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Presentado por:

Héctor Lezcano
Isamar Chávez
Evelyn Monterrey
Amaris Ramos
David Weng
Juan Alain

ANALIZADORES HEMATOLÓGICOS
INTRODUCCIÓN
 El desarrollo de los Autoanalizadores hematológicos
comenzó en la década de los 50 con los hermanos
Wallace y Joseph Coulter, quienes inventaron en 1956 el
primer contador automático de células sanguíneas.

En 1980 se introduce el diferencial 3 Diff, además del


estudio de la serie roja con los cómputos de eritrocitos,
la determinación de la hemoglobina y el cálculo de los
índices eritrocitarios.

Todo equipo automatizado, suministra dos tipos de


resultados: un informe numérico y un informe grafico
(histogramas), y ambos poseen un software que
contiene toda la información utilizando abreviaturas en
ingles de utilidad en el informe numérico.
COMPONENTES DEL ANALIZADOR

•DILUIDOR •DISPOSITIVO DE
Disminuye la concentración de la •COMPRESOR- ASPIRADOR MEDIDA
sangre hasta el nivel adecuado para el Aporta la presión y el vacío Es la cámara donde se
funcionamiento del contador. necesarios para transportar la cuentan realmente las
Como líquido diluyente utiliza una sangre, convenientemente células sanguíneas (cámara
solución isotónica con capacidad diluida, al dispositivo de de medida o de lectura).
conductora. medida.

•TRANSDUCTOR •DISCRIMINADOR
Transforma las
señales, procedentes
Diferencia los impulsos
del dispositivo de eléctricos generados por
medida, en cada uno de los tipos de
impulsos eléctricos. células sanguíneas.
Suele ser un
fotomultiplicador
•PROCESADOR
Recoge los
•REGISTRADOR
datos obtenidos,
Imprime en papel los
los procesa y los
resultados conseguidos.
proyecta en una
pantalla.
PRINCIPIO DE LOS ANALIZADORES
HEMATOLÓGICOS

IMPEDANCIA

RADIOFRECUENCIA DISPERSIÓN ÓPTICA

CITOMETRIA DE FLUJO FLUORESCENCIA


PRINCIPIO DE IMPEDANCIA
.El principio de impedancia en el conteo de
células sanguíneas se basa en el aumento
de la resistencia producida cuando una
célula sanguínea con baja conductividad
pasa a través de un campo eléctrico.

El número de intermitencias indica la cifra de células


sanguíneas y la amplitud de cada intermitencia es
proporcional al volumen de la célula

Ejemplos de instrumentos con este principio son el


Contador Coulter, los instrumentos TOA Sysmex y los
instrumentos Abbot Cell-Dyn.

•Mientras que las células sanguíneas conducen mal la


electricidad, el líquido diluyente es un buen conductor de la
electricidad (posee una gran conductividad eléctrica).
•El dispositivo de medida consiste en un pequeño orificio, a través del cual se hace
pasar la sangre diluida. Tiene colocados un electrodo a su entrada y otro a su salida.
•También se hace pasar una corriente eléctrica constante a través de ese mismo
orificio.

•Si el orificio es atravesado solamente por líquido diluyente, la


resistencia eléctrica medida por los electrodos es mínima y constante,
pero cuando el orificio es atravesado por una célula sanguínea, se
produce un aumento de la resistencia eléctrica y un cambio de potencial
entre los electrodos.

El número de señales eléctricas generadas indica el número


de células presentes en la sangre y la amplitud de estas
señales es directamente proporcional al volumen celular.

De este modo es posible la identificación de las células y


por tanto el recuento
IMPEDANCIA
DISPERSIÓN ÓPTICA
basa en las mediciones de
la dispersión de la luz
obtenidas de una sola célula
sanguínea que pasa ata
Estas células crean una
través de un haz de luz dispersión hacia
Ejemplos de (óptico o láser delante y lateral las
instrumentos que
cuales se detectan
atizan este principio
mediante
son los Technicon H
fotodetectores .
System.

el lateral es una El grado de dispersión


medición de la hacia delante es una
granularidad de la mediación del tamaño de
célula. la celular
FLUORESCENCIA
 Un fluorocromo es una molécula química que absorbe la luz a una determinada
longitud de onda (ENERGIA ) energía de excitación y emite a una longitud superior
(MENOR ENERGIA)

Interacciona con la luz de excitación procedente de el láser.


