UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO

VILLARREAL
ESCUELA PROFESIONAL DE MEDICINA

CURSO:MICROBIOLOGIA MÉDICA

VIROLOGIA GENERAL

Dr. AMÉRICO LEYVA ROJAS

INTRODUCCIÓN

Los virus son los responsables de numerosas

enfermedades en los seres humanos; como término
medio una persona sufre al año unas cuantas
infecciones víricas y a lo largo de su vida unas 200,
con lo que supone un grave perjuicio económico por
el coste en asistencia médica y medicamentosa, así
como falta de productividad de los pacientes en sus
respectivas ocupaciones.
Los virus de bacterias se llaman bacteriófagos, otros
virus infectan animales y vegetales. Los bacteriófagos
proporcionan a los microbiólogos un modelo para el
estudio de los virus y de la biología molecular.
 VIROLOGÍA GENERAL

Los virus son estructuras subcelulares que

se caracterizan por su pequeño tamaño,
estructura muy elemental y especial
mecanismo de replicación. Son parásitos
¡ntracelulares obligados y sólo se
desarrollan en el interior de células vivas,
de las que dependen para la obtención de
energía y la síntesis de proteínas.
ESTRUCTURA DE LOS VIRUS
Cada partícula viral o virión está constituida por
una molécula de ácido nucleico, rodeada por una
capa de proteínas llamada cápside. Al complejo
ácido nucleicocápside se le denomina
nucleocápside, En la mayoría de los virus, la
nucleocápside está rodeada por una membrana
lipoproteica o envuelta.
El genoma de los virus está constituido por ARN o
ADN, y puede ser de cadena sencilla
(monocatenario) o de doble cadena (bicatenario).
Los virus ADN suelen ser bicatenarios. En los virus
ARN monocatenarios. el ARN puede estar
constituido por la cadena (+), equivalente al ARN
mensajero, o la cadena (-) o complementaría. Los
genomas pueden ser moléculas lineales o
circulaces, únicas o segmentadas en varios
fragmentos.
Cada cápside está compuesta por una serie
de subunidades proteicas repetidas,
denominadas capsómeros, que se disponen
siguiendo patrones simétricos. Cada
capsómero se compone a su vez de varias
moléculas proteicas individuales
denominadas subunidades estructurales o
protómeros. Los capsómeros se disponen
siguiendo fundamentalmente dos patrones
de simetría estructural de la cápside:
icosaédrica y helicoidal. Algunos virus más
grandes como los poxvirus, tienen formas
estructurales complejas.
 CLASIFICACIÓN DE LOS VIRUS

Los principales criterios usados en la

actualidad son: el tipo y estructurad del
ácido nucleico viral, el tipo de simetría de la
cápside, la presencia o ausencia de
envoltura y su estrategia para la
replicación.
 CLASIFICACIÓN DE LOS VIRUS

Familia Estructura del ácido Estructura de la Envoltura Ejemplo

nucleico cápside

Virus ADN
Parvoviridae ADNmc, lineal (+) o (-) Icosaédrica No Parvovirus humano B19
Hepadnaviridae ADNbc, circular Icosaédrica Si Virus de la hepatitis B
Papovaviridae ADNbc, circular Icosaédrica No Virus de los papilomas
Adenoviridae ADNbc, lineal Icosaédrica No Adenovirus humanos
Herpesviridae ADNbc, lineal Icosaédrica Si Herpes simple;
citomegalovirus
Poxiviridae ADNbc, lineal Compleja Si Virus de la viruela
Virus ARN
Picorhaviridae ARNmc, lineal (+) Icosaédrica No Poliovirus
Caliciviridae ARNmc, lineal (+) Icosaédrica No Virus de la hepatitis E
Filoviridae ARNmc, lineal (+) Helicoidal Si Virus de Ebola
Flaviviridae ARNmc, lineal (+) Desconocida Si Virus de la hepatitis C
Togaviridae ARNmc, lineal (+) Icosaédrica Si Virus de la rubéola
Coronaviridae ARNmc, lineal (+) Helicoidal Si Coronavirus
Rhabdovaridae ARNmc, lineal (+) Helicoidal Si Virus de la rabia
Paramyxoviriae ARNmc, lineal (+) Helicoidal Si Virus del sarampión
Orthomixoviridae ARNmc, lineal (-) Helicoidal Si Virus de la gripe
segmentado
Bunyaviridae ARNmc, lineal (-) Helicoidal Si Encefalitis de California
segmentado
Arenaviríiae ARNmc, lineal (-) Helicoidal Si Virus de Lassa
segmentado
Retroviridae ARNmc, lineal (+) Icosaédrica Si VIH
diploide
Reoviridae ARNbc, lineal Icosaédrica No Rotavirus
segmento
 REPLICACION VIRAL

