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ESTUDIO DE LAS ORGANELAS CELULARES:

MITOCONDRIAS, LISOSOMAS, CLOROPLASTOS,


PLASTIDIOS y VACUOLAS

Práctica N° 9
OBJETIVOS
• Observación de orgánulos como mitocondrias en célula eucariota
animal (mucosa bucal) mediante el empleo de la técnica de
coloración vital con colorante verde de Janus y lisosomas célula
eucariota protista (protozoarios), con el rojo neutro.
• Observación de plastidios (cloroplastos, amiloplastos, cromoplastos),
en células vegetales (hoja de Elodea, papa, zanahoria, ají).
• Observación de vacuolas en células vegetales (betarraga).
GENERALIDADES
• Las células eucariotas poseen
diferentes organelas u orgánulos
que cumplen diferentes
funciones.
• Conforman organismos
pluricelulares como animales
(metazoarios) y plantas, y
organismos unicelulares como
protozoarios.
• Las células vegetales a diferencia
de las células animales
presentan plastidios:
cloroplastos, cromoplastos y
leucoplastos.
• Los lisosomas son orgánulos
relativamente grandes, formados por el
Aparato de Golgi,​ que contienen enzimas
hidrolíticas y proteolíticas encargadas de
degradar material intracelular de origen
externo (heterofagia) o interno (autofagia)
que llegan a ellos: DIGESTIÓN CELULAR.
Son estructuras esféricas rodeadas de
membrana simple. Son bolsas de enzimas
que si se liberasen, destruirían toda la
célula. Esto implica que la membrana
lisosómica debe estar protegida de estas
enzimas. El tamaño de un lisosoma varía
entre 0,1-1,2 μm. Se encuentran en todas
las células vegetales y animales aunque su
contenido es distinto.
• Las mitocondrias son orgánulos
celulares encargados de suministrar la
mayor parte de la energía necesaria para
la actividad celular (respiración
celular).Actúan como centrales
energéticas de la célula y sintetizan ATP
a expensas de los carburantes
metabólicos (glucosa, ácidos grasos y
aminoácidos). La mitocondria tiene la
función vital de sintetizar ATP para la
célula en presencia de oxígeno. La
mitocondria presenta una membrana
exterior permeable a iones, metabolitos
y muchos polipéptidos.
• Casi en todos los eucariotas: vegetales y
animales.
Plastidios o plastos
• Son orgánulos propios de las células vegetales,
cuya función principal es la producción y
almacenamiento de compuestos químicos que
serán utilizados por las plantas.

*Cloroplastos: plastos que contienen el pigmento


clorofila.
*Cromoplastos: plastos que contienen pigmentos
como carotenos, xantófilas, licopeno.
*Leucoplastos: plastos incoloros, sin pigmentos, pero
que almacenan sustancias de reserva:

- Amiloplastos: leucoplastos que almacenan


almidón.
- Proteinoplastos: leucoplastos que almacenan
proteínas.
- Oleoplastos: leucoplastos que almacenan aceites.
Vacuolas
• Son consideradas orgánulos,
limitados por una membrana o
tonoplasto; pueden almacenar
agua y moléculas como
proteínas, azúcares y pigmentos,
dependiendo su función
(pulsátil, almacenamiento,
digestiva).
• En las células vegetales pueden
ocupar hasta el 90% del volumen
total de la célula.
Procedimiento
Observación de Mitocondrias en Colorante
epitelio bucal: básico
1. Obtener un raspado suave de la supravital,
mucosa bucal. denominado
2. Realizar un frotis extendiendo la diazina verde
muestra sobre una lámina,
3. Dejar secar la lámina con la muestra al
medio ambiente y luego cubrir la
muestra con verde de Janus durante 5
minutos,
4. Eliminar el exceso de colorante y dejar
secar al medio ambiente, observar al
microscopio con objetivos de 10x y
40x.
5. Reconocer las mitocondrias teñidas de
verde y refringentes al movimiento del
tornillo micrométrico.
mitocondria
Procedimiento Es un
Observación de Lisosomas en colorante
vital,
protozoarios indicador
1. En una lámina colocar dos gotas orgánico para
valoración
de cultivo de protozoarios y una gota ácido-base.
del colorante rojo neutro, mezclar
dejar reposar 2 min.
2.- Cubrir con una laminilla y
observar la preparación con
objetivos de 10x y 40x.
3.- Reconocer los lisosomas, teñidos
de rojo, en el interior de los
Paramecium.

lisosoma
Procedimiento
 Observación de Plástidos en
células vegetales:

Cloroplastos:
1. Seleccionar una hoja joven de
Elodea y colocarla sobre una
gota de agua en una lámina
portaobjetos.
2. Cubrir la muestra con una
laminilla.
3. Observar al microscopio con
objetivos de 10x y 40x y cloroplastos
reconocer los cloroplastos de
color verde en el citosol de la
célula.
Procedimiento
Cromoplastos
1. Realizar cortes finos
transparentes de zanahoria y ají
amarillo sobre láminas
portaobjetos.
2. Colocar una gota de agua sobre
cada corte.
3. Cubrir con una laminilla y
observar con objetivos de 10x y
40x.
4. Reconocer los cromoplastos del
color anaranjado o amarillo de
formas circulares, elípticas y
aciculares.
Procedimiento
 Amiloplastos
1. Realizar un corte transversal fino de
papa colocar sobre una lámina
portaobjetos y agregar una gota de
Lugol.
2. Cubrir la lámina con una laminilla y
observar con objetivos de 10x y 40x.
3. Observar los amiloplastos teñidos
de violeta.
Procedimiento
 Observación de Vacuolas en célula
vegetal:
1. Realizar un corte transversal fino de
betarraga y colocar sobre una lámina
portaobjetos, luego agregar una gota de
agua.
2. Cubrir con una laminilla y observar al
microscopio con objetivos de 10x y 40x.
3. Observar una gran vacuola llena de
pigmentos disueltos como la
betacianina de color grosella y
betaxantina de color amarillo.
PRÁCTICA #10
Actividad Catalítica: Enzimas
• Traer hígado de pollo.