6.

3 Ciclo de nitrógeno
Importancia: El nitrógeno es un elemento
que se encuentra tanto en las partes vivas
como en las partes inorgánicas de nuestro
planeta . El ciclo de Nitrógeno es uno de los
ciclos bioquímicos, y es muy importante para
los ecosistemas.
Aminoácidos, Proteínas (enzimas), Ácidos
nucleídos, Aminoazúcares, Antibioticos…
Colorantes, Plaguicidas, Explosivos (TNT),
Drogas o Toxinas (KCN)…
 CICLO DEL Nitrógeno
Nitratos,
Nitritos,
Amoniaco

N2 (no
Aminoácidos, asimilable
Proteínas, para
bases algunos
nitrogenadas microorga-
nismos)
NITRÓGENO

De gran
Llevada a
importancia
cabo en
para los
agua y
microorga-
suelo.
nismos
 CICLO DEL NITROGENO

Nitrato

Proteínas

Nitrito

Nitrógeno
Amoniaco
 Reservorios: El nitrógeno se mueve muy
lentamente a través del ciclo y, en su
trayectoria, se va almacenado en reservorios
tales como la atmósfera, organismos vivos,
suelos, y océanos.

Litosfera: 1.8×1016 toneladas en forma amonio. Inerte

Atmósfera: 3.8×1015 toneladas en N2. Ciclado, 98%
Biosfera: 7.8×1013 toneladas. Ciclado, 2%
http://www.lenntech.es/ciclo-nitrogeno.htm#ixzz0iZoZMFLP
CICLO DEL NITROGENO…

Los procesos de transformación química que

intervienen en el ciclo de nitrógeno son varios:
(1)fijación (reducción) de nitrógeno molecular a
amoniaco
(2)asimilación de amoniaco
(3)nitrificación
(4)reducción de nitrato (denitrificación),
(5)reducción asimilativa de nitrato
(6)amonificación.
Oxidación anaerobica
 Reducción
asimilatoria del
nitrógeno
Reducción asimilatoria
del nitrógeno

En los
nódulos de
leguminosa

En plantas,
animales, etc.
6.3.1 Proteolísis
La proteólisis es la
degradación de proteínas
ya sea mediante enzimas
específicas, llamadas proteasas, o por medio
de digestión intramolecular.
Descomposición: En cada nivel trófico se libera
al ambiente nitrógeno en forma de excreciones,
que son utilizadas por los organismos
descomponedores para realizar sus funciones
vitales. Proteolísis y Amonificación
http://www.lenntech.es/ciclo-nitrogeno.htm#ixzz0iZp7oqKq
Proteólisis:
Sustrato Producto Producto
Proteínas Péptidos Aminoácidos
Proteinasa Peptenasa
exopeptidases and endopeptidases

Condiciones: Aerobiosis / Anaerobiosis

Microorganismos: Bacillus, Aspergillus
oryzae, Virus. “Microbial proteases account
for approximately 40% of the total
worldwide enzyme sales”.
En suelo, agua, sedimento
 Factores: pH,
temperatura,
salinidad, materia
organica, etc.

Distribution of
enzyme sales.
The shaded
portion indicates
the total sale of
proteases.
6.3.2 Mineralización (Amonificación)

NH2-CO-NH2+H2O Ureasa
CO2+2NH3
CH3-CHNH2-COOH + H2O
anaerobiosis
CH3-CHO-COOH + NH3
CH3-CHNH2-COOH + O2
aerobiosis
CH3-COOH + CO2 + NH3
Sustratos, productos, condiciones, enzimas,

Microorganismos:
En suelo, agua, sedimento
 En suelo, sedimento etc.
6.3.3 Nitrificación Nitrobacter winogradskyi
Nitrificación: es la transformación del
amoniaco a nitrito, y luego a nitrato.
Esto ocurre por la intervención de
bacterias del género Nitrosomonas, que
oxidan el NH3 a NO2-.
Los nitritos son oxidados a nitratos
NO3- mediante bacterias del género
Nitrobacter.
Importancia ecológica: destoxicidad y
contaminacion
http://www.lenntech.es/ciclo-nitrogeno.htm#ixzz0iZqWW5KG
6.3.3.1 Nitritación

NH4+ + O2 NO2- + H2O

Sustrato, Producto, condición, …

Microorganismos (amonia oxidizing
bacteria, AOB): Nitrosomonas,
Nitrosococcus
Factores: pH, humedad, materia organica,
[O2] o OD
Impacto ecológic: toxina y contaminación
Microb Ecol. 2010 Jan;59(1):46-
58.
Nitrogen transformations and
diversity of ammonia-oxidizing
bacteria in a desert ephemeral
stream receiving untreated
wastewater.
Angel R, Asaf L, Ronen Z,
Nejidat A.

