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AGAR HIERRO

KLIGLER
MEDIO DE CULTIVO FRECUENTEMENTE UTILIZADO EN LA MICROBIOLOGIA DE
ALIMENTOS PARA LA DIFERENCIACIÓN DE ENTEROBACTERIAS EN BASE A LA
FERMENTACION DE HIDRATOS DE CARBONO Y A LA PRODUCCION DE ACIDO
SULFHIDRÍCO.
FUNDAMENTO.

• La lactosa y la glucosa son los hidratos de carbono fermentables.


• El tiosulfato de sodio es el sustrato necesario para la producción de
sulfhídrico
• El citrato de hierro y el amonio son la fuente de iones los cuales se combinan
con el sulfhídrico para formar el sulfuro de hierro de color negro.
• El rojo de fenol es el indicador de pH y el cloruro de sodio mantiene el
balance osmótico
• El agar es el agente solidificante
• Por la fermentación de azucares se producen ácidos que se detectan con
el ´´rojo fenol’’
CARACTERÍSTICAS DEL PRODUCTO

Medio de cultivo deshidratado:

Color beige amarillento.


Homogéneo.
De libre deslizamiento
Cuando el medio de cultivo esta preparado tiene
color rojo.
FORMULA EN GRAMOS POR LITRO.
Peptona de carne……………..13.0gr
Cloruro de sodio…………………5.0gr
Lactosa …………………………..10.0gr
Tripteína…………………………..10.0gr
Glucosa…………………………….1.0gr
Citratro de hierro y amonio…….0.5gr
Tiosulfato de sodio……………….0.3gr
Rojo de fenol…………………...0.025gr
Agar……………………………….15.0gr
pH final de 7.3
SIEMBRA.
A partir de un cultivo puro de un microorganismo en estudio, con aguja
de inoculación, sembrar en el medio de cultivo, picando el fondo y
extendiendo sobre la superficie del mismo.
PARA EL PROCEDIMIENTO DE
ANÁLISIS:

Incubar los tubos con las tapas flojas a 35°C en una atmosfera aerobia

Examinar los tubos después de 18-24 horas, muestran indicios de


crecimiento y reacciones
LIMITACIONES DEL
PROCEDIMIENTO:
Los organismos que generan ácido sulfhídrico pueden producir tanta
precipitación de color negro (Sulfuro ferroso) que enmascare la acidez
producida en la base del tubo

Para su identificación, los organismos deben encontrarse en un cultivo puro,


Deben llevarse a cabo pruebas morfológicas, bioquímicas y/o serológicas
para lograr una identificación final.
INTERPRETACIÓN DE
LOS RESULTADOS.
 Pico rojo/ Profundidad amarilla : El microorganismo
solamente genera glucosa.

 Pico amarillo / Profundidad amarilla: El microrganismo


fermenta glucosa y lactosa.

 La presencia de burbujas o la ruptura del medio de cultivo :


Indica que el microorganismo esta produciendo gas.

 Cuando se torna negro: Quiere decir que el


microorganismo produce ácido sulfhídrico
LIMITACIONES Y PRECAUCIONES.

 No utilizar el producto si existen signos de


contaminación, o deterioro, así como
tampoco si ha expirado su fecha de
vencimiento.

Los resultados de la prueba deberán ser leídos


en un lapso de 18 a 24 hrs.

Si se efectúa antes pueden existir falsos


positivos.

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