¿CÓMO ES OBTIENE?
Fluorocromo

absorbe
Unión de energía
sitios del láser
específicos

Emisión de
•libera energía fotones a una
absorbida por : mayor
•Vibración y longitud de
disipación del calor. onda
llamada fluor
escencia
VARIEDAD DE MODELOS

•Contador Coulter serie


S-Plus: Introducido al
mercado en 1983, es un •Contador Coulter STKS: Es
analizador automático una combinación de tecnologías
multiparámetros, opera para enumerar eritrocitos,
.plaquetas y leucocitos; y para •Sysmex NE-800:
por el principio de
Realiza conteos de
impedancia. determinar un conteo diferencial
células sanguíneas ,
de cinco partes. Emplea el
determinaciones de
principio de impedancia.
hemoglobina y
diferenciales de cinco
partes
 Sysmex NE-800: Realiza conteos de
células sanguíneas , determinaciones de
hemoglobina y diferenciales de cinco partes
CITOMETRIA DE FLUJO
 Técnica de análisis celular
multiparamétrico cuyo fundamento se
basa en hacer pasar una suspensión
de partículas (generalmente células)
alineadas y de una en una por delante
de un haz de láser focalizado.
 Es una tecnología (proceso) que
permite la medida simultánea de
múltiples características físicas de una
sola célula.
 Estas medidas son realizadas
mientras las células (partículas) pasan
en fila, a una velocidad de 500 a 4000
células por segundo, a través del
aparato de medida en una corriente de
fluido.
Sistema Hidráulico Sistema Óptico
•Controles neumático y fluidos para
establecer un flujo laminar que •Láser (Argón con luz monocromática
permita a la suspensión celular de 488nm , filtros , lentes y
detectores.
atravesar la cámara de flujo.

Sistema Electroinformativo
•Convierte la luz dispersa en señales
eléctricas y las procesa para su
análisis.
Parámetros

Características
Características
antigénicas de las
morfológicas de las
células
células
(Inmunifenotípicas)

Granularidad relativa
Tamaño Relativo Fluorescencia relativa
o complejidad interna
(forward scatter-FSC) (FL1, FL2, FL3)
( side scatter SSC)

Determinación cuantitativa
Propiedad de de características
Dispersión antigénicas, bioquímicas y
biofísicas de células
individuales
SEÑALES DE DISPERSIÓN

La luz dispersada frontalmente en ángulo cónico pequeño (0-10


grados ) coincidente con luz incidente y es proporcional a tamaño
de la partícula que produce la dispersión.
SEÑALES DE DISPERSIÓN

La luz dispersada lateralmente es proporcional al la


complejidad de la estructura celular.
RADIOFRECUENCIA
Eritrograma
Se trata del análisis de la serie roja e incluye los siguientes parámetros:

• Recuento de glóbulos rojos: se trata de la cantidad de eritrocitos en un


mm3. A partir del número de células contadas por unidad de volumen, se
genera el histograma de distribución de eritrocitos.

• Concentración de Hemoglobina:
Valores Normales: Hombres: 16 ± 2 gr%
Mujeres: 14 ± 2 gr%

• Hematocrito: es el porcentaje de sangre que es ocupado por eritrocitos.

Valores Normales: Hombres: 47 ± 5 gr%

Mujeres: 42 ± 5 gr%
Índices Hematológicos

 Concentración de hemoglobina media corpuscular (C.H.MC): Se refiere a


la concentración promedio de hemoglobina por mililitro de eritrocitos. Puede ser
calculada utilizando los valores de hemoglobina y de hematócrito o medida
directamente mediante luz láser y su grado dispersión.
Valor normal: 32% a 36%

 Volumen corpuscular medio (V.C.M): Expresa en micras cúbicas (u3) el


volumen que ocupa un hematíe de tamaño medio. El valor de este parámetro
puede ser obtenido a partir del histograma de distribución de volumen de los
eritrocitos o medido directamente mediante la técnica de dispersión de la luz láser.
Valor normal: 87 ± 5 u3 ó um3
 Hemoglobina corpuscular media (H.C.M.): Es el valor promedio de la
hemoglobina contenida en cada eritrocito. Puede ser calculada utilizando
los valores de hemoglobina y de hematocrito o medida directamente
mediante luz láser y su grado dispersión.