DGGE analysis of PCR-

amplified 16S rRNA gene
fragments from a.
sediment in fall; b. input
wastewater; c. a reference
spring; d. a bank soil
sample;
6.3.3.2 Nitratación
- 1
NO2 + 2 O2 NO3-

Sustrato, Producto, condicion, …

Microorganismos (nitrite-oxidising bacteria,

NOB): Nitrobacter, Nitrospirillum
Factores: pH, humedad, materia organica
Impacto ecológico: Perdida y contaminacion,
destoxicidad etc.
 Los nitrificantes crecen lentamente
porque:
Para la fijación de 1 mol de CO2,
deben oxidar unos 100 moles de
nitrato, mientras que la oxidación de
35 moles de amoniaco consigue el
mismo resultado.
Water Sci Technol. 2009;60(10):2529-36.
Population dynamics of nitrite oxidizers in nitrifying granules.
Vázquez-Padín JR, Figueroa M, Mosquera-Corral A, Campos JL,
Méndez R.

The competition between Nitrospira and Nitrobacter species

was analyzed in this work under conditions of excess of
nitrite. A population of nitrite oxidizing bacteria (NOB) was
developed from nitrifying biomass grown as granules with a
mean diameter of 0.8 mm, whose feed was switched from
ammonium to nitrite. The initial population distribution of
the granules was: 60% Nitrosomonas and 30% Nitrospira and
it evolved to 45% Nitrobacter and 40% Nitrospira measured
177 days after the change in the feeding. …characterized by
being r strategists NOB, are poor competitors when oxygen is
the limiting substrate.
6.3.4 Desnitrificación

Desnitrificación: en este
proceso los nitratos son reducidos a nitrógeno, el
cual se incorpora nuevamente a la atmósfera,
este proceso se produce por la acción catabólica
de los organismos, estos viven en ambientes con
escasez de oxígeno como sedimentos, suelos
profundos, etc. Las bacterias utilizan los nitratos
para sustituir al oxígeno como aceptor final de
los electrones que se desprenden durante la
respiración anaerobia.

http://www.lenntech.es/ciclo-nitrogeno.htm#ixzz0iZqf6LkZ
NO3- NO2- N2O
NO N 2O
Desnitrificación
Microorganismos: Pseudomonas, Bacillus,
Factores: pH, humedad, materia organica,
Impacto ecologico: Perdida de fertilizante,
contaminacion de aire, eliminar N en agua,
degradar eficientemente
Las materias orgánicas etc.
NO3- → NO2- → NH3 (reducción
fermentativa del nitrito):
Enterobacter, Escherichia, Bacillus,
Micrococcus, Vibrio, Clostridium
NO3- → NO2- → NO → N2O → N2
(desnitrificación): Bacillus,
Pseudomonas, Hyphomicrobium,
Spirillum, Moraxella, Thiobacillus
Water Sci Technol. 2010;61(5):1137-46.
Nitrification-denitrification in waste stabilisation ponds: a
mechanism for permanent nitrogen removal in maturation
ponds.
Camargo Valero MA, Read LF, Mara DD, Newton RJ, Curtis TP,
Davenport RJ.

Métodos: A pilot-scale primary maturation pond was

spiked with 15N-labelled ammonia (15NH4Cl) and 15N-
labelled nitrite (Na15NO2), in order to improve current
understanding of the dynamics of inorganic nitrogen
transformations and removal in WSP systems.
…Molecular microbiology analysis showed that
denitrification can be considered a feasible mechanism
for permanent nitrogen removal in WSP
The Leopold elimi-NITE® 2.0
system is the next step in reducing
nutrients in the effluent stream of a
wastewater treatment plant. The
elimi-NITE® 2.0 system builds on
the existing elimi-NITE®
denitrification system by adding
additional features and increased
efficiency as follows:
Feedback control of the carbon
source
Several types of level control
Optimum media selection
Backwash optimization
Run time optimization
 Appl Microbiol Biotechnol (2011) 90:1241–1252
Advances in methods for detection of anaerobic
ammonium oxidizing (anammox) bacteria
Meng Li & Ji-Dong Gu
Anaerobic ammonium oxidation (anammox) is a newly
discovered biochemical pathway involved in the microbial N
cycle that allows coupling between ammonium oxidation with
nitrite reduction under anoxic conditions (van de Graaf et al.
1995).
So far, only five anammox genera have been recognized (Fig. 1),
namely Kuenenia (Schmid et al. 2000; Strous et al. 2006),
Brocadia (Strous et al. 1999; Kartal et al. 2008),
Anammoxoglobus (Kartal et al. 2007b), Jettenia (Quan et al.
2008), and Scalindua (Kuypers et al. 2003; van de Vossenberg et
al. 2008; Hong et al. 2011). Todas son de Planctomycetes.
Table 5. Possible reaction equations of anaerobic ammonium oxidation via NO
or HNO as intermediates, adapted after[12, 14] (Jetten et al. 1998)
NO as intermediate
(ammonia monooxygenase-like
NO+NH3 +3H++3e− →N2H4+H2O
enzyme)
(hydroxylamine oxidoreductase-
N2H4 →N2+4H++4e−
like enzyme)
NO−2+2H++e− →NO+H2O (nitrite reductase)
NH3+NO−2+H+ →N2+2H2O
HNO as intermediate
(ammonia monooxygenase-like
HNO+NH3 →N2H2+H2O
enzyme)
(hydroxylamine oxidoreductase-
N2H2 →N2+2H++2e−
like enzyme)
NO−2+2H++2e− →HNO+OH− (nitrite reductase)
NH3+NO−2 →N2+H2O+OH−
(A) Dividing “Candidatus
Kuenenia stuttgartiensis”
cell. (B) “Candidatus
Anammoxoglobus
propionicus” cell. (C and
D) “Candidatus Brocadia
fulgida” cells showing
riboplasmic particles (pa).
(D) Dividing cell. (E and
F) Dividing “Candidatus
Scalindua spp.” cells with
(E) and without (F) pilus-
like appendages.
Micrographs further show
glycogen (g) and putative
intra-anammoxosome iron
particles (Fe). Scale bars,
200 nm.
6.3.5 Fijación de nitrógeno
Campo principal de mi investigación
 Beijerinck: Beijerinckia
Fijación del Nitrógeno: tres procesos
naturales desempeñan un papel importante en
la fijación del nitrógeno en la biosfera: 1) el
relámpago; 2) Fijación biológica; 3) Fuegos.
Otro artificial: fijación industrial: Alta presión y alta
temperatura

http://www.lenntech.es/ciclo-nitrogeno.htm#ixzz0iZr2dHvA
Figura 3: El aumento
reciente de la fijación
antropogénica N en
relación a la fijación
'natural'.

Modificado de Vitousek,
P. M. and P. A. Matson
(1993). Agriculture, the
global nitrogen cycle, and
trace gas flux. The
Biogeochemistry of
Global Change: Radiative
Trace Gases. R. S.
Oremland. New York,
Chapman and Hall: 193-
208.
Fijacion biologica de nitrogeno

N2 + 16ATP +8e- +8H+

Nitrogenasa 2NH3 + H2 + 16ADP + 16Pi
La reducción de N2 a amonio llevada a cabo
por algunas procariotas en vida libre o en
simbiosis con algunas especies vegetales, de
la familia de las leguminosas y algunas
leñosas no leguminosas, se conoce como
fijación biológica de nitrógeno (FBN).
Caracteristicas: condiciones normales, es
decir presion y temperatura natural.
Nitrogenasa: dos componentes, FeMo-Co,
sensitiva a O2 y a NH4+
 Mecanismo
de
nitrogenasa y
medición de
su actividad
La actividad
de la Nase se
afecta por
oxigeno,
nitrogeno, y
recurso de
energía
Genes de fijación de nitrógeno (nif): en cluster,
transferible, se regulan por O2 y NH4+
6.3.5.1 Fijación biológica de nitrógeno
por bacterias en vida libre
Bacteria Condición de Condición de Mecanismo de
crecimiento fijación de N2 protección de
Nasa
Clostridium
Klebsiella
Azospirillum
Azotobacter
Anabaena

Azorhizobium
Como determinar
Azoarcus que una bacteria fija
Acetobacter diazotrophicus
nitrógeno?
 Hetrocisto: Fijar N2,
A Pared gruesa y no
H produce O2 en
fotosintesis por la
CV falta fotosistema II
6.3.5.2 Simbiótica Con leguminosas

Leguminosa Bacteria
Bradyrhizobium japonicum
Soja
y Sinorhizobium fredii
Rhizobium leguminosarum
Guisante
bv. viciae
Rhizobium leguminosarum
Alubia bv. phaseoli, R. etli y R.
tropici
Rhizobium leguminosarum
Trébol
bv. trifolii
Alfalfa Sinorhizobium meliloti
Medicago truncatula Sinorhizobium meliloti
Las bacterias simbióticas de las leguminosas
Número de Planta de Hospedero
Género (14)
especie (97)
Rhizobium 34
Sinorhizobium 13
Mesorhizobium 21
Bradyrhizobium 10
Azorhizobium 2 Sesbania
Allorhizobium undicola 1 Neptunia natans
Methylobacterium nodulans 1 Crotalaria
Burkholderia 5 Mimosa
Cupriavidus taiwanensis 1 Mimosa spp.
Ochrobactrum 3 Lupinus
Devosia 2 Neptunia natans
Phyllobacterium 2 Trifolium
Shinella kummerowiae 1 Kummerowia stipulacea
Inquilinus nodiradics 1 Caragana spp.
 Diversas
leguminosas

