima es sintetizada (inducción), a las enzimas que
responden se les llama inducibles.
•Un ejemplo es la enzima glucoamilasa del hongo
Aspergillus niger, que rompe la cadena de azúcares del
almidón en moléculas de glucosa.
•La glucoamilasa es una enzima hidrolítica del grupo de las
amilasas, también conocida como amiloglucosidasa, su
nombre sistemático es 1,4-alfa-D-glucano glucohidrolasa
(EC 3.2.1.3). Es una de las enzimas más estudiadas a nivel
mundial.
•La síntesis de glucoamilasa se puede inducir por algunos
análogos del almidon, que son potentes inductores de la
enzima. Gracias a estos métodos, se ha podido
sobreproducir sustancias de gran importancia para la
industria y para la medicina.
•Otras enzimas:
•• PROTEASAS (Bacillus)
•• LIPASAS (Aspergillus, Rhizopus)
•• AMILASAS (Bacillus, Aspergillus, Rhizopus)
•• PECTINASAS (Aspergillus)
•• RENINA – BM
 Colorantes y gomas

•Phaffia rhodozyma, produce el pigmento astaxantina.

•Otros tipos de productos metabólicos a partir de cultivos de
microorganismos son el dextrán y la goma xántica.
•El dextrán es una cadena de moléculas de glucosa que se
utiliza como complemento del plasma en enfermos graves o
bien como mallas moleculares al entrecruzar sus cadenas
para separar compuestos en el laboratorio con base en su
tamaño. La goma xántica, que es adecuada para el consumo
humano, se agrega en algunos productos alimenticios como
estabilizador. También tiene uso en la impresión de textiles, y
en la elaboración de cosméticos y productos farmacéuticos.
 Industria alimentaria.
•El yogurt se produce por bacterias Lactobacillus bulgaricus y
Streptococcus thermophilus.
•El vinagre puede ser producido por la bacteria Gluconobacter
suboxidans;
•Saborizantes por la bacteria Corinebacterium glutamicum.
•Fermentación combinada de frijol de soya, arroz y malta da
lugar a algunos alimentos orientales como el miso, el shoyu y
el tempeh.
•La salsa de soya (sillau), se obtiene utilizando la levadura
Saccharomyces rouxii
•La producción de cerveza con levadura Saccharomyces
carlsbergensis y otros tipos de levaduras para la producción
de vino.
•Aminoácidos:
- Glutamato: potenciador del sabor
–Aspartato+ alanina: modula el sabor de jugos de frutas
–Aspartame: endulzar
–Lisina y metionina: aditivos nutritivos
–Cisteína antioxidante de jugos de frutas
•Vitaminas: rivoflavina, vitamina B12, vitamina C
 Industria farmacéutica y de agroquimicos.

•Antibióticos:
•Streptomyces, produce la anfotericina B, la kanamicina, la
neomicina, la estreptomicina, las tetraciclinas, entre otras
•Bacillus brevis produce la gramicidina S.
•La insulina, la hormona de crecimiento y el interferón,
pueden ser obtenidos mediante técnicas de ingeniería
genética utilizando la bacteria Escherichia coli.
•Algunas vitaminas como la B12 es producida por
Pseudomonas denitrificans o el Propionibacterium.

•La producción de insecticidas biológicos, por: Bacillus

thuringiensis y el Bacillus popilliae.
 Productos químicos industriales

•La industria química produce acetona y butanol a partir

de la bacteria clostridium acetobutylicum

•Glicerol (Saccharomyces cerevisiae)

•Etanol (Saccharomyces cerevisiae)
• Ácidos cítrico e itacónico (aspergillus niger)
• Ácido láctico (lactobacillus)
• Ácido propiónico (propionibacterias)
• Polisacáridos: xantanos (xantomonas), Dextranos
(leuconostoc, acetobacter, klebsiella)
 Aplicaciones ambientales:

•Biodegradación: Microorganismos para la

degradación de sustancias químicas de desecho
tóxicas o indeseables, xenobióticas no recalcitrantes
•Futuro: microorganismos modificados genéticamente
para degradar recalcitrantes
 III.- SEPARACION DEL PRODUCTO
•En algunos casos los productos industriales son
utilizados sin requerir purificación alguna, como en la
producción de vinos, yogurt, y otros productos para la
alimentacion.
•En las aplicaciones ambientales como el tratamiento de
aguas residuales y la degradación de residuos solidos, el
producto es ya un efluente purificado.
•Solo en el caso de productos que deben ser utilizados
puros, como son los productos farmacéuticos y los
productos químicos de uso industrial, es necesario
recurrir a técnicas de purificación.
 IV.- FASES DE LOS PROCESOS
BIOTECNOLOGICOS
•Los procesos biotecnológicos constan de tres fases:
–Aguas arriba. Llamados también procesos previos (upstream
processing) que incluyen: preparación del inoculo, preparación del
medio, esterilización
–Proceso principal (fermentación o bioreaccion)
–Aguas abajo (separacion y purificacion-SP). Llamadas también
operaciones de recuperación del producto final (downstream
processing). Estas operaciones comprenden todos los tratamientos
que requiere el cultivo, una vez finalizado, para la obtención del
producto en las condiciones de pureza y actividad deseadas
4.1.- Operaciones de Recuperación y
purificación
• La fase del downstream processing, comprende dos
acciones principales:
–Recuperación del producto.
–Purificación del producto
•El producto puede ser:
–La célula misma.
–Un compuesto intracelular.
–Un compuesto extracelular.
•Estas operaciones pueden representar un 60% del
costo de producción (Scrag)
4.2.- Separación y purificación de
metabolitos
•La estrategia a seguir puede resumirse en:
•1-Conocer las propiedades físicas y químicas del
producto final, como la pureza requerida. Por ejemplo,
para agentes terapéuticos se requiere un alto grado de
pureza. (máximo 100 ppm de impurezas)
•2-Definir el material de partida. Pueden existir
componentes del medio de cultivo (agua de hidrolizado de
maíz, extracto de malta, etc) que posean sustancias que,
interfieren en la purificación. En este caso se debe
eliminar ese componente del medio de cultivo.
•3. Los esquemas tentativos de Separación y Purificación
se llevan a etapas de laboratorio y piloto.
 Selección de la técnica
•Las técnicas para recuperar el producto son similares a
las usadas en la industria química convencional, pero con
la salvedad de que el producto es biológico, por lo que no
se pueden usar técnicas que puedan inactivarlo.

•La selección de las técnicas a emplear depende de:

