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Microscopia

Objetivo. Introducir al estudiante en el campo del estudio microscópico.


Microscopio compuesto realizado por los hermanos Hans y
Zacharias Jensen en 1590, en Midelburg, HOLANDA. (25
cm). Está formado por dos tubos de latón, soportando una
lente cada uno, que se deslizan dentro de otro tubo de latón lo
que permite el enfoque. Se considera el primer microscopio
compuesto de la historia. Este microscopio se hace según una
copia del original de los HH. Jensen, aparecida en un
anticuario de Paris en 1891, hoy día se cuestiona su
autenticidad.
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Microscopio compuesto de Galileo Galilei 1612 ITALIA. (12 cm).
Aunque Galileo Galilei no destacó por sus estudios microscópicos, si
lo hizo por la aplicación de las lentes en diversos aparatos como el
telescopio. Este microscopio posee dos lentes instaladas en dos
cilindros de madera que se deslizan sobre uno exterior de cartón,
forrado de cuero verde, permitiendo el enfoque. El acabado, con
tapadera incluida, es de un marcado carácter renacentista italiano.
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Microscopio simple realizado por Antoni van Leeuwenhoek, 1632,
en Leyden, HOLANDA. (10 cm). Con este microscopio simple se
consiguen imágenes de mayor calidad que con el microscopio
compuesto de los HH Jensen, lo que permitió a Leeuwenhoek hacer
los descubrimientos de infusorios, eritrocitos, etc. pioneros en los
hallazgos microscópicos.
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5.- Microscopio compuesto construido por Giuseppe Campana, 1665. en
ITALIA. (9 cm). Construido en madera y soportado por un anillo de metal,
permite el enfoque mediante el desplazamiento de la porción interior por un
mecanismo de tornillo. En la base presenta un disco de madera con un agujero
central lo que le hace apto para observar especimenes por transparencia. Por
sus reducidas dimensiones se le considera el primer microscopio de bolsillo.
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6.- Microscopio compuesto de Eustaquio Divini, 1668, Bolonia, ITALIA. (30 cm). El
original se encuentra en el Museo Copernicana de Roma. Está construido con tubos de
cartón telescopados. En la porción superior presenta un juego de dos lentes enfrentadas por
la convexidad y en la porción inferior contiene una lente montada en madera. El sistema se
ampara en un trípode de metal.