Las estrategias de replicación varían dependiendo de la

estructura del virus y del tipo de material genómico,
pero, a grandes rasgos, los pasos de la replicación viral
incluyen la infección de la célula susceptible, la síntesis
del ácido nucleico y las proteínas, y el ensamblaje y
liberación de los nuevos viriones.
1. Adsorción.
2. Penetración
3. Descapsidación
4. Síntesis macromolecular
5. Esta fase se lleva a cabo de formas diferentes en los
distintos virus, según sea la estructura de su
genoma.
 VIROIDES Y PRIONES
Existen dos clases de agentes infecciosos
estructuralmente más simples que los virus: los
viroides y los priones. Los viroides son moléculas
circulares de ARN de bajo peso molecular que
carecen de cubierta proteica. Hasta el momento
sólo han demostrado ser causantes de enfermedad
en/ las plantas. '
Los priones son partículas infecciosas de naturaleza
proteica que no parecen estar asociadas a ácidos
nucleicos, y. que tienen las propiedades físicas y
químicas de aquellas. Estos agentes infecciosos
son pequeños y filtrables, con diámetros de 5 nm o
menos; son resistentes a la mayoría de los
procesos físicos y químicos que inactivan a los
ácidos nucleicos y no producen respuesta inmune
o inflamatoria en el huésped.
Se les considera causantes de algunas
enfermedades neurológicas graves como la
encefalopatía de Creutzfeld-Jakob y el Kuru.
El marcador bioquímico específico de estas
enfermedades es la acumulación en el
cerebro de una forma anormal de la
proteína príon (Prp). Se ha sugerido que
Prp se encontraría codificada en el ácido
nucleico de la célula huésped y bajo la
influencia de factores desconocidos sufriría
un cambio conformacional causante de su
acumulación patológica.
 BACTERIÓFAGOS O FAGOS