•1. Naturaleza del producto: Localización del producto:
Variará si es intra- o extracelular; Características físicas y
químicas del producto: si tiene carga, PM; Características
biológicas: se altera con facilidad
•2. Concentración en la que se encuentra
•3. Presencia de productos colaterales
•4. Destino del producto: el grado de purificación será
diferente si se trata de un producto medioambiental,
alimentario o farmaceutico.
•5. Precio del producto: si el producto tiene un precio bajo,
entonces se usarán técnicas que no hagan encarecer los
costos.
 Separación de compuestos insolubles
•Existen diferentes protocolos, basados en diferentes
principios, ya sean el tamaño, la carga, el peso.
–a. Sedimentación: es el método más fácil y barato. Si el
producto es estable, se deja sedimentar en el propio
fermentador. Un problema es que la sedimentación requiere
tiempo, entre 24 y 48 horas.
–b. Centrifugación: es un proceso más rápido que la
sedimentación, pero que requiere energía a la vez que
algunos aparatos adecuados.
–c. Floculación: resulta de mucho interés en la industria.
Para sedimentar, las partículas han de ser mayores o iguales
a 3 μm. Si son más pequeñas, se añade un floculante,
provocando que aumenten de tamaño y sedimenten. Si lo
que sedimenta es residuo no hay problema, pero si es el
producto ha de ir con el floculante, hay que cuidar que no lo
contamine.
–d. Filtración: es un método de mucho interés. El problema
es que los filtros resultan caros y que requiere energía.
 Separación de compuestos solubles
– Diálisis: la mezcla se introduce en un saco semipermeable
adecuado, que se sumerge en agua o un tampón adecuado. Lo
que pueda pasar a través de la membrana saldrá, mientras que lo
que no permanecerá en la bolsa.
–Cromatografía de adsorción: se llena la columna de carbono
activo o similar. Se vierte el producto a purificar, y por
interacciones se podrá purificar el producto.
–Cromatografía de intercambio iónico: el producto tiene una carga
eléctrica, sea cual sea. Se llena de resina catiónica o aniónica,
según sea el caso, en una columna. El tipo de resina dependerá
de la carga del producto.
–Cromatografía de exclusión molecular: existen ciertos
polisacáridos, como dextranos o sephadex, que permiten hacer
columnas a la carta. La idea es que confiere una forma con
receptáculos para moléculas de determinado tamaño, ni más
grandes ni más pequeñas.
– Cromatografía de afinidad: es la más fina de todas las técnicas,
pero también la más cara. Se usa una columna con un sustrato
muy afín al producto, como puede ser la relación antígeno –
anticuerpo, o enzima – sustrato.
•En los procesos industriales, los métodos mas usados
son:
•- extracción liquido-liquido : en etanol, butanol, acetona,
caldo de antibioticos, etc.
•- precipitación: en proteínas por precipitación salina,
estreptomicina con sulfato de amonio
•- adsorción de solutos: como proteínas, y ácidos
orgánicos pequeños (carboxilicos) que se pueden adsorber
en solidos como carbón activado, o resinas de intercambio
iónico.
•-técnicas de membrana: se separan moléculas solubles
de pesos moleculares bajos como ácidos orgánicos,
usando la diálisis, la ultrafiltración y la osmosis inversa
 4.3.- ETAPAS EN LA
SEPARACION DE
METABOLITOS
–Separación solido-liquido.
Filtración y centrifugación
–Ruptura celular: métodos
mecánicos, permeabilización,
métodos químicos y biológicos.
(para productos intracelulares)
–Separación de restos celulares:
filtración y centrifugación.
–Concentración: ultrafiltración,
precipitación, destilación,
extracción con solventes,
extracción liquido-liquido
•Purificación del producto: Se
busca separar las impurezas
mas abundantes y eliminar la
mayor cantidad de agua.
Concentraciones típicas de algunos productos
biotecnológicos a la salida del reactor
 4.3.1.- Separación solido-liquido.
•a.- Filtración.
•En el caso de productos
biotecnológicos puede
presentar tres problemas:
•Tamaños de partículas muy
pequeños.
•Compresibilidad del solido.
–Carácter no newtoniano de
suspensiones.
•Los filtros mas usados son:
•De tambor rotatorio. Se
usan en industria
alimentaria, y farmacéutica
como en la producción de •Filtro prensa. Utiliza presión para
penicilina. impulsar la suspensión a través de
•Filtro prensa. Se usan en la las placas filtrantes.
industria cervecera, vinícola, •Las placas filtrantes son
en la recuperación de desmontables de polipropileno.
 b.- Filtro de tambor rotatorio
•Se caracterizan por tener
una tela sobre un cilindro
rotatorio, la cual se encarga
de filtrar el flujo que pasa a
través de éste.
•Dicha tela esta unida sobre
la periferia de uno de los
tambores sobre los que se
está llevando a cabo el
proceso de filtrado, aplicando
la fuerza de vacío.
•Son imposibles de operar en
condiciones estériles
 c.- Centrifugación.
•Los factores de separación son:
–el tamaño de partícula,
–la diferencia de densidad con el
medio,
–la viscosidad del caldo.
•Las velocidad requerida es
proporcional al cuadrado del
diámetro de partícula.
•Para separar partículas pequeñas,
existen centrifugas que generan
14000 a 15000 g. Pero el esfuerzo
que se produce, limita el tamaño
máximo de la centrifuga a
rendimientos de 300 a 500 L/h, con
partículas de 0.5 um
•El gran esfuerzo que se genera,
obliga a construir equipos
refrigerados
•El tipo de centrifuga mas usado es
el tipo de discos (Scragg)
 4.3.2.- Disrupción de células
•Es el proceso por el cual se produce la ruptura de las
células para librar el producto acumulado en su interior.
 a.- Métodos de disrupción

