Procesos Biotecnológicos

Fermentación
Fermentación
 Cambios químicos en las sustancias
orgánicas producidos por la acción
de las enzimas.

 Esta definición general incluye

prácticamente todas las reacciones
químicas de importancia fisiológica.
En la Industria
 La biotecnología permite producir a menor costo
que la síntesis química.

 Insumos menos costosos, incluso materiales de

desecho (melaza, desechos orgánicos, minerales
traza).

 La producción en organismos vivos se ha

multiplicado, principalmente por la modificación
genética, multiplicación de genes productores o
inserción de nuevos genes por plásmidos (son
moléculas de ADN extracromosómico circular o
lineal )
Ventajas y Desventajas
 Se pueden producir moléculas  Fácil contaminación.
complejas como proteínas.
 Produce mezclas.
 Mayor rendimiento. complejas y requiere
operaciones de separación.
 Se trabaja a temperaturas
bajas, pH cercano al neutro.
 Utiliza grandes volúmenes
de agua.
 Reacciones específicas.

 Son procesos lentos.

 Se puede lograr isómeros de
utilidad.
Biotecnología: ADN Recombinante
Microorganismos productores
Hay 5 grupos de fermentación
comercialmente importante:
1.- Producción de biomasa como producto
final.
Lactobacilus reconstituyentes de la flora
intestinal (Floratil, Enterogermina, Infloran,
Lactocereal, etc.), levadura de panificación,

Cultivos concentrados para inóculos

(Diáspora de los hongos que forman
simbiosis mutualística con las raíces de las
plantas) etc.
2. Producción de biomasa para extracción
de enzimas :
Amilasa, proteasas, pectinasas, isomerasa de la
glucosa, cellulasas,lipasas, lactasas,
estreptokinasas, etc.

3. Obtención de Metabolitos :
Metabolitos Primarios : Etanol, Acido Cítrico,
glutámico, lisina, vitaminas, polisacáridos, etc.
Metabolitos secundarios : todos los
antibióticos por fermentación.
4. Productos Recombinantes:
Usa microorganismos modificados genéticamente:
Insulina, Interferón, Estreptokinasa.

5. Biotransformaciones o síntesis:
Se logran oxidaciones, reducciones, insertar
grupos funcionales, hidrolizar, esterificar, etc.

Transformación de esteroides, hormonas,

obtención de saborizantes, aromatizantes
orgánicos.
Producción de bienes
Materias primas (bajo costo)
+
Agente biológico

Proceso
(bajo costo)
Producto con
valor agregado

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Biorreactores
 Son recipientes en el que se lleva a cabo un proceso químico que
involucra organismos o sustancias bioquímicamente activas derivadas
de dichos organismos.

 Estos biorreactores son

comúnmente cilíndricos,
y son usualmente fabricados
en acero inoxidable.
Busca mantener condiciones
ambientales propicias (pH,
temperatura, concentración de
oxígeno, etc.) al organismo o
sustancia química que se cultiva.
 Fermentadores de vino o cerveza

Biorreactor de
Tanque Agitado
En función al flujo:
1.- Lote o Discontinuo (Batch).
2.- Lote alimentado o Semicontinuo
(Feed-Batch).
3.- Continuo o quimiostato.
Fases de la Fermentación

No crecimiento,
Metabolitos secundarios

Producción biomasa,
metabolitos primarios
Fermentador tipo tanque agitado

A- Inyección de aire
B- Difusor
C- Eje transmisor
D- Motor
E- Agitadores
F- Controladores
G- Salida gases
H- Entrada
I- Deflectores
J- Rompe-espuma
K- Camisa
L- Salida
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 Procesos utilizados en la purificación de
productos biotecnológicos

 Centrifugación
 Homogenización
 Filtración, micro filtración, ultra filtración
 Extracción con solventes
 Adsorción
 Electroforesis
 Cromatografías
 Liofilización