Son virus parásitos de las bacterias. Como todos los

virus están constituidos por una molécula de ácido
nucleico (ADN o ARN) rodeada de una cápside proteica.
En el interior de la bacteria parasítada, los fagos
pueden seguir dos tipos de ciclos (Utico y lísogénico)
que van a tener diferentes consecuencias para la
bacteria:
- Ciclo lítico o productivo. Lo producen los llamados
virus vegetativos o Virulentos. Tras inyectar el ácido
nucleico en el interior de la bacteria, se multiplican
en el citoplasma y liberan nuevos virus por lisis de la
bacteria.
- Ciclo lisogénico. Producido por los fagos
atemperados o atenuados.
APLICACIONES PRACTICAS:
En la actualidad, se ha demostrado la
existencia de fagos activos frente a la mayoría
de las especies bacterianas. En algunos casos,
un fago específico puede ser empleado para
identificar una especie bacteriana, como
suecede con el fago IV de Mujerkee, que
permite diferenciar Vibrio cholerae (sensible a
este fago) de V. eltor (resistente).
Además, dentro de una especie, las bacterias
pueden presentar receptores específicos para
distintos fagos. En este hecho se basa la
lisotipia, fagotipia o upado bacteriofágico, que
permite la clasificación de una especie
bacteriana en distintos_tipos, según su
comportamiento frente a diversos fagos.
 LOS VIRUS
HISTORIA
• Antes de que en el siglo XIX se descubriese que las bacterias
causan enfermedades, el término VIRUS, una palabra latina
que significa «VENENO» o «FLUIDO PONZOÑOSO» se utilizaba
para describir cualquier sustancia causante de enfermedad.
Posteriormente, este término se utilizó con frecuencia para
describir agentes microbianos causantes de enfermedad. En el
siglo XX el término adquirió significado nuevo y más
específico. Actualmente designa un gran grupo de agentes
causantes de enfermedades que son fundamentalmente
diferentes de todas las formas celulares de vida; los virus son
ácidos nucleicos infectivos encapsulados en una cubierta de
proteína. Pueden poseer membranas pero no tienen ni
citoplasma ni metabolismo propio. Por lo tanto, deben
penetrar en las células hospedadoras en donde su ácido
nucleico dirige la replicación de los componentes
macromoleculares del virus, que luego se ensamblan dando
nuevos virus.
 DESCUBRIMIENTO DE LOS
VIRUS (1)
• Los virus fueron descubiertos en el siglo XIX, unos
cincuenta años antes del desarrollo del microscopio
electrónico, único instrumento capaz de ofrecer una
imagen visible de tan diminutos objetos. En
consecuencia, los virus no fueron descubiertos en el
mismo sentido en que lo fueron las bacterias cuando
Leeuwenhoek las vio por primera vez. Más bien, su
existencia y propiedades fueron deducidas a partir de los
resultados de experimentos realizados por un pequeño
número de científicos: ningún individuo merece el
reconocimiento exclusivo por su descubrimiento. Las
primeras demostraciones de que las enfermedades
víricas podían ser transmitidas de un hospedador a otro
bajo condiciones controladas de laboratorio fueron
publicadas por L. Pasteur en 1884, en estudios sobre la
rabia, y por A. Mayer en 1886, en estudios sobre la
enfermedad llamada mosaico de las plantas de tabaco.
 DESCUBRIMIENTO DE LOS
VIRUS (2)
Sin embargo, la naturaleza de los agentes causantes de estas
enfermedades infecciosas no fue claramente establecida por
sus experimentos, por que ninguno de estos virus podía ser
cultivado en cultivo puro utilizando los métodos disponibles en
aquella época. En 1892, Ivanowsky, mediante un experimento
sencillo, estableció que el agente causante del mosaico del
tabaco es más pequeño que cualquiera de las bacterias
conocidas. Hizo pasar un estracto de hojas enfermas a través
de un filtro de procelana con poros suficientemente finos como
para bloquear el paso de la mayoría de las bacterias y
demostró que el filtrado continuaba siendo altamente infectivo.
Como resultado de este experimento, a los agentes infecciosos
que podían pasar a través de filtros finos se los conoció como
“virus filtrables”
 DESCUBRIMIENTO DE LOS
VIRUS (3)
En 1895 M. Beijerinck estableció que los virus poseen la
propiedad de replicarse, común a todos los seres vivos, al
demostrar que el virus del mosaico del tabaco (TMV), el
virus que causa la enfermedad mosaico del tabaco, prolifera
en el tejido infectado. El mismo año, F. Loeffler y P. Frosch
mostraron que el agente filtrable de la enfermedad llamada
glosopeda, prolifera en el ganado. Posteriormente, Beijerinck
estableció que el TMV prolifera solamente en tejido vegetal
en crecimiento, observación que le condujo a la correcta
conclusión de que la proliferación del virus es intracelular y
dependiente del metabolismo activo de las células
hospedadoras.
 DESCUBRIMIENTO DE LOS
VIRUS (4)
En 1915 y 1917, respectivamente, F. T wort y F. d´Hérelle,
independientemente, descubrieron que algunos virus
denominados bacteriófagos (es decir «comedores de
bacterias»), o simplemente fagos, infectan las bacterias. Por
lo tanto, los tres grupos principales de organismos animales,
vegetales y bacterias son susceptibles a la enfermedad
vírica.
Durante varias décadas después de su descubrimiento, los
virus fueron reconocidos por tres propiedades.
 DESCUBRIMIENTO DE LOS
VIRUS (5)
1. Son agentes infecciosos de enfermedades.
2. Son muy pequeños, y por ello invisibles con el
microscopio óptico y capaces de pasar a través de los
filtros que retienen la mayoría de las bacterias, y
3. No proliferan en los me- ; dios de cultivo preparados para
soportar el crecimiento de las bacterias. Aunque estas
propiedades separan a los virus de la mayoría de las
bacterias, son criterios insuficientes para distinguir todas
las bacterias de los virus.
 EVOLUCION (1)
• Durante varias décadas después de su
descubrimiento, los virus fueron reconocidos por
tres propiedades: (1) son agentes infecciosos de
enfermedades, (2) son muy pequeños, y por ello
invisibles con el microscopio óptico y capaces de
pasar a través de los filtros que retienen la mayoría
de las bacterias, y (3) no proliferan en los medios
de cultivo preparados para soportar el crecimiento
de las bacterias. Aunque estas propiedades separan
a los virus de la mayoría de las bacterias, son
criterios insuficientes para distinguir todas las
bacterias de los virus.
 EVOLUCION (2)
• En 1935, W. Stanley demostró la notable
simplicidad química del virus vegetal TMV:
cristalizó el virus y luego demostró que está
compuesto principalmente de proteína. Luego,
otros científicos vieron que aquellos cristales
contienen también una pequeña fracción, pero
constante de RNA. Estudios químicos realizados
con otros virus mostraron que algunos
contienen DNA además de proteínas, pero no se
ha encontrado ningún virus que contenga DNA y
RNA a la vez. Además de ácido nucleico,
algunos virus contienen lípido y algunos poseen
pequeñas cantidades de carbohidrato conjugado
con sus componentes protéicos.
 LOS VIRUS