•La elección del método depende de las características de

las células y la estabilidad de los productos.
•Se debe conocer:
–Membrana celular.
–Pared celular. Tipo de célula (bacteria, hongo, algas,
etc)
•Orden de dificultad para la disrupción: Células animales,
micelios, bacilos Gram (-), Bacilos Gram (+), células
vegetales, levaduras, cocos Gram (-), esporas.
•Pueden ser:
–Mecánicos.
–No mecánicos (físicos, químicos, enzimáticos)
 a.- Métodos mecánicos

• Se basan en la aplicación de fuerzas de corte que

deforman la cubierta de las células hasta su
rompimiento.
• Características:
– Suelen ser mas efectivos que los químicos
– Son inespecíficos.
– Generan elevadas temperaturas.
– Requieren mucha energía.
– Pueden dañar productos lábiles.
• Métodos: homogenización, molinos de bolas,
sonicadores,
 Homogenización.
•Se somete la suspensión
de células a alta presión
(400 a 500 bar), y luego
se hace pasar a través de
una válvula.
•Se crean así velocidades
de corte muy altas
•Esta operación eleva la
temperatura en 1.5 oC por
cada 70 bar de presión.
•Se debe usar una
suspensión celular al
50%, en solución tampón
adecuada
•La suspensión debe
recibir un pre y un post
enfriado.
 Molino de bolas.
•Consiste en un agitador de discos
montado sobre un motor central, que
gira en una cámara, cargada con
esferas de vidrio, metal u otro
material.
•Las esferas pueden tener diámetros
de 0.2 a 15 mm
•La eficacia del rompimiento celular
depende de la concentración celular,
y de las bolas de vidrio.
•El efecto de la concentración celular
es mayor a menores velocidades de
agitación. La concentración ideal se
encuentra entre 30-60% (Scragg)
•La concentración de las bolas debe
estar entre el 70 al 90% del volumen
del molino.
•La operación genera calor, por lo que
se requiere sistemas de refrigeración.
 Sonicadores
•Se utiliza ultrasonido con
frecuencias de 20 a 50
KHz.
•Las ondas de ultrasonido
crean muchas
microburbujas en la
suspensión celular.
•Las burbujas colapsan
implosionando durante el
periodo de compresión de
la onda. (Cavitación)
•La cavitación, produce
un shock de ondas muy
intenso, con un fuerte
estrés local, ocasionando
la deformación y ruptura
de las células.
 b.-Métodos no mecánicos

• Rompen las cubiertas celulares induciendo la lisis

celular a través de medios químicos, físicos o
enzimáticos.
• Características:
– No generan daños en la célula facilitando su
posterior separación.
– Suelen ser poco eficientes.
– Son mas específicos.
– Son difícilmente escalados
 b.1.- Tratamientos químicos
•Tratamiento con solventes
orgánicos. (cloroformo, tolueno)
•Permeabilizan las membranas
celulares, disolviendo componentes
hidrófobos de la pared y los
fosfolípidos de las membranas
•Tratamiento con álcalis. (hidróxido
de sodio e hipoclorito)
•Producen saponificación de los lípidos
de la membrana. Es una técnica muy
severa, pero efectiva y de bajo costo,
siempre y cuando el producto de
interés sea resistente a la degradación
a pH elevado.
•Agentes caotrópicos (urea,
clorhidratos de guanidina)
•Interfieren con los enlaces no
covalentes (puentes de hidrogeno,
fuerzas de Van der Walls),
desorganizando la estructura del agua
y haciéndola menos hidrofílica,
debilitando las interacciones soluto-
soluto.
•Quelantes (EDTA)
•Quela los iones Ca2+ y
Mg 2+, que unen los iones
LPS, conteniendo
proteínas y fosfolípidos de
la membrana Gram (-)

•Antibióticos.
•Los B-lactámicos, son
efectivos para tratamiento
de bacterias Gram (-),
•No se utilizan a gran
escala.
•Tratamiento con
detergentes.
•Los detergentes son
anfipáticos.
•Forman micelas con los lípidos
de las membranas,
desestabilizandolas.
•Se clasifican en tres tipos:
•Aniónicos (sales de tetra-
alquil-amonio, pH básico)
•Catiónicos (SDS, pH acido)
•No iónicos (triton-X)
 b.2.- Tratamientos físicos.
•Shock osmótico,
congelamiento/descongel
amiento, descompresión,
termólisis,

