NIVELES DE LA ARQUITECTURA

PROTEICA

Prof. Marco Salazar Castillo

Proteínas:
• Biopolímeros
• 50% peso seco de la > de organismos.
• Versatilidad de funciones.
• Expresan la información genética.
• Secuenciación
• Const. de aa.
CARACTERISTICAS DEL ENLACE PEPTIDICO

 Es rígido y plano; la rigidez permite que las

proteínas adopten formas bien definidas.

 El H del grupo amino sustituido está casi siempre

en posición opuesta al O del grupo carbonílico
(trans).

 Tiene carácter parcial de doble enlace.

FORMACION DEL ENLACE
PEPTIDICO
Péptidos cortos de hasta 10 restos de aas = OLIGOPEPTIDOS

Péptidos largos = POLIPEPTIDOS

Polipéptidos con más de 50 aas = PROTEINAS

 MADURACIÓN O PROCESAMIENTO DEL
POLIPÉPTIDO NACIENTE

a) Maduración por modificación de aminoácidos:

1. Unión de sustituyentes a los aminoácidos: acetilación,
carboxilación, fosforilación, hidroxilación, metilación.

2. Incorporación de glúcidos.
3. Modificación con lípidos: acilación, prenilación.
4. Formación de puentes disulfuro.

b) Maduración por escisión de las proteínas:

procesamiento proteolítico.-
1. Activación de proenzimas proteolíticas
2. Activación de precursores de hormonas peptídicas
ESTRUCTURA SECUNDARIA

Se relaciona con el ordenamiento espacial de los

residuos de aminoácidos próximos entre sí, en la
secuencia lineal.

Algunas de estas estructuras son de naturaleza regula:

Hélice α , lámina plegada β.

 ESTRUCTURA TERCIARIA

Se refiere al ordenamiento espacial de

aminoácidos alejados en la secuencia lineal,
incluyendo los enlaces disulfuro.

La estructura terciaria de una proteína es la

forma tridimensional o configuración, necesaria
para cumplir su actividad biológica.
 ESTRUCTURA CUATERNARIA

Se refiere al ordenamiento espacial de subunidades,

cuando las hay y a los contactos entre ellas.
Cuando existen varias cadenas polipeptídicas en una
proteína, a cada una se la considera una subunidad.
Cada subunidad es un monómero.
ASPARTATO
TRANSCARBAMILASA
 EL NOBEL DE QUÍMICA PREMIA EL DESCUBRIMIENTO Y
DESARROLLO DE LA PROTEÍNA VERDE FLUORESCENTE
La proteína verde fluorescente (GFP, por sus siglas en
inglés), una de las principales herramientas de trabajo de
la biociencia moderna.
La proteína GFP se observó por primera vez en la década
de los 60 en la medusa 'Aequorea victoria', en la costa
oeste de Norteamérica. Osamu Shimomura, nacido en
1928, fue el primero en aislarla y en descubrir que, bajo la
luz ultravioleta, la proteína brillaba de color verde
fluorescente.

La proteína verde fluorescente tiene una masa de

aprox. 30 kd, tiene estructura de barril muy
marcada.
El cromóforo es un sistema de anillos que se forma
a partir del trio de aa Ser-Tyr-Gly (posiciones 65-67)
en el interior del barril.

La GFP podría ser utilizada en la tecnología genética

para rastrear el camino celular.
Roger Y. Tsien (1952). USA Martin Chalfie (1947). USA. Osamu Shimomura (1928). USA.

"Por el descubrimiento y desarrollo de la

proteína verde fluorescente, GFP"
 DETERMINACIÓN DEL PUNTO
ISOELECTRICO DE LA CASEINA
La caseína representa el 80% de las proteínas presentes en la leche y el
2,7% en composición de la leche líquida, hay varios tipos de caseína,
estas proteínas precipitan del líquido cuando esta toma un pH ácido de
4,6.

El pH en el que precipitan las proteínas se denomina punto

isoeléctrico (pI), ya que se encuentran en el equilibrio las cargas
positivas y negativas presentando una carga neta de 0 y la proteína
presenta su máxima posibilidad para ser precipitada ya que la partículas
se agregan.

Debido a la composición en aminoácidos de la proteína, los radicales

libres pueden existir en tres formas dependiendo del pH del medio:
catiónicos, neutros y aniónicos, y así cada proteína tendrá un pI diferente.
INVESTIGACIÓN DE
PROTEÍNAS
Para entender los procesos biológicos que se
producen en el nivel molecular es necesario
identificar las proteínas que participan en dichos
procesos, aislarlas y analizar su:
 función
 secuencia aminoacídica
 estructura espacial
 SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS POR
CROMATOGRAFÍA
CROMATOGRAFÍA DE INTERCAMBIO
IÓNICO
 SEPARACIÓN DE PROTEÍNAS POR
ELECTROFORESIS
 Digresión.- Electroforesis bidimensional:
• es un proceso especial de alto rendimiento,
• es una combinación de enfoque isoeléctrico y electroforesis con SDS
• Las proteínas se marcan con 35S-metionina radiactiva
EXCLUSION MOLECULAR
PURIFICACIÓN DE PROTEÍNAS -
CENTRIFIGACIÓN
CROMATOGRAFÍA DE EXCLUSIÓN MOLECULAR
CROMATOGRAFÍA DE AFINIDAD
(POR LIGANDOS)