 A fines del siglo pasado se cumplieron algo más

de cien años del aislamiento del primer agente
infeccioso que fuera bautizado con el nombre de
virus. Nombre genérico que fue luego aplicado a
cada agente transmisible capaz de atravesar los
filtros que retenían a las bacterias. De ese hecho
surgió el nombre de virus filtrables, con el que
se los conoció originariamente. Con el transcurso
del tiempo perdieron el aditamiento de filtrables,
dado que esta propiedad no es exclusiva de los
virus. En cambio surgió claramente la noción de
su parasitismo absoluto, ya que no se reproducen
fuera de una célula viva.
 Los virus están ampliamente distribuidos en la
naturaleza, afectando a los organismos de los
reinos animal y vegetal, protistas, hongos y
virus. Incapaces de vida independiente.
 Han sido aislados de plantas superiores, algas,
hongos, bacterias, protozoarios, invertebrados,
anfibios, reptiles, peces,. aves y mamíferos.
Debido a su capacidad para producir enfermedad,
son causa de epidemias severas en el hombre y/o
en los animales, ocasionando graves problemas
de salud pública y cuantiosas pérdidas
económicas, cuando afectan al ganado o a las
plantas que se utilizan como alimento.
 DEFINICIONES DE VIRUS
1. Los virus son partículas elementales con vida y
línea germinal propia, formados por un solo tipo
de ácido nucleico y proteínas (glico y/o lipo).
2. Son parásitos absolutos y agentes infecciosos
generalmente causantes de enfermedad.
3. Unidades infecciosas que contienen RNA o DNA
encerrado en una cubierta protectora.
4. Unidades infecciosas con independencia
genética que contienen RNA o DNA como
genoma asociado a macromoléculas,
fundamentalmente polipéptidos, que definen su
estructura y capacidad de asociarse a la célula
que infectan.
5. Son sistemas bioquímicos complejos.
 También las hay más simples o ingeniosas
como:
a) Un virus es un paquete proteico o
liproteico de ácido nucleico genómico.
b) Un virus es un virus (Lwoff).
c) Los virus son las víctimas de la ignorancia
a las que se les atribuye ser la causa de
cualquier enfermedad.
 Queda como un ejercicio individual elegir
aquella definición que más se adapte a la
imagen mental evocada por la palabra virus.
Eso sí, no hay que olvidar que la elegida debe
diferenciarlos claramente de otros
microorganismos o agentes infecciosos.
PROPIEDADES GENERALES DE LOS VIRUS

Los virus son los agentes infecciosos más pequeños hasta ahora
conocidos. Casi todas las formas de vida (animales, plantas y bacterias)
son susceptibles de ser infectados por determinados virus.

Son tres las principales propiedades que diferencian a los virus de otros
microorganismos:

1. Pequeño tamaño. Los virus son más pequeños que otros

organismos, oscilando su tamaño entre los 10 y los 300 nm, a diferencia
de las bacterias, que tienen un diámetro aproximado de 1.000 nm o de
los eritrocitos, con 7.500 nm.

2. Genoma. El genoma vírico puede ser DNA o RNA; los virus poseen un
único tipo de ácido nucleico.

3. Metabólicamente inertes. Carecen de actividad metabólica fuera de

la célula huésped; no poseen ribosomas ni otro tipo de estructura de
síntesis proteica, si bien algunos encierran en su partícula uno o más
enzimas; por todo ello, los virus no pueden multiplicarse en medios
inanimados, sino sólo en el interior de células vivas. Sin embargo, una
vez dentro de la célula el ácido nucleico (genoma vírico) es capaz de
replicar nuevas partículas víricas.
ESTRUCTURAS MORFOLÓGICAS
a) b)
ESTRUCTURAS ULTRAMICROSCÓPICAS

Virus DNA:

Virus RNA:
ESTUCTURA DE UN VIRION.
SU ACTIVIDAD BIOLÓGICA

Nucleocapside
•Información genética
ADN
Nucleoide ó •Infectividad
ARN
•Protección del nucleoide
Cápside Proteínas
•Unión a receptores celulares
•Determinantes antigénicos

•Protección del nucleide

Envoltura Lipoproteínas •Unión a receptores celulares
•Determinantes antigénicos
en glicoproteínas
 COMPARACIÓN DE VIRUS
Y CÉLULAS
Propiedad Virus Célula
Tipo de ácido DNA o RNA, pero no DNA y RNA
nucleico los dos
Proteinas Algunas Numerosas
Membrana Envoltura presente en Membrana celular
lipoproteínica algunos virus. presente en todas las
células.
Ribosomas Ausentes* Presentes
Mitocondrias Ausentes Presentes en células
eucariontes
Enzimas Ninguna o unas Numerosas
cuantas
Multiplicación por No Si (la mayoría de las
fisión binaria células)

Las arenavirus tienen algunos ribosomas no funcionales

 DIFERENCIAS ENTRE VIRUS. BACTERIAS,
MICOPLASMAS, CLAMIDIAS Y RICKETTSIAS

Virus Rickettsias Clamidias Micoplas Bacterias

mas
Acidos nucleico ADN o ARN Ambos Ambos Ambos Ambos
Fisión binaria No + + + +
Enzimas No + - + +
metenergético
Ribosomas No* + + + +
Replicación en No No No + +
medios inertes
Tamaño 20-300 um 1 um 300 um 250 um. 0.7 – 10 um

•Algunos virus poseen ribosomas de origen celular. Por ejemplo arenavirus.