•Shock osmótico.
•Se produce cuando las
células son sometidas a
medios hipertónicos ó
hipotónicos
•Las células con pared
celular, son mas difíciles
de romper.
 Congelamiento/descongelamiento
•Los cristales de hielo que se forman y crecen
durante el congelamiento, si se desarrollan en el
citoplasma, rompen la membrana celular.
•La congelación lenta no funciona tan bien como la
rápida.
 b.3.- Métodos enzimáticos.
•Disrupción enzimática.
•Es un método muy preciso pero requiere una clara
comprensión de la estructura de la pared celular de las
células que se quiere lisar.
•La principal limitación del método es el costo
•Ejemplo: enzima Lisozima (muramidasa)

•Autolisis:
•Método en el cual las células inducen su propia
disrupción, por que se producen señales que inducen la
liberación de enzimas que degradan los organelos y
membranas celulares.
•Es un método lento.
•Se inducen mutaciones en la célula, introduciendo genes
que codifican antibióticos o enzimas que degradan las
organelas y membrana celular
 Medida de la Eficiencia de la disrupción

•Metodos directos
•Se cuenta las células destruidas y las intactas.
•Técnicas: recuento en cámara, contador electrónico,
recuento en placa, centrifugas analíticas.

•Metodos indirectos.
•Determinación del grado de liberación de un metabolito al
medio externo
 V.- PROCESOS DE PURIFICACION
•Pre-tratamiento y
acondicionamiento.
Adsorción,
precipitación.
•Alta resolución:
cromatografía de
intercambio,
cromatografía de
afinidad, cromatografía
de ligando,
cristalización.
•Terminación: filtración
por geles, HPLC.
 a.- Métodos de laboratorio. Cromatografía.
•En cromatografía, las
moléculas se distribuyen entre
dos fases distintas, y la
separación tiene relación directa
con su diferencia de afinidad en
cada fase.
•Los compuestos mas afines a
la fase móvil que a la fase
estacionaria recorren una
distancia mayor que los demás.
•Los diversos métodos
cromatográficos difieren con
respecto a la fase móvil (líquido
o gas), la fase estacionaria
(papel, gel o empaque sólido) y
la fuerza que impulsa a la fase
móvil (presión, gravedad o un
campo eléctrico).
 Precipitación
•Se concentra el soluto de
una solución convirtiéndolo
en sólido mediante la
acción de un agente
precipitante.

•Ventajas:
•1. Operación que se
adapta fácilmente a gran
escala
•1. Puede realizase en
forma continua
•2. El equipo que se utiliza
es sencillo
•3. Se dispone de diversos
agentes precipitantes y
en muchos casos éstos son
baratos
 Precipitación salina (Salting-out)
•En altas concentraciones
salinas (o alta fuerza iónica)
algunos solutos como proteínas
ó polímeros precipitan debido al
aumento de las interacciones
hidrofóbicas entre ellos.
•La concentración salina y el
tipo de sal requerida para la
precipitación varían con el
soluto.
•
•Este fenómeno es empleado
para la separación de
proteínas.
•Mecanismo: La adición de
sales elimina el agua de la
proteína hidratada, dejando las
regiones hidrofóbicas en
libertad de combinarse
intermolecularmente
 Ecuación de la precipitación con sales
•Log S = A−m[Sal]
•Donde: S = Solubilidad de la proteína a un valor dado de
concentración salina.
•A = Constante que depende la proteína, del pH y la
temperatura. (toma un valor mínimo en el punto isoeléctrico)
•m = Pendiente de la curva de solubilización por salado.
Ésta es independiente del pH y la temperatura, pero varía
con el tipo de sal y de proteína. (Las sales con aniones
polivalentes tales como sulfatos y fosfatos tienen m mayores
que las sales univalentes, y los cationes polivalentes como el
calcio y el magnesio disminuyen el valor de m)
•Naturaleza de la sal:
•Los aniones son más efectivos en el siguiente orden (Series
de Hofmeister):

