Efecto de la concentración de lactosa

sobre la producción de β-D-

galactosidasa a partir de
Kluyveromyces marxianus ATCC
8554 en cultivo por lote alimentado
INTRODUCCION
 La industria láctea genera grandes cantidades de suero de leche.
 Debido a los elevados contenidos de carbohidratos, proteínas y lípidos
que exhibe y una Demanda Biológica de Oxígeno (DBO) entre 30.000 y
40.000 ppm, es considerado un subproducto potencialmente
contaminante.
 El suero de leche puede ser utilizado como un sustrato económico.
Kluyveromyces marxianus

 Levadura respiro- fermentativa (Ciclo de Krebs

y fermentación a etanol) donde utiliza la
lactosa como fuente de carbono.
 Se puede encontrar en productos lácteos, aguas
residuales de fábricas de azúcar
 Presenta altas velocidades de crecimiento,
capacidad de producir enzimas y habilidad de
crecer a temperatura de hasta 52°C.
MATERIALES Y METODOS
 MEDIO DE CULTIVO:
Suero de leche dulce, de la producción de queso prensado.

 PREPARACION:
A. Tratamiento termoácido:
1. pH 4.5 a 90°C por 10 min
2. Enfriado a 35°C
3. Centrifugación a 5000 rpm por 5min
4. Filtración
MATERIALES Y METODOS

 PREPARACION:
B. Dilución:
1:1 para la concentración a 2.3%
C. Suplementación de nutrientes:
a. Lactosa
b. Extracto de levadura 0.7%
c. Sulfato de amonio 0.8%
d. Sulfato de magnesio 0.05%
D. Esterilización
Autoclave con pH 5 a 115°C, 24.5 psia durante 20 min
MATERIALES Y METODOS

 MICROORGANISMO
Incubación de 3 días a 25°C de levadura en medio agar malta

 PREPARACION DEL INOCULO

A partir de 300 mL de lactosuero suplementado, se incubó junto con la levadura a 30°C
durante 7 horas.
MATERIALES Y METODOS
 CULTIVO
REACTOR
Volumen del reactor: 5L
Aeróbico
Agitación a 200 rpm
1. POR CARGA
Carga: 1.2 L de lactosuero + 0.3 L inóculo
Tiempo: 7 horas
2. POR LOTE ALIMENTADO
Alimentación de 0.21 L/h de lactosuero
Tiempo: 7 horas
RESULTADOS
RESULTADOS
RESULTADOS
CONCLUSIONES

 El cultivo por lote alimentado representa una alternativa

biotecnológica para incrementar la producción de la β-Dgalactosidasa
a partir de suero de leche.
 La concentración de lactosa en el suero tuvo un efecto significativo
sobre la cantidad de enzima obtenida y el rendimiento, alcanzándose
una mayor producción con 4,7% de lactosa.
 El proceso por lote alimentado también favoreció el crecimiento,
aunque el rendimiento celular fue mayor con el suero de leche diluido
(2,3% de lactosa).