SU PARASITISMO (1)
Ya hemos hecho referencia que no hay organismo
viviente que no pueda ser atacado por un virus
desde el exterior.
Por otra parte, existen virus endógenos que se
transmiten en las líneas germinales.
El parasitismo de los virus se ejerce a nivel
genético: el genoma viral dentro de la célula
transforma la capacidad potencial de información
que tiene el virión en activa función bioquímica
utilizando la energía, los caminos metabólicos y,
fundamentalmente, el aparato de síntesis de
proteínas que posee la célula, de forma de producir
réplicas de sus elementos constitutivos.
SU PARASITISMO (2)
Ya hemos hecho referencia que no hay organismo
viviente que no pueda ser atacado por un virus
desde el exterior.
Por otra parte, existen virus endógenos que se
transmiten en las líneas germinales.
El parasitismo de los virus se ejerce a nivel
genético: el genoma viral dentro de la célula
transforma la capacidad potencial de información
que tiene el virión en activa función bioquímica
utilizando la energía, los caminos metabólicos y,
fundamentalmente, el aparato de síntesis de
proteínas que posee la célula, de forma de producir
réplicas de sus elementos constitutivos.
 BASES BIOGENÉTICAS
a) En la siguiente discusión se presentan las bases biológicas y
genéticas de estos fenómenos, con particular atención a tres
temas.
1. Los distintos virus tienen estructura genética muy diferente y esta
diversidad se refleja en sus procedimientos de replicación.
2. Por su tamaño pequeño, los virus han logrado un grado muy alto
de economía genética.
3. Los virus dependen en buena medida de las funciones de la célula
huésped y por lo tanto son difíciles de combatir en el campo
médico. Sin embargo, presentan pasos singulares en sus ciclos de
replicación que constituyen blancos potenciales para la terapia
antiviral.
La ventaja de la construcción de la partícula viral a partir de
subunidades proteínica idénticas es doble: 1) reduce la necesidad
de información genética y 2) favorece el autoensamblaje; es decir,
no se requieren enzimas ni energía. De hecho, se han acoplado
partículas virales funcionales en un tubo de ensayo mediante la
combinación de ácido nucleico purificado con proteínas también
purificadas, en ausencia de células, fuente energética y enzimas.
 LOS VIRUS COMO AGENTES DE
ENFERMEDAD
 La razón básica por la cual un virus puede causar
daño radica en su parasitismo intracelular
obligado. Así la enfermedad que originan en un
organismo es el resultado de la infección de las
células individuales, y los síntomas y signos
producidos representan la suma del daño celular
que alcanza diversos niveles.
 Sin embargo, es importante considerar que la
patogénesis viral es una situación rara y anormal.
La mayoría de las infecciones virales son
silenciosas y no resultan en signos evidentes de
enfermedad. Es mucho más conveniente para el
virus no dañar a su huésped en especial, no
matarlo.
Características de los Virus y otros Agentes

Agente Acido Cápside envoltura Agente

nucleico patógeno
Virus DNA o RNA SI SI o NO SI

Viroide RNA NO NO SI

Virusoide RNA NO NO SI

Prión ¿NO? Part. Prot. NO SI

EFECTOS DEL VIRUS EN LA CÉLULA

Los virus pueden afectar a las células de tres

maneras:
Muerte celular. La infección es letal y mata a la
célula causando un efecto citopático (ECP).
Transformación celular. La célula no muere,
pero es transformada en otra con caracteres de
malignida (célula cancerosa).
Infección latente. El virus permanece en el
interior de la célula en estado de actividad
potencial, pero n produce efecto detectable sobre
su función.
 ETAPAS DEL CICLO DE CRECIMIENTO
VIRAL
Adherencia y penetración por el virión precursor

Desnudamiento del genoma viral

Síntesis* de mRNA temprano**

Síntesis de proteína viral temprana Replicación del genoma viral

Síntesis de mRNA viral tardío

Síntesis de proteína viral tardío

Síntesis de proteína viral tardío

Ensamblaje de la progenie viral

Liberación de viriones de la célula

* En algunos casos, el genoma viral es fundamentalmente equivalente al mRNA; por tanto, no se

requiere síntesis temprana de mRNA.
** Temprano se define como el periodo anterior a la replicación del genoma. No todos los virus
muestran una distinción entre funciones tempranas y tardías. En general, las proteínas tempranas
son enzimas, en tanto que las tardías son componentes estructurales del virus.
INVASION E INFECCION POR VIRUS
Ejemplo de receptores virales:
Virus Receptor Función celular
Influenza A Acido siálico Glucoproteína
Reovirus Ácido siálico Glucoproteína
Adenovirus Receptor EGF Señalización .
Epstein-Barr Integrina.s Enlace con la matriz extracelular
Herpes simple CR2 Receptor de complemento
Herpes humano 7 Sulfato de heparina Glucoproteína
HIV CD4 Superfamilia de las inmunoglobulinas.
Coronavirus humano CD4 Superfamilia de las inmunoglobulinas
Rinovirus humano CXCR4 y CCR5 Quimiocinas receptoras
Sarampión Aminopeptidasa N Proteasa
Virus de la polio ICAM-1 Superfamilia de las inmunoglobulinas
Virus de la rabia CD46 Regulación de complemento
SV40 PVR Superfamilia de las inmunoglobulinas
Vaccinio Receptor de acetilcolina Señalización
MHC I Superfamilia de las inmunoglobulinas :
Receptor EGF Señalización
Abreviaturas. EQF. factor de crecimiento endotelial; HIV. Virus de inmunodeficiencia humana: ICAM,
molécula de adhesión intercelular; MHC. complejo mayor de histocompatibilidad; PVR, receptor del
virus de la polio.
TÉCNICAS EMPLEADAS EN EL
DIAGNÓSTICO VÍRICO
1. Técnicas microscópicas:
* Microscopio óptico. Para observación del efecto
citopático de los virus sobre cultivos celulares,
• Microscopio electrónico.
2. Técnicas de cultivo y aislamiento de virus:
• Técnicas de inoculación en animales de laboratorio.
• Técnicas de inoculación en embrión de pollo.
• Técnicas de cultivo celular.
3. Técnicas inmunológicas:
* Reacción de fijación del complemento.
* Método RIA.
* Método ELISA.
* Hemaglutinación e inhibición de la hemaglutinación.
* Determinación de la inmunoglobulina M.
* Reacciones de neutralización.
* Diagnostico Molecular; ……..
 CULTIVO DE LOS VIRUS

 El cultivo de virus es un prerrequisito

esencial para su estudio. Generalmente no
se utiliza al huésped natural, sino que se
recurre a animales de laboratorio o a
cultivos de células in vitro. La multiplicación
de los virus en ambos sistemas permite el
desarrollo de distintos aspectos virológicos:
aislamiento, identificación, multiplicación,
cuantificación y determinación de las
propiedades biológicas, bioquímicas y
serológicas.
 CULTIVO DE CÉLULAS
(HISTOCULTIVO)
 Durante la primera mitad del siglo pasado
predominaba el misticismo en el desarrollo de
cultivos de células in vitro. El éxito dependía de
condiciones experimentales muy precisas. Por
mucho tiempo sólo se lograba el crecimiento de
células de cortes de tejidos extirpados de
animales y mantenidos en coágulos formados
por extractos de esos tejidos y plasma o suero
del mismo animal. Las contaminaciones
bacterianas impedían una continuidad en el
crecimiento.
EMBRIÓN DE POLLO
Antes de la generalización del
cultivo tisular se utilizaron
abundantemente los huevos
fértiles de gallina. En la
actualidad este procedimiento
ha perdido vigencia al quedar
reemplazado por el aislamiento
del virus mediante el citado
cultivo tisular.
Existen tres vías principales de
inoculación
Esquema de embrión de pollo, que muestra las vías de inoculación para el
aislamiento vírico.
1. En el interior de la membrana corioalantoidea.
2. En la cavidad amniótica.
3. En la cavidad alantoidea.
Se utilizan embriones comprendido entre los 7 y los 12 días; la edad óptima
para cada vía de inoculación depende del desarrollo de los distintos tejidos; así,
por ejemplo, la cavidad amniótica tiene su máximo a los 10 ó 12 días.
Sitios potenciales para
quimioterapia antiviral
Sitio de acción
Acciones tempranas (entrada o
desnudamiento del virus)
Síntesis de ácido nucleico por DNA y RNA
polimerasas virales
Otras enzimas específicas de virus
Síntesis de proteinas dirigida de virus
Escisión de polipéptidos precursores
Ensamblaje de partícula, incluyendo la
proteína de la matriz.
Liberación de la partícula por germinación.
Medicamentos eficaces
Amantadita, rimantadina
Aciclovir, ganciclovir, vidarabina,
idoxuridina, trifluridina, foscarnet,
azidotimida, dideoxiinosina,.
Didesoxicitidina y ribavirina
En investigación
Interferón y metisazona
Fase experimental
En investigación
Manipulación genética
 RESUMEN DE AGENTES ANTIVIRALES:

Mecanismo de acción Agente antiviral Espectro vial

Inhibición del descubrimiento y Amantadina Flu A
penetración virales Rimantadina Flu A
Inhibición de neuraminidasa Oseltamivir Flu A, Flu B
Zanamivir Flu A, Flu B
Inhibición de polimerasa de DNA Aciclovir HSV, VZV
viral Fanciclovir HSV, VZV
Penciclovir HSV
Valaciclovir HSV, VZV
Ganciclovir CMV, HSV, VZV
Foscarnet CMV, HSV resistente
Cidofovir CMV
Trifluridina HSV, VZV
 Mecanismo de acción Agente antiviral Espectro vial

Inhibición de transcriptasa Cidovudina HIV

inversa viral Didesoxiinosina HIV
Didesoxicitidina HIV
Estavudina HIV
Lamivudina HIV, HBVb
Nevirapina HIV
Delavirdina HIV
Efavirenz HIV
Inhibición de proteasa viral Saquinavir HIV
Indinavir HIV
Ritonavir HIV
Nelfinavir HIV
Lopinavir HIV
Inhibición de síntesis proteica Interferón a HBV, HCV, HPV
Inhibición de polimerasa de Ribavirina RSV, HCVb, fiebre de
RNA Lassa
Inhibición antisentido de síntesis Fomivirsén CMV
de mRNA viral
 TIPOS DE ENFERMEDADES VIRALES
Basándose en aspectos clínicos, podemos dividir de la siguiente manera :
a) INFECCIONES LOCALES .- Aquí las lesiones celulares y la multiplicación
del virus solo afectan el foco inicial, el virus puede afectar primero una
célula y luego pasar de una célula a otra.
b) INFECCIONES OCULTAS .- Pueden ocurrir muchas infecciones, de tipo
tanto citolítico como de estado estable, sin que aparezca síntomas. Estas
infecciones son importantes en medicina, pues confieren inmunidad sin
enfermedad clínica, se explican por la naturaleza del virus o el estado
inmunológico del huésped
c) INFECCIONES CON VIRUS LENTOS .- Se pueden definir como un grupo
de entidades que "crecen provocar por virus para loe cuales los periodos de
incubación son muy largos y las expresiones clínicas de tipo patológico son
de progresión relativamente lenta. El signo principal de estas infecciones es
la presencia de un agente viral oxenoma en un huésped que, en última
instancia, sufre lesiones celulares y tisulares por efecto del virus, así las
respuestas inmunológicas en el huésped que normalmente son eficaces para
eliminar los virus comentes no son estimuladas o resultan inoperantes,
además, en algunos casos puede producir verdadera lesión celular y tisular
a consecuencia de la propia respuesta inmune, tales infecciones por virus
lentos se han observado en el hombre y en los animales.
 ALTERACIONES INDUCIDAS
EN LAS CÉLULAS HUÉSPED

 La multiplicación de los virus en cultivos de células

puede comprobarse por procedimientos
bioquímicos o serológicos que indican el
incremento de macromoléculas virales, como
enzimas o antígenos, o de partículas virales. Sin
embargo, para los cultivos que crecen adheridos a
un soporte, los métodos usados son más sencillos
y consisten en la evaluación de alteraciones
morfológicas de las células, modificación de sus
membranas (hemadsorción) o por fenómenos de
interferencia viral.
 EFECTO CITOPÁTICO (CPA):

 La mayoría de los virus producen alteraciones en

las células donde multiplican, de modo tal que
los cultivos infectados desarrollan con el
transcurso del tiempo cambios en su morfología,
que ponen en evidencia la acción ejercida por el
virus sobre la célula. Dichas alteraciones se
conocen con el nombre de acción o efecto
citopático (ACP), siendo características de cada
sistema virus-célula. Asimismo, los virus
responsables de esos cambios son llamados
citopatogénicos.
 Las alteraciones que generalmente se observan son:
a) Destrucción de la monocapa; con
redondeamiento y desprendimiento de las células
debido a la muerte provocada por el virus.
b) Formación de células multinucleadas;
llamadas sincicios o policariocitos.
c) Desarrollo de cuerpos de inclusión;
agrupaciones de macromoléculas virales que se
observan en el citoplasma o en el núcleo, donde el
virus de rabia genera los corpúsculos de Negri.
d) Transformación; el cultivo infectado presenta
focos de células que crecen en varios planos, los
que inducen tumores al ser inoculados en
animales.
 Los descubrimientos que posibilitaron simplificar el
cultivo de células fueron:
a) El uso de antibióticos para prevenir la
contaminación bacteriana.
b) La eficacia de la tripsina, una enzima
proteolítica que permite disociar las masas de
tejido en sus células individuales.
c) EL desarrollo realizado por Eagle de medios
definidos que permiten el crecimiento de
muchos cultivos celulares.
UBICACIÓN DE LOS VIRUS EN
RELACIÓN A OTROS AGENTES

