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AUTOMATIZADO
R1. RUDDY J. VASQUEZ SAENZ
PRINCIPIOS DE ANÁLISIS
6 CANALES DE CONTEO
1. IMPEDANCIA ELÉCTRICA: RBC/PLT
PRINCIPIO DE COULTER
Utiliza la propiedad de las células (leucocitos, hematíes y plaquetas)
de ser malas conductoras de la electricidad.
Uno de los reactivos usados en el contador es una solución
isotónica (NaCl 0.9%), sin partículas y conductora de la electricidad.
La sangre diluida en ese reactivo, hace que se produzca un aumento
de la resistencia eléctrica
Ante el paso de un elemento, que corta la corriente eléctrica se
genera un pulso eléctrico medido por el software del equipo. De
esta forma se obtiene:
- recuento de glóbulos rojos
- recuento de plaquetas
- recuento de glóbulos blancos, y su diferenciación en sub-
poblaciones según el tamaño del elemento (fórmula leucocitaria)
- Se visualizan gráficos de distribución de frecuencias (histogramas).
1. IMPEDANCIA ELÉCTRICA: RBC/PLT
C A
B
Células
sanguín
eas
Apertu
ra
Región
crítica
Señal Señal Señal
A B C
1. IMPEDANCIA ELÉCTRICA: RBC/PLT
CLASIFICACION DE LOS IMPULSOS ELECTRICOS GENERADOS POR RBC Y PLT.
PLT * MPV
PCT =
10000
MPV PDW
B. HISTOGRAMA DE PLAQUETAS
Un gráfico que siga la línea roja debe interpretarse como posible agregación plaquetaria o con
un aumento en el número de plaquetas grandes, fragmentos celulares (membranas de glóbulos
rojos)
Un gráfico que siga la línea verde debe interpretarse como interferencia producida por
microcitosis marcada, glóbulos rojos de menos de 30 fl.(recordar que tanto plaquetas como
glóbulos rojos se miden por impedancia en una misma cámara y de manera simultánea.)
Porcentaje de plaquetas de tamaño grande
(P – LCR)
Se refiere a la proporción de plaquetas que tienen un volumen superior a 12 Fl.
El valor de referencia para el porcentaje de plaquetas de tamaño grande es de 17,5% a 42,3% en
mujeres y de 18,5% a 42,3% en hombres
A= K X C X L
MEDICION DE WBC
TECNOLOGIA DE ANALISIS SF CUBE:
INCLUYE:
- DIFERENCIAL WBC
- RETICULOCITOS
- NRBC
En donde después de la reacción con reactivos patentados se someten a un análisis de 3D,
utilizando la información de la dispersión de la luz láser en 2 ángulos y señales de
fluorescencia.
El diagrama de dispersión 3D permite identificar y diferenciar mejor las poblaciones de células
sanguíneas, sobre todo detectar células anómalas.
5 Diff.
TECNOLOGÍA SF CUBO
Colorante fluorescente
INFORMACION ADN/ARN
Reticulocitos inmaduros
Canal WBC DIFF
Canal WBC DIFF
Canal WBC DIFF
Baso/WBC Channel
Baso/WBC Channel
Baso/WBC Channel
Canal NRBC
Canal NRBC
Canal NRBC
Canal RET
Canal RET
Canal RET
Principios de Análisis – Canal RET
Tecnología Avanzada
WBC 5-diff technology
WBC Tecnología
Citometría de Flujo
Celulas inyectadas en una
cámara de flujo que esta localizado
en el paso óptico de una fuente de
luz, usualmente un laser.
La cámara de flujo contiene un
líquido que fluye rapidamente : el
fluido envolvente que lleva la
muestra a alta velocidad por el paso
de luz.
Las células mantienen su
orientación y posición en el fluido
debido a que obedecen las
característricas del flujo laminar y
atraviesan en fila de uno el paso
óptico.
WBC Tecnología
La dispersión de Luz ocurre Dispersión de Luz Laser
cuando la partícula reflacta la luz
que incide sobre ella, esto
depende de las características
físicas de la partícula.
1 - 5°
6 - 20°
Dispersión de Laser de Ángulo Múltiple
Dispersión de ángulo
mayor (MAS)8~20
5
Granularidad (Complex)
3 4
Dispersión de ángulo
Menor (LAS)2~5
Volumen
1 Muestra
2 Laser
3 Lentes
1
Teoría de Mie
En células diferentes de diferente tamaño (Monoc. y Linf.)
El ángulo bajo las diferencia por tamaño
Laser
LAS
Teoría de Mie
En células diferentes pero del mismo tamaño (granulocitos)
Ángulo mayor refleja la complejidad celular
Laser
MAS
WBC Tecnología
Tinción Química
EOS
Otros
WBC
RBC
Cámara de diferencial
WBC technology
Chemical dye
BASO
other
WBC
RBC
BASO Channel
BASO scattergram
WBC/Baso
WBC BAS%
*
NEU# LYM# MON# EOS#
DISPERSOGRAMA
Neu
Mon
Lymph
Ghost
Grande
Neutro es complejo y
grande
Pequeño
Grande
Baso mantiene su
mismo tamaño
Lymph
Neutro
Eos
Mono
Disminuyen
grandemente
Pequeño
Mon
ALY
Lym ALY
NRbc
Ghost
Dispersograma de una muestra ANORMAL
Leucopoenia Eosinophilia
ATL LIC
Mov Izq.
LIC
Dispersograma Anormal
ALY
GRÁFICOS DE ANÁLISIS
2
histogramas
6 Dispersogramas
3 Dispersogramas
3D