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Perú, es uno de los países que se ha visto afectado en los últimos tiempos por la alteración de
hidrocarburos producto de los trabajos industriales y marítimos. A su vez, por fases relacionadas
con la utilización, traslado, manejo del petróleo y sus derivados.
Las actividades navales son responsables del 33% de los derrames de petróleo, los accidentes de
los buques petroleros son 12%, empresas industriales y descargas urbanas del 37%.
En el presente trabajo de Investigación propone la aplicación de un tratamiento biotecnológico
con “BACTERIAS NATIVAS”, para evaluar su capacitad de degradación en suelos hidrocarbonados.
En la mayoría de los bioprocesos las células y los biocatalizadores están sumergidos y
suspendidos en un medio en el que pueden mantenerse activos.
General
• Biodegradar hidrocarburos totales de petróleo presente en agua y suelo
contaminado aplicando bacterias nativas en un biorreactor piloto tipo
airlift sometidas a óptimas condiciones de cultivo.
Específicos
• Determinar la influencia de las condiciones de cultivo de las bacterias
nativas en el proceso de biodegradación de hidrocarburos totales de
petróleo de agua y suelo contaminados en un biorreactor piloto tipo
airlift.
• Determinar la influencia de pH y la temperatura en el proceso de
biodegradación de hidrocarburos totales de petróleo en un biorreactor
piloto tipo airlif.
Solución hidropónica A y B Bombas de aire
pH metro y Termómetro
Solución hidropónica A 150 mL - 10 10
Solución hidropónica B 50 mL - 8 8
Bolsa zip-ploc 2u plástico 1.00 2.00
Baldes aforados 2u 10 L 14 28
Mangueras 8m 0,5 cm de diámetro 1.00 8.00
Cinta negra 1u 3M 3 3
Centímetro 1u regla 2 2
Difusores 4u - 3.00 12.00
Silicona 1u Barra 0.50 0.50
Petróleo 2L - 5 5
Bomba de aire 2u 2 entradas 25.00 50.00
Porta y cubre objeto 4u vidrio 3 3
Extracto de carne 10 g líquido 1 1
Detergente 2g - 1 1
Termómetro 1u comprado 60 60
Phmetro 1u Alquilado 80 80
Microscopio 1u - - -
Estación meteorológica 1u Alquilado 140 140
Parte experimental
La muestra de suelo fue
recolectada del distrito de Villa
María del Triunfo en la zona de
José Gálvez, presentando un
núcleo humano formando un
centro poblado “Las Palmas de
José Gálvez”.
La muestra fue aleatoria simple
representada por una muestra
de un kilogramo.
Selección de un consorcio microbiano degradador
de hidrocarburos totales de petróleo
Materiales
- Agua (500 mL)
- Petróleo (5 mL)
- Sacarosa (0,1 g)
- Solución hidropónica A
(2,5mL)
- Solución hidropónica B
(1mL)
- Bolsa zip-ploc (1 unidad)
- Detergente (1,5 g)
Diseño de un Sistema de biorreactores tipo airlift
para la biodegradación de hidrocarburo
Materiales
Baldes de plástico limpios y aforados de diámetro mayor 26cm, altura 27.4 cm y
diámetro menor 20.6 cm
Mangueras de plástico de 0.5 cm de diámetro (8 metros)
Bomba de aire Sebo ® de modelo SB-348A de doble salida de aire
Cinta adhesiva marca 3M
Tijeras simples
Centímetro
Difusores
Silicona
Para el desarrollo del trabajo experimental, se trabajó con un
biorreactor del tipo airlift, cuyo esquema se presenta en la Figura.
Producción de microorganismos que degradan
hidrocarburos totales de petróleo empleando
tratamiento por suspensión
Materiales
- Porta y cubre objeto
- Alícuota de la muestra a analizar
- Microscopio marca Primo Star.
- Muestra a analizar
Medición con el PH metro y termómetro
Materiales
- Phmetro Tracer ® Pocketester
- Termómetro digital Omron ®
- Vaso bícker
- Muestra a analizar
Análisis de la temperatura ambiental
9 - 13/11
17 -29/11
10 - 15/11
11 - 17/11
12 - 19/11
13 - 21/11
14 - 23/11
15 - 25/11
16 - 27/11
18 - 01/12
19 - 03/12
20 - 05/12
22 - 09/12
23 - 11/12
8 - 11/11
21 - 07/12
19 - 03/12 2 4
20 - 05/12 3 4
21 - 07/12 3 4
22 - 09/12 3 5 HR1 HR2
23 - 11/12 3 6
Temperaturas de Reactores
Mediación -
Día Temp R1 Temp R2
1 - 28/10 20,1 20
Temperaturas de Reactores
2 - 30/10 20,2 20,1 22
3 - 01/11 20,1 20,2
4 - 03/11 20,2 20,3
5 - 05/11 20,3 20,3 21.5
6 - 07/11 20,2 20,5
7 - 09/11 20,4 20,4 21
8 - 11/11 20,4 20,6
9 - 13/11 20,3 20,9
10 - 15/11 20,4 20,8 20.5
11 - 17/11 20,4 20,6
12 - 19/11 20,5 20,8
20
13 - 21/11 20,4 20,7
14 - 23/11 20,5 20,9
15 - 25/11 20,6 20,8 19.5
16 - 27/11 20,5 21,1
17 -29/11 20,6 20,9
18 - 01/12 20,7 21,3 19
21 - 07/12
10 - 15/11
11 - 17/11
12 - 19/11
13 - 21/11
14 - 23/11
15 - 25/11
16 - 27/11
18 - 01/12
19 - 03/12
20 - 05/12
22 - 09/12
23 - 11/12
1 - 28/10
2 - 30/10
3 - 01/11
4 - 03/11
5 - 05/11
6 - 07/11
7 - 09/11
8 - 11/11
9 - 13/11
17 -29/11
19 - 03/12 20,9 21,4
20 - 05/12 21 21,7
21 - 07/12 20,9 21,5
22 - 09/12 21,1 21,7
23 - 11/12 20,9 21,8 Temp R1 Temp R2
Temperatura Ambiental Máximas y Mínimas
Mediación
- Día Temp Máx Temp Mín
Temperaturas Máximas y Mínimas
1 - 28/10 22,2 15,9 30
2 - 30/10 22 16,1
3 - 01/11 22,1 15,9
4 - 03/11 22,3 16,5 25
5 - 05/11 22,1 16,4
6 - 07/11 22,4 16,3
7 - 09/11 22,3 16,1 20
8 - 11/11 22,8 16,7
9 - 13/11 22,6 16,8
10 - 15/11 23,1 16,4 15
11 - 17/11 23,3 16,5
12 - 19/11 23,8 16,4
13 - 21/11 23,2 16,9 10
14 - 23/11 23,9 16,8
15 - 25/11 24,1 16,9
16 - 27/11 24,6 17,3
5
17 -29/11 24,7 17,6
18 - 01/12 25,2 18,1
19 - 03/12 24,2 17,9
0
20 - 05/12 26 18,1
21 - 07/12 24,5 18
22 - 09/12 25,1 17,9
23 - 11/12 25 18,1
Temp Máx Temp Mín
pH de los Reactores 1 y 2
Mediación - pH de los Reactores
Día pH R1 pH R2
1 - 28/10 8,91 9,79 10.50
2 - 30/10 8,94 9,85
3 - 01/11 8,89 9,91 10.00
4 - 03/11 8,90 9,13
5 - 05/11 8,86 9,05
6 - 07/11 8,89 8,96 9.50
7 - 09/11 8,88 8,81
8 - 11/11 8,81 8,79
9.00
9 - 13/11 8,83 8,78
10 - 15/11 8,80 8,69
11 - 17/11 8,84 8,70 8.50
12 - 19/11 8,85 8,71
13 - 21/11 8,79 8,63
14 - 23/11 8,80 8,58 8.00
15 - 25/11 8,78 8,59
16 - 27/11 8,81 8,55 7.50
17 -29/11 8,79 8,55
17 -29/11
22 - 09/12
1 - 28/10
2 - 30/10
3 - 01/11
4 - 03/11
5 - 05/11
6 - 07/11
7 - 09/11
8 - 11/11
9 - 13/11
10 - 15/11
11 - 17/11
12 - 19/11
13 - 21/11
14 - 23/11
15 - 25/11
16 - 27/11
18 - 01/12
19 - 03/12
20 - 05/12
21 - 07/12
23 - 11/12
18 - 01/12 8,77 8,53
19 - 03/12 8,79 8,54
20 - 05/12 8,78 8,47
21 - 07/12 8,76 8,48
22 - 09/12 8,77 8,47 pH R1 pH R2
23 - 11/12 8,76 8,42
Se evidencia la disminución de HTP
3mm 6mm
13,04 % 26,09 %
Bacterias Bacterias
Nativas Nativas
de Agua de Suelo
Por la diferencia de altura y aspectos
visuales (turbidez y formación de
coágulos)
Conforme pasaban los días…
La biodegradación de HTP permitía:
pH de la mezcla tiende
a la Neutralidad
Siendo la Neutralidad una condición
favorable para la proliferación de
bacterias
Tienden a la
Neutralidad
Influye
En el cambio de
estación
significativamente
Solución Hidropónica B
Temperatura Ambiental
Sacarosa
Sistema de aireación