•Los cationes son efectivos en el siguiente orden:

 Precipitación isoeléctrica

•Esta técnica se basa en la

disminución de la solubilidad
en el punto isoeléctrico
•Mecanismo
•Las proteínas por su
naturaleza anfotérica
presentan una carga neta
negativa a pH altos y una
carga neta positiva a pH
bajos. En el pH isoeléctrico,
la carga neta de la proteína
es cero.
•A este pH la repulsión entre
moléculas es mínima y se
produce agregación.
 Precipitación con solventes
•Constantes dieléctricas a 20 oC
•Disminución de la solubilidad
por adición de un solvente
orgánico ligeramente polar
•Mecanismo
•El agua se caracteriza por su
alta constante dieléctrica, lo cual
significa que los iones en
solución acuosa presentan
interacciones débiles entre si.
•Un solvente orgánico (etanol o
acetona), presenta una
constante dieléctrica menor que •logS= logSo + K/D2S
la del agua, lo cual produce una •S = Solubilidad de la proteína
disminución en el grado de •DS = Constante dieléctrica de la
ionización de los radicales de las mezcla solvente-agua.
proteínas, y en consecuencia
•K = Constante dieléctrica
una disminución en la solubilidad
de ésta. original del medio acuoso.
•So = Es la solubilidad
 Precipitación de proteínas por
desnaturalización selectiva

•El objetivo de la desnaturalización selectiva es crear las

condiciones en las cuales la proteína de interés no se
desnaturaliza o su desnaturalización es mínima
•Si la proteína que se desea purificar presenta estabilidad
en condiciones extremas de temperatura, pH, o en
solventes orgánicos, puede utilizarse esta propiedad en
las primeras etapas del proceso de purificación.
•Métodos de desnaturalización:
–Por temperatura.
–Por pH
–Por solventes orgánicos.
 b.- Técnicas de
membrana.
•(microfiltración, ultrafiltración, y
osmosis inversa).
•a.1.- Ultrafiltración. ( o filtración
de flujo cruzado)
•Es la separación selectiva usada
para concentrar o para purificar
compuestos de medio y alto
peso molecular como: proteínas,
carbohidratos, y enzimas.
•Se usa en la separación de
células, restos celulares o
proteínas.
•La desventaja principal es el
ensuciamiento de la membrana.
 Aplicación.
- Clarificación de jarabe de maíz como dextrosa y fructosa
- Concentración del agua de lavado de almidón
- Enriquecimiento de dextrosa
 a.2.- Osmosis inversa (RO)
•Osmosis. Proceso natural
mediante el cual moléculas de
agua fluyen a través de una
membrana semipermeable,
desde una solución de baja
concentración a otra de mayor
concentración.
•R.O. Se revierte el flujo de
moléculas de agua a través de la
membrana semipermeable, como
resultado de aplicar presión a la
solución de mayor concentración.
•Es posible obtener agua pura a
partir de una solución de alta
concentración.
 Algunas aplicaciones
•Industria Azucarera
•La industria de azúcar, adiciona cal y floculan, para clarificar el
jugo y remover impurezas como ceras, dextrinas y gomas previo
al refinamiento del jugo para su evaporación y cristalización.
•La filtración por membranas puede clarificar el jugo natural,
eliminando el uso de químicos y mejorando la calidad y el
rendimiento del jugo.