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A.-SEPARACIÓN CELULAR:
Generalmente es la primera etapa del proceso.
Se lleva a cabo por centrifugación o
filtración por membrana y se preserva la
fracción que contiene el producto: células si el
producto es intracelular o caldo si las células
excretan el producto al medio de cultivo
durante la fermentación

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Centrifugal de discos

• Separa fases sólida y liquida en un proceso continuo

• Usa una fuerza centrifuga elevada
• Los sólidos (mas densos) se desplazan hacia las paredes
• La fase liquida forma capas concéntricas en el centro

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Separación de células por micro filtración:
-Se utilizan filtros tangenciales de cerámica con poros de tamaño adecuado
que retienen las células y permiten la salida del liquido
- Los sistemas son esterilizables.
- Los procesos pueden ser continuos o discontinuos.
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B- Disrupción de células:
- Es el proceso por el cual se produce la
ruptura de las células para liberar el producto
acumulado en su interior.
- Se lleva a cabo utilizando tratamientos
químicos o enzimáticos de las células o por
métodos físicos (bead mill y homogenización)
- La elección del método depende de las
características de las células y de la estabilidad
del producto

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Bead Mill

Cascading
beads
Rolling
beads Cells being
disrupted

Tambor rotatorio con perlas de vidrio que impactan las

células y producen la lisis y liberación del contenido

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Homogeinización

 Es el método mas utilizado en escala

industrial.
 La disrupción se lleva a cabo sometiendo la
suspensión de células a alta presión y
haciendo pasar la suspensión a través de una
válvula

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C- Captura primaria del producto:

 Es el primer paso de purificación donde se busca separar las

impurezas mas abundantes y fundamentalmente eliminar el agua
para reducir los volúmenes y reducir costos de operación.

 Se trabaja utilizando el caldo de fermentación si el producto es

excretado por las células al medio de cultivo o el producto de la
disrupción celular si el producto es intracelular.

 Los métodos mas utilizados son cromatografías de afinidad y ultra

filtración.

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Ultrafiltración:
El principio es similar al utilizado para separa células,
solo varia el tamaño del poro de acuerdo al tamaño del
producto que quiero retener
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D- Purificación prop dicha: el procesamiento
involucrará más de una etapa para aislar la
molécula deseada de otras moléculas
presentes en la captura primaria:

 Destilación
 Centrifugación
 Filtración
 Ultra filtración
 Extracción con solventes
 Adsorción
 Tamices moleculares
 Electroforesis
 Cromatografía de afinidad
 Liofilización
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Terminado del Producto

Es la etapa final del proceso de producción

donde el producto se lleva a su concentración
final, se agregan conservantes y se envasa.

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Escalado de procesos
Los procesos biotecnológicos se desarrollan inicialmente en escala de
laboratorio. Para esto se usan pequeños fermentadores (0.5-5 L) y
sistemas de purificación que luego pueden escalarse.
Esto permite evaluar múltiples condiciones en un corto tiempo a un
bajo costo ensayando distintas condiciones en fermentadores y
sistemas de purificación montados en paralelo

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Escalado de procesos
Una etapa critica en el desarrollo de un proceso de producción
es el salto de escala.
 Hay procesos que funcionan muy bien en escala de laboratorio
y los rendimientos caen en forma marcada al aumentar la escala.
Las mermas de rendimiento están ligadas a múltiples factores
generalmente relacionados a la transferencia de masa y energía.
Ejemplo: los procesos de fermentación generan calor y para que
la temperatura en el fermentador permanezca en el valor optimo
es necesario refrigerar el fermentador. Refrigerar un fermentador
de 1L es fácil pero uno de 100.000 L es muy complicado. Otro
problema es la eliminación de desechos.

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Escalado de procesos
Otro problema es que la producción de muchos compuestos es
dependiente de el consumo de oxigeno por parte de las células
y la capacidad de transferir oxigeno es inversamente
proporcional al tamaño del fermentador

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Escalado de procesos
Una vez desarrollado un proceso con un rendimiento satisfactorio en
escala de laboratorio se realiza el escalado del proceso a una planta
piloto (tamaño intermedio entre laboratorio planta de producción)

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