Valor normal: 27 – 32 pg

 Contenido de hemoglobina presente en los reticulocitos (CHr):


Constituye un indicador precoz de eritropoyesis deficiente en hierro que es
mucho más sensible a la suplementación con hierro que otros parámetros,
tales como hematócrito, hemoglobina, VCM, RDW, HCM y ferritina. Es de
reciente incorporación gracias a los analizadores hematológicos.
 La Amplitud de Distribución Eritrocitaria (ADE o RDW): se utiliza como
indicativo de anisocitosis. Este índice es facilitado por los contadores
automatizados.

Valor normal: 11,5 – 14,5%


LEUCOGRAMA
 Es la fracción del hemograma que se refiere al conteo total de los
leucocitos (glóbulos blancos) y de las diferentes clases de leucocitos. En sí
está compuesto por dos análisis:

 Conteo total de leucocitos: Los leucocitos son las células encargadas


de proteger al organismo contra las infecciones. La presencia de una
infección normalmente altera el número total de leucocitos. Valor
normal: 4,500 a 10,000 glóbulos blancos
por microlitro (mcL)

 Conteo de leucocitos diferencial: apodado simplemente


"diferencial", determina la proporción o porcentaje de las principales
clases de leucocitos dentro del conteo total de leucocitos. (neutrófilos,
eosinófilos, basófilos, linfocitos y monocitos). Cada clase tiene un
papel diferente en la defensa del organismo. La cantidad de cada clase
de leucocito da información muy valiosa acerca del estado del sistema
inmune.
LEUCOCITOS EN FROTIS
SERIE BLANCA
PLAQUETOGRAMA
 Plaquetas (PLT): se refiere al recuento global de plaquetas realizado de
forma automatizada. Valor normal: 150 a 400 × 109/L.4

 Volumen medio plaquetario (VPM): es un indicador del tamaño de las


plaquetas y muestra una relación inversa no lineal con el número de estas.

 Plaquetocrito (PCT): se calcula relacionando el recuento de células con el


volumen medio plaquetario. Ofrece un estimado sobre la fracción del
volumen sanguíneo total ocupada por las plaquetas. Su valor aumenta en
situaciones que cursen con trombocitosis. Valor normal: 0,1 a 0,4 %.
 Componente medio plaquetario o concentración media de plaquetas
(CPM): es un indicador del grado de activación plaquetaria y una variable
clínica útil en el estudio y seguimiento de pacientes con riesgo de trombosis
como en el caso de dializados, diabéticos, fumadores, angina inestable,
mujeres embarazadas.

 Plaquetas reticuladas (PR): las PR son las más jóvenes de la sangre


periférica con un contenido de ARN superior a las demás. Son detectadas
mediante la aplicación del método inmunológico. El porcentaje normal de
PR es de 0,98 ± 0,41 %.
INFORMACIÓN GRÁFICA
HISTOGRAMA DE ERITROCITOS
DISTRIBUCIÓN NORMAL
REL
NIo RBC 6.09
VCM x ADE HGB 17.5 HCT
CUERPO 50.6 MCV
83.1 MCH
28.7 MCHC
34.6 RDW
DEDO Artefactos glóbulos
13.0
rojos aglutinados

RBC 50 100 130 200 300


fL
HISTOGRAMA DE LEUCOCITOS
Recuento total de Leucocitos Granulocitos

EJEMPLO DE ANALISIS
REL Neutrófilos
DISTRIBUCIÓN NORMAL
NIo.