RICKETTSIAS

CLAMIDIAS

VIRUS

VIROIDES VIRUSOIDES

PLASMIDOS Y EPISOMAS

TRANSPOSONES

ELEMENTOS DE INSERCIÓN
 CONCLUSIONES
PASADO, PRESENTE Y FUTURO DE LA
VIROLOGÍA
 La virología como toda ciencia biológica experimental
se ha visto beneficiada por la aplicación de las
técnicas moleculares que enseña la ingeniería
genética. Así es como en los últimos años se ha ido
develando la intricada relación del virus con la célula
que parasita, en especial, la exquisita regulación de
los genes virales, que deviene en la producción de
nuevos virus. Este conocimiento ha permitido, por
ejemplo, la síntesis de moléculas antivirales que
bloquean en forma específica pasos de la replicación,
sin afectar al huésped.
 Dentro de este contexto, los virus no sólo han sido y
son responsables de muchas enfermedades, sino que
fueron las herramientas útiles que permitieron el
desarrollo de las técnicas moleculares, las que a su
vez sirven para su estudio.
 Dentro del campo de la virología médica, dichas
técnicas se aplican en el diagnostico virológico en
estudios de patogenia, análisis epidemiológico, en
la producción de vacunas. A la vez han permitido
rastrear, en muchos casos, al agente responsable
de infecciones emergentes.
 Los libros y los artículos que tratan sobre los
virus se han enriquecido en nuevas terminologías
(muchas de las cuales ni siquiera se han
traducido), que reflejan el uso generalizado de
las técnicas moleculares.
 El estudiante de ciencias médicas debe realizar
un esfuerzo para adquirir los conocimientos
básicos que le permitan la cabal comprensión de
algunas expresiones, como hibridación molecular,
sondas genéticas, expresión de genes en
organismos inferiores, transcripción reversa,
reacción en cadena de la polimerasa y muchas
otras.
 PASADO, PRESENTE Y FUTURO (1)
La virología como toda ciencia biológica experimental se ha visto
beneficiada por la aplicación de las técnicas moleculares que
enseña la ingeniería genética. Así es como en los últimos años se
ha ido develando la intricada relación del virus con la célula que
parásita, en especial, la exquisita regulación de los genes virales,
que deviene en la producción de nuevos -virus. Este conocimiento
ha permitido, por ejemplo, la síntesis de moléculas antivirales
que bloquean en forma específica pasos de la replicación, sin
afectar al huésped.
Dentro de este contexto, los virus no sólo han sido y son
responsables de muchas enfermedades, sino que fueron las
herramientas útiles que permitieron el desarrollo de las técnicas
moleculares, las que a su vez sirven para su estudio.
Dentro del campo de la virología médica, dichas técnicas se
aplican en el diagnóstico virológico en estudios de patogenia,
análisis epidemiológico, en la producción de vacunas. A la vez
han permitido rastrear, en muchos casos, al agente responsable
de infecciones emergentes.
 PASADO, PRESENTE Y FUTURO (2)
Los libros y los artículos que tratan sobre los virus se han
enriquecido en nuevas terminologías (muchas de las cuales ni
siquiera se han traducido), que reflejan el uso generalizado de las
técnicas moleculares.
El estudiante de ciencias médicas debe realizar un esfuerzo para
adquirir los conocimientos básicos que le permitan la cabal
comprensión de algunas expresiones, como hibridación molecular,
sondas genéticas, expresión de genes en organismos inferiores,
transcripción reversa, reacción en cadena de la polimersa y muchas
otras.
El diagnóstico, tratamiento y curación de las enfermedades virales
demanda un conocimiento moderno e las técnicas de diagnóstico y
de la forma de producción de inmunógenos.
Los estudiantes deben sentirse gratificados de poder acceder a estos
conocimientos durante su período de formación, privilegio que tienen
respecto de los futuros colegas, ya mayores.
El estudio de los virus es una puerta de ingreso al fascinante mundo
de la ciencia del presente, nada más que por eso, la aventura debe
ser bien aprovechada.