Historia de la Microscopía 8
7.- Microscopio compuesto construido por Christopher Cock según diseño
de Robert Hooke, 1670. INGLATERRA. (50 cm). A Robert Hooke se debe la
utilización del vocablo "célula" al denominar así a las celdillas del corcho
observadas probablemente con un microscopio como este cuyo original se
conserva en "La Court Collection in the Science Museum at South
Kensington, England"
Historia de la Microscopía 9
8.- Microscopio compuesto, anterior a 1686. (50 cm). Autor desconocido, El
original de este microscopio fue localizado por John Mayal en 1887 en Francia,
donde había permanecido en posesión de una familia desde antes de 1700. Está
formado por tubos de cartón forrados de cuero verde, y madera. La distancia
focal se consigue deslizando un tubo sobre otro, como un telescopio. A
diferencia del de Eustaquio Divini los tres pilares descasan sobre una superficie
de madera en cuyo centro hay escavada una celdilla.
Historia de la Microscopía 10
9.- Microscopio simple de Juan Crisóstomo Martínez. 1680, Valencia,
ESPAÑA. (28 cm). La reproducción de este microscopio se realizó basándose
en el que aparece en una de las láminas de Juan Crisóstomo Martínez. En
estas láminas describe con gran detalle la estructura microscópica del tejido
óseo.
Historia de la Microscopía 11
10.- Curioso microscopio simple hecho en Italia en 1686. (12 cm). El enfoque se
logra mediante un hilo que por un lado está sujeto al fleje que soporta la lente, y
por el otro se enrolla en una clavija de madera. Las muestras se colocan en una
rueda de madera que se gira mediante otra clavija.
Historia de la Microscopía 12
11.- Microscopio compuesto John Marshall, 1700, INGLATERRA. (50 cm). Este
microscopio de gran tamaño, añade al de Robert Hooke, la platina que al elevar la
muestra de la base permite la observación por transparencia, y un tornillo, paralelo a
la barra de soporte, que actúa de micrométrico, para el enfoque fino. John Marshall,
fue uno de los primeros en comercializar el microscopio.
Historia de la Microscopía 13
13.- Microscopio simple de compás 1715. (17 cm). Consta de un mango de madera
y una barra de latón donde va instalada una lente. Por el lado de la muestra lleva
una pieza cóncava “Lieberkühn" , plateada, a modo de espejo condensador de la
luz sobre el espécimen. La muestra se instala en la pinza de una varilla sujeta al
mango por una articulación. Este tipo de microscópio simple adquirió gran
difusión y se mantuvo en uso hasta finales del siglo XIX, se le conocia como
modelo “Lieberkühn".
Historia de la Microscopía 14
12.- Microscopio compuesto diseñado por Edmund Culpeper, 1720 .INGLATERRA. (40
cm). Este microscopio permite la observación de preparaciones por transparencia al
colocar una platina sujeta por tres pilares a la base en la que hay instalado un espejo
para reflejar la luz. Sobre la platina, y también soportado por tres pilares se encuentra
un tubo de cartón forrado de cuero, dentro del cual se desliza una pieza de madera que
contiene en su extremo superior la lente ocular. La lente objetivo se enrosca en el
soporte del tubo de cartón permitiendo un enfoque fino.
Historia de la Microscopía 15
15.- Microscopio compuesto alemán, Nuremberg, hacia 1750. (40 cm). Este
microscopio está construido íntegramente en madera y cartón. Consta de una
barra sobre la que se soporta el sistema óptico y un sistema cilíndrico para la
colocación de la muestra. La barra y el sistema están sobre una caja rectangular
en la que se guardaban los accesorios.
Historia de la Microscopía 16
Microscopio de Spallanzani, parte de la colección del Instituto de Historia de
la Medicina, Roma.

Historia de la Microscopía 17
16.- Microscopio compuesto diseñado por John Cuff, 1750. LONDRES. (47 cm). Este
microscopio sustituye los tres pilares que sustentaban la pletina y el sistema óptico
del modelo E. Culpeper, por cuya razón resultaba de engorroso manejo, por dos barras
de metal, una de las cuales permanece fija, mientras que la otra se desliza sobre esta.
El enfoque fino se hace mediante un tornillo sujeto por un extremo a la barra fija, y por
el otro a la móvil. Este modelo de microscopio va a tener gran difusión en el último
lustro del siglo XVIII y primero del siglo XIX.
Historia de la Microscopía 18
17.-Microscopio modelo Culpeper-Scarlett, 1750. (42 cm). Sobre una caja de madera
oscura, soportada por tres columnas en S se encuentra una pletina circular de metal
amarillo, y por otras tres columnas similares, pero mas pequeñas, el cuerpo del
microscopio. El cuerpo del microscopio consiste en varios cilindros de latón
telescopados, dos de los cuales están forrados de cuero rojo con flores de lis
grabadas en oro. Historia de la Microscopía 19
Diversos modelos de microscopio del siglo XVIII

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18.- Microscopio simple construido hacia 1760, (18 cm). La lente, de pocos
aumentos, se sostiene fija a una barra de metal sobre la que se desliza, para
conseguir el enfoque, una pinza donde se instala la muestra.

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14.- Microscopio compuesto, construido en Baviera según diseño de Benjamin
Martin, hacia 1770, (20 cm). Este modelo de pequeño microscopio fue muy
popular en la Selva Negra y en el Tirol. En tiempos recientes se usaba como
juguete.
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Singular ejemplar de microscopio, de original y elegante diseño, denominado
"variable" por ser utilizable como microscopio compuesto o simple; fabricado
en latón, fue construido al estilo inglés por George Adams hacia 1770. Museo
Nacional de Ciencias Naturales (MNCN).

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Modelos de microscopio del siglo XVIII. Se observa en ellos la influencia del
arte rococó.

Historia de la Microscopía 24
19.-Lupa construida hacia 1800. (3.5 cm). Se compone de dos lentes; una de ellas
permanece fija en un extremo del cuerpo cilíndrico, mientras que la otra está
montada en un cilindro roscado interior permitiendo variar la distancia focal.

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20.- Microscopio compuesto construido hacia 1830, (4 cm). Formado por dos
lentes engastadas en un cilindro de metal roscado sobre un soporte con tres
pilares.

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21.-Pequeño microscopio modelo Georges Oberhauser, 1835. (15
cm). Posee una base circular, fue un microscopio muy extendido en
la época como modelo de bolsillo. (Donación del DR. Luis Santos
Gutiérrez).
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24.-Pequeño microscopio (10 cm), desmontable fabricado en
Inglaterra hacia 1850, se acompaña, dentro de una caja de cartón, de
dos preparaciones e instrucciones de uso.
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25.- Microscopio invertido modelo Lawrence Smith 1850, (23 cm).
LOUISIANA. Este modelo de microscopio fue diseñado por el Dr.
Lawrence Smith, mejorando el modelo de Chevalier de 1834.
Nachet, basándose en dibujos de Smith, construye numerosos
ejemplares durante 25 años sin mencionar a su inventor,
denominándolo microscopio químico.
Historia de la Microscopía 29
22.-Microscopio compuesto , firmado Dollond , 1860. (32 cm). Londres. Este
microscopio consta de una base en V que mediante dos soportes planos
verticales, sostiene el cuerpo cilíndrico donde van colocados: en su extremo
inferior un espejo orientable y en el extremo superior un soporte para el tubo
con el sistema óptico. En el cuerpo también se encuentran un tornillo con una
cremallera (macrométrico) y la platina. En la porción inferior del tubo con el
sistema óptico, se encuentra un dispositivo que mediante un tornillo exterior
mueve la lente objetivo actuando de micrométrico.
Historia de la Microscopía 30
23.- Robusto microscopio con soporte de tres barras de metal. (30
cm). Este tipo de microscopios se fabricó en Viena y fue utilizado
entre otros por el eminente patólogo alemán Rudolph L. Virchow y
el bacteriologo alemán Robert Koch, entre 1850 y 1875

Historia de la Microscopía 31
26.- Pequeño microscopio compuesto, (23 cm), de autor
desconocido, hacia 1870. Utiliza un estativo de herradura y un
solo objetivo introducido en un cilindro por el que se desplaza
mediante un pomo a modo de micrométrico. (Donación del Dr.
Pedro Amat Muñoz). Historia de la Microscopía 32
27.- Microscopio monocular Nachet, 1880, París. (28 cm), Es un
robusto microscopio con un solo objetivo, que posee un estativo en
herradura. Nachet destacó por su aportación de adaptar los
binoculares graduables al microscopio. Este tipo de microscopio fue
utilizado por Louis Pasteur. (Donación del Dr. Agustín Bullón
Sopelana)

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28.- Microscopio de disección Carl Zeiss hacia 1900. (18
x 50 cm). Consta este microscopio de una base de
herradura que soporta mediante un pilar una sólida platina
y un brazo articulado donde se coloca el sistema óptico.
Este brazo se desplaza verticalmente mediante un sistema
de cremallera introducido en el pilar. En la platina se
engastan dos apoyabrazos de madera. El microscopio se
acompaña de caja y accesorios en perfecto estado.
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29.- Microscopio moderno, posterior a 1900. (35 cm). Este
microscopio ya posee las características de los
microscopios actuales y que, con algunas variantes, van a
marcar el prototipo del siglo XX. La incorporación del
sistema revolver para cambiar los objetivos se realiza a
partir de 1880. El carro para desplazar la preparación
sobre la platina y la óptica son Leitz. Posee un ocular con
"pelo indicador" Historia de la Microscopía 35
30.- Microscopio de disección Leitz Wetzlar,1920. (32 cm). Lleva
incorporado un sistema eléctrico de iluminación a través del objetivo,
que permite observar la muestra con luz incidente. Los dos objetivos
se cambian por un sistema de bayoneta.

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Historia de la Microscopía 39
Los diseños de microscopio, que en un inicio eran relativamente sencillos
pero mostraban la tendencia artística de las épocas en que fueron
construidos, pronto fueron cambiando conforme se buