ELEKTROFORESIS

Reyhan Ammar-Wildan Ahmad

2
▸ Elektroforesis adalah teknik pemisahan komponen atau
molekul bermuatan yang ditentukan berdasarkan
perbedaan tingkat migrasinya dalam sebuah medan
listrik. Medan listrik dialirkan pada suatu medium yang
mengandung sampel yang akan dipisahkan.
PENGERTIAN
▸ Prinsip dasar elektroforesis adalah molekul dan partikel
ELEKTRO bermuatan akan bergerak ke arah elektrode yang
FORESIS memiliki muatan berlawanan di bawah pengaruh medan
listrik. Contoh: DNA bermuatan negatif akan menuju
kutub positip.

▸ Hal ini dapat dijelaskan dengan gaya Lorentz yaitu F=qE.

3
▸ Elektroforesis Kertas;
menggunakan kertas sebagai
fase diam (medium), sedangkan
partikel yang biasanya adalah
ion-ion kompleks menjadi fase
gerak.
JENIS ▸ Elektroforesis Gel;
ELEKTRO menggunakan gel sebagai fase
diam (medium) untuk
FORESIS memisahkan molekul-molekul.
4
▸ Dulu, medium gel yang digunakan adalah kanji. Namun
kemudian mengalami perkembangan dengan
menjadikan algarosa sebagai gel media. Algarosa
didapat dari alga merah.
ELEKTROFORESIS
▸ Algarosa mampu memisahkan DNA >100 bp/base pair,
GEL sedangkan untuk memisahkan DNA yang lebih pendek
dapat digunakan gel poliakrilamid.

▸ Fase diam (gel) berfungsi sebagai “filter”/”penyaring”

objek yang akan dipisah. Sering kali ditambahkan larutan
buffer/penyangga untuk menjaga kestabilan objek yang
akan di-elektroforesis.
5
CARA KERJA ELEKTROFORESIS

Zat yang akan dielektroforesis

dimuat pada kolom-kolom (disebut
well atau "sumur") pada sisi
elektrode negatif. Apabila aliran
listrik diberikan, terjadi aliran
elektron dan zat objek akan
bergerak dari elektrode negatif ke
arah sisi elektrode positif.
Kecepatan tiap objek ini berbeda-
beda, tergantung dari muatan dan
massa molekul DNA. Kisi-kisi gel
berfungsi sebagai pemisah. Objek
yang memiliki massa molekul lebih
besar akan lebih lambat berpindah.
Semakin pendek DNA, semakin
besar kecepatannya.
6 ▸ Mengetahui ukuran/panjang fragmen DNA
▸ Pemurnian dan purifikasi DNA
▸ Membandingkan gen homolog dari spesies yang
berbeda
▸ Bermanfaat untuk tes DNA
MANFAAT ▸ Mengetahui ada tidaknya gen-gen penyebab kelainan
DAN APLIKASI genetik tertentu
ELEKTROFO ▸ Mengetahui variasi genetik dalam populasi natural di
RESIS alam
▸ Mengidentifikasi persamaan dan perbedaan genetik
antar individu
Kelemahannya:
▸ Membutuhkan waktu yang lama
▸ Terbatasnya jumlah sampel yang diuji
▸ Kadang-kadang ada pita yang tidak memiliki bentuk
atau pita yang terlampau banyak, sehingga sulit
diidetifikasi