WBC 8.3 LY
# 2.5 MO #
.8 GR # 5.1
MO o MID
Linfocitos

90 160

WBC 50 100 200 300 400

MO – MID = Eosinófilo, Basófilo, Monocito


HISTOGRAMA DE PLAQUETAS

REL DISTRIBUCIÓN NORMAL


NIo: NOMOGRAMA NORMAL

PLT 319 PCT


.239 MPV
7.5 PDW
16.3

PLT 2 10 20 FEMTOLITROS
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS

Cuadrante 6
Cuadrante 3 Eosinófilos
Monocitos
Cuadrante 4
Neutrofilos

Cuadrante 2
Linfocitos
Cuadrante 5 Cel.
Dañadas

Cuadrante 1 Blastos
RECUENTO DIFERENCIAL DE LEUCOCITOS DE
CINCO PARTES
RECUENTO DIFERENCIA DE LEUCOCITOS
ANORMAL
1

1. Blastos 9 5. Eritrocitos

2 nucleados

2. Granulocitos
inmaduros 6. Linfocitos
7 Variantes
3. Neutrófilos 8

envejecidos
3
y lesionados 7. Blastos

6
4. Plaquetas 8. Linfocitos

gigantes Variantes
5 4
9. Blastos
NEUTROPENIA Y LINFOCITOSIS
WBC Cuadrante 4
Cuadrante 3 Neutrofilos
Monocitos

Cuadrante 6
Eosinófilos

V
O
L
U
M
E
N
Cuadrante 2 Cuadrante 5
Linfocitos Cel. Dañadas

Cuadrante
1 Blastos
DF1
LINFOCITOS ATÍPICOS
WBC Cuadrante 4
Cuadrante 3 Neutrofilos
Monocitos

Cuadrante 6
Eosinófilos

V
O
L
U
M
E
N

Cuadrante 2 Cuadrante 5
Linfocitos Cel. Dañadas

Cuadrante
1 Blastos
DF1
EOSINOFILIA
WBC Cuadrante 4
Cuadrante 3 Neutrofilos
Monocitos

Cuadrante 6
Eosinófilos

V
O
L
U
M
E
N

Cuadrante 2 Cuadrante 5
Linfocitos Cel. Dañadas

Cuadrante
1 Blastos
DF1
GRANULOCITOS INMADUROS
WBC Cuadrante 4
Cuadrante 3 Neutrofilos
Monocitos

Cuadrante 6
Eosinófilos

V
O
L
U
M
E
N

Cuadrante 2 Cuadrante 5
Linfocitos Cel. Dañadas

Cuadrante
1 Blastos
DF1
DISPERSOGRAMA
HISTOGRAMA NORMAL
ANEMIA POR DEFICIENCIA DE
VITAMINA B12

La curva se desplaza
a la derecha
ANEMIA POR DEFICIENCIA DE
HIERRO

La curva se desplaza
a la izquierda
HISTOGRAMA TALASEMIA BETA

La curva se desplaza
a la izquierda
 Línea Verde: Microcitosis sin anisocitosis.
 Línea Roja: Macrocitosis sin anisocitosis.

 Línea Amarilla: Anisocitosis, y/o Poiquilocitosis.

 Línea Azul: Doble población


Distribución de plaquetas e
interferencias

Posible agregación plaquetaria.

Interferencia producida por microcitosis marcada.


ALARMAS EN LOS ANALIZADORES
HEMATOLÓGICOS:
Cualitativas Cuantitativas
Identifican blastos, células Identifican anemia/policitemia,
anormales, granulocitos leucopenia/leucocitosis,
inmaduros, etc. trombocitopenia/trombocitosis

Útiles Deseables
Identifican anisocitosis, tamaño Identifican eosinofilia,
de plaquetas, aglutinación de eritrocitos nucleados, células
eritrocitos, plaquetas y drepanociticas, esferocitosis,
hemoglobinas anormales fragmentos de eritrocitos y
células de frotis.
UTILIDAD CLÍNICA
UTILIDAD CLÍNICA
 Contribuye con la
valoración del resultado de
una citometría hemática.
 Valoración de la función
medular ósea. VPM bajo:
hipoproducción medular.
VPM alto: trastorno
mieloproliferativo
 A partir de los resultados
obtenidos se puede
proceder a hacer pruebas
más profundas
UTILIDAD CLÍNICA
 Ventaja: Buena apreciacion la distribución
volumétrica real entre todos los tipos celulares
presentes en la muestra incluyendo en algunas
patologías la visualización aun de linfocitos.

 Diferenciación entre ferropenia y talasemia menor. Un


VCM bajo y RDW: diagnóstico de ferropenia. Un VCM
bajo y RDW normal: diagnóstico de talasemia menor
Gracias