•Industria Farmacéutica /Biotecnología

•La filtración por membranas reemplaza a los métodos de
separación como los filtros rotativos al vacío o la centrifugación,
mejorando en forma significativa el rendimiento del proceso.
•Otras aplicaciones incluyen:
•Purificación y concentración de aminoácidos
•Recuperación y purificación de péptidos y proteínas
•Concentración y desmineralización de plasma sanguíneo
•Industrias Química y Ambiental
•La filtración por membranas puede usarse para procesar
efluentes líquidos para reducir DBO, DQO (Demanda Biológica
y Química de Oxigeno) produciendo agua limpia.
 c.- Destilación.
•Se usa para la concentración de productos biotecnológicos no
lábiles como etanol.
•Es la operación de separar una mezcla líquida, por vaporización
y condensación en los diferentes componentes, aprovechando
los diferentes puntos de ebullición de cada una de las sustancias.
•La destilación azeotrópica es una de las técnicas usadas para
romper un azeótropo en la destilación. Un caso común es la
mezcla etanol-agua, que al 95/5 % etanol/agua, los coeficientes
de actividad del agua y del etanol son iguales, entonces la
concentración del vapor de la mezcla también es de 95/5 %
etanol-agua (azeotropo), y la destilación no es efectiva.
•El azeótropo 95/5 % debe romperse para lograr una mayor
concentración.
•Un método consiste en adicionar un material agente de
separación. Por ejemplo, benceno a la mezcla, que cambia la
interacción molecular y elimina el azeótropo.
•La desventaja, es la necesidad de otra separación para retirar el
benceno.
•Destilación al vacío.
•La estabilidad de un azeótropo
depende de la presión en la que los
coeficientes de actividad se cruzan.
•El azeótropo se puede saltar
cambiando la presión.
•Comúnmente, la presión se fija de
forma tal que el azeótropo quede cerca
del 100 % de concentración, para el
caso del etanol, operando con vacío,
este se puede ubicar en el 97 %.
•Método de tamiz molecular.
•El azeotropo 95/5 %, se hace pasar
por un lecho de moléculas que
absorben el agua de la mezcla. Luego el
tamiz se calienta para eliminar el agua
y puede reutilizarse.
 d.- Absorción.
•Consiste en la separación de uno o
más componentes de una mezcla
gaseosa con la ayuda de un solvente
líquido con el cual forma solución (un
soluto A, se absorbe y pasan a la fase
líquida).
•Un ejemplo es la absorción de
amoníaco A del aire B por medio de
agua líquida C.
•Las torres de relleno, utilizadas para el
contacto continuo del líquido y del gas,
son columnas verticales rellenas con
empaques de superficie grande.
•El líquido se distribuye sobre éstos y
escurre hacia abajo, a través del lecho
empacado, de tal forma que expone
una gran superficie al contacto con el
gas.
 Precipitado industrial
•En el diseño de un proceso de precipitación debe tomarse como
base el comportamiento cinético de las partículas en solución. El
conocimiento de este comportamiento permite hacer la selección
adecuada de la geometría en la que se realizará el proceso.
•Se puede idealizar la precipitación como un mecanismo de 6
etapas:
•1. Mezclado inicial: La alimentación conteniendo el soluto es
mezclada con el no-solvente o la sal
•2. Nucleación: Aparecen pequeñas semillas e inicia la
precipitación
•3. Crecimiento limitado por difusión: El precipitado crece por
difusión
•4. Crecimiento influenciado por flujo: Nuevo crecimiento es
ayudado por mezclado
•5. Floculación: Partículas coloides se agregan en flóculos
grandes
•6. Centrifugación: Los flóculos son separados por los métodos
ya descritos Alguno de estos procesos ocurrirán
simultáneamente, pero se discutirán como si ocurriesen
secuencialmente
 VI.- TERMINADO DEL PRODUCTO
• Etapa final del proceso.
• El producto se lleva a su concentración final, por
cristalizacion i/o secado, y se agregan
conservantes y se envasa.
 Cristalización
• Usualmente es el ultimo paso en productos de
alta pureza como los antibioticos.
• Se hace a bajas temperaturas, para minimizar
la degradación térmica de los materiales
termolábiles.
• Las condiciones optimas de separación, se
determinan experimentalmente con ayuda de
los diagramas de fase específicos.
 Secado
•Se para remover agua de los productos húmedos como
cristales.
•Las técnicas de secado deben tener en cuenta, las
características de ls materiales y el calor sensible
requerido.
•Las técnicas mas usualmente usadas son:
•-secado al vacío, para productos farmacéuticos.
•-liofilización, donde el agua se remueve por congelación
y sublimación, para antibióticos, enzimas y células.
•- secadores de tambor rotatorio, donde al agua es
removida por acción del calor superficial.
•- secadores spray, que emplean la atomización de
soluciones, en cámaras con acción del calor.