A. Delonix regia
B. Senna alata
C. Bauhinia xerophyta
D. Colvillea racemosa
E. D. regia
F. Dichrostachys cinerea
G. Acacia sp.
H. Mimosa dysocarpa
I. Amorpha fruticosa
J. Clitoria lasciva
K. Erythrina crista-galli
L. Vigna sp.
Sesbania herbacea

Sesbania punicea
Vigna, Vicia, Diversas
Arachis, Glycine etc. leguminosas
A. Pisum sativum
B. Medicago sativa
C. Phaseolus lunatus
D. Lupinus albus
E. P. vulgaris
F y G. Cicer arietinum
H. Lens culinaris
I. Trifolium repens
Abrus precatorius L.
una semilla mata una
persona
Diferentes tipos de los nódulos de las leguminosas
Trébol Chicharro Frijol Sesbania

Nódulos
del tallo de
S. rostrata
 Nódulo con Bacteroides de
R. leguminosarum en trébol
hemoglobina:
transportadora de O2

Los bacteroides de
rizobios en nódulos: con
polimorfismo por la
ausencia de pared
celular, fijador de N2
 Características
• Especificidad
• Capacidad de nodulación: genes nod
• Capacidad de fijar nitrógeno (eficiencia):
genes nif, solo fijar en simbiosis, no en vida
libre.
• Regulación de oxigeno: hemoglobina
• Más eficiencia que la vida libre
 Genes de nodulación: en plásmido
simbiótico o isla simbiótica,
transferible, grande

Organización de genes nod en el plásmido de R.

leguminosarum. El producto de nodD controla la
transcripción de otros genes. nodABC?
Simbiosis de Frankia con no leguminosas: plantas
actinorricicas
Familias Géneros
Betulaceae Alnus
Allocasuarina, Casuarina,
Casuarinaceae
Gymnostoma
Coriariaceae Coriaria
Datiscaceae Datisca
Elaeagnus, Hippophae,
Elaeagnaceae
Shepherdia
Myricaceae Morella, Myrica, Comptonia
Ceanothus, Colletia, Discaria,
Rhamnaceae
Kentrothamnus, Retanilla, Trevoa
Cercocarpus, Chamaebatia,
Rosaceae
Prusia, Dryas
El término "simbiosis actinorrícica"
describe a la simbiosis nodular del
actinomiceto fijador de N2 Frankia con las
raíces de más de 200 especies de plantas
dicotiledóneas, encuadradas en 25 géneros
y 8 familias, conocidas como "plantas
actinorrícicas".
Nódulos actinorricicos
Filamentos
y las
vesículas
(fijadoras
de N2) de
Frankia
Otras simbiosis de fijación
de nitrógeno
También hay algunas asociaciones
simbióticas fijadoras de nitrógeno con
cianobacterias (Nostoc). Incluye algunos:
Líquenes: Lobaria y Peltigera
Azolla (Helecho mosquito)
Cicadas
Gunnera

Aspecto macroscópico de las colonias y

microscópico de Nostoc commune.
 Lobaria

Cicadas?

Cicadas

Cual es la
Cunnera? Azolla
También existe asociación entre bacterias
fijadoras y plantas del tipo gramíneas. En
estos casos la bacteria invade los espacios
entre células de la raíz pero sin penetrar en
las células vegetales, por lo que no se trata
de una verdadera simbiosis. Algunos cultivos
que se pueden beneficiar de este tipo de
asociaciones son:
Caña de azúcar: Acetobacter diazotrophicus
Sorgo: Azospirillum dobereinerae
Arroz: Azoarcus
Trigo: Klebsuella pneumoniae
Johanna Döbereiner
Women Pioneers in Plant Biology

Fijación de nitrógeno de las

bacterias asociadas a las plantas
Comparación de las diferentes fijadoras de
nitrógeno
Bacteria Condición de Condición de Mecanismo de
crecimiento fijación de N2 protección de
Nasa
Clostridium
Klebsiella
Azospirillum
Azotobacter
Anabaena
Rhizobium
Frankia
 Comparación de los diferentes procesos
del ciclo de nitrógeno
Proceso Sustrato/ Condición Oorganismos Impactos
Producto ecológicos
Fijación
Nitrificación
Nitritación
Nitratación
Desnitrificación
Asimilación
Proteólisis
Amonificación