Agar O-F y Agar triple

azúcar-Hierro (TSI)
Microbiología General I
EQUIPO: 9

Sebastián Fernández Stephanie Michelle

Román Nava Diana
Becerril Bonilla Juan
O.F. Medio Basal de
Hugh& Leifson
 Usos Agar
ProblemasO-F
Metabolismo
oxidativo-
Medio de Cultivo fermentativo
utilizado en las
pruebas bioquímicas
de identificación De bacterias
bacteriana en base Gram
a: negativas

A la movilidad
Producción de Gas
 Composición química
 FÓRMULA (en gramos por litro)
 TRIPTEÍNA ..............................................2.0
 CLORURO DE
SODIO........................................................5.0
 FOSFATO DIPOTÁSICO .........................0.30
 AZUL DE BROMOTIMOL .........................0.03
 AGAR ........................................................ 2.50
 pH FINAL: 7.1 ± 0.2
 Preparación
Problemas
Agar O-F
Suspender 9.8 g
Reposar
del polvo en 1
5
litro de agua
minutos.
purificada.

Calentar con
Distribuir en agitación
recipientes frecuente y hervir
apropiados 1 minuto para
disolución total.
Agar O-F

Esterilizar en Agregar de manera

autoclave a aséptica el hidrato de
121°C durante carbono (final al 1%).
15 minutos.

Distribuir en
tubos estériles
Dejar solidificar
en posición
vertical.
 Agar O-F

Procedimiento para Siembras

• Inocular, por
cada hidrato • Rotular un

.
.

• A partir de

.
de carbono tubo con la
un cultivo
que se use y inscripción:
puro de 18-
para “Abierto” y
24 horas del
cada microor otro tubo
microorganis
ganismo, 2 con la
mo preparar
tubos conteni inscripción:
un inóculo
endo el medio “Cerrado”
poco denso
O.F. y el (sellado).
mismo hidrato
de carbono.
Agar O-F

• Sembrar • Agregar al
utilizando tubo
aguja de “cerrado”
inoculación. (sellado) 1 o Luego,
Picar hasta 2 ml de tapar
aproximada vaselina o ambos
tubos con
mente 0.6 parafina
las tapas
mm del fundida apropiadas
fondo estéril, para
excluir el
oxígeno.
Cuidados
Fundamento
 Interpretación
 El uso del hidrato de carbono ya sea por
fermentación u oxidación produce acidez en el medio
con el consecuente viraje de color de verde al
amarillo
 Microorganismos oxidativos del hidrato de
carbono en estudio :
 Producen una reacción acida solo en el tubo abierto,
presentan poco o nulo desarrollo y ausencia de
producción de ácido en tubo cerrado
 Microorganismos fermentadores del hidrato
de carbono en estudio:
Producen una reacción acida en ambos tipos de tubos
Microorganismos que no utilizan el hidrato de
carbono en estudio:
No producen cambios ninguno de los dos tubos los
cuales permanecen verdes
 Microorganismos que se
Problemas
desarrollan en él
Agar O-F

A: reacción
ácida: medio
color amarillo.
K: reacción
alcalina:
medio color
verdoso verde
azulado.
G:producción
de gas.
Agar triple azúcar-
Hierro
(TSI)
 Usos Agar triple azúcar-hierro
Problemas
Fermentación
de hidratos
Medio de carbono
universalmente
empleado para la
diferenciación de Glucosa,
enterobacterias, en lactosa y
base a: sacarosa

Producción de Ácido Sulfhídrico

 Composición química

FÓRMULA (en gr por litro )

EXTRACTO DE CARNE................3.0
PLURIPÉPRONA...........................20
CLORURO DE SODIO...................5.0
LACTOSA........................................10
SACAROSA......................................10
GLUCOSA........................................1.0
SULFATO DE HIERRO Y AMONIO.......0.2
TIOSULFATO DE SODIO..................0.2
ROJO DE FENOL.............................0.025
AGAR................................................13.0
PH FINAL : 7.3 +/- 0.2
 Preparación
Problemas
Agar TSI
Suspender 62,5
Reposar
g del polvo en 1
5
litro de agua
minutos.
purificada.

Calentar con
Distribuir en agitación
tubos hasta frecuente y hervir
3ª parte. 1 minuto para
disolución total.
Agar TSI

Esterilizar en
autoclave a Enfriar y solidificar en
121°C durante pico de flauta profundo
15 minutos.
Agar TSI

Procedimiento para Siembras

• A partir de un
cultivo puro • Picando el
del fondo y
microorganism extendiendo
o en estudio, sobre la
con aguja de superficie del
inoculación, mismo.
inocular el
medio de
cultivo
Cuidados
Fundamento
 Interpretación

Observar el color del medio de cultivo y la producción de gas

1-Superficie alcalina/profundidad acida (pico rojo/ fondo
amarillo)
el microorganismo solamente fermenta glucosa
2-Superficie ácida/ profundidad ácida(pico amarillo/ fondo
amarillo):
el microorganismo fermenta glucosa, lactosa y/o sacarosa
3-Superficie alcalina/profundidad alcalina(pico rojo/ fondo
rojo):
el microorganismo es no fermentador de azúcares
4-La presencia de burbujas o la ruptura del medo de cultivo
indican que el
microorganismo produce gas
 Microorganismos que se
Problemas
desarrollan en él
Agar TSI

A: Reacción
ácida (Color
amarillo)
K: Reacción
alcalina
(Color rojo)
Referencias Bibliográficas

 - Laboratorios Britania S.A. (Internet). Argentina:

Consultado: 25 de Febrero 2019. Disponible en:
http://www.britanialab.com
 Bailey & Scott. Diagnóstico Microbiológico. (Internet).
Buenos Aires: Médica Panamericana; 2009.
Consultado: 25 de Febrero 2019. Disponible en:
https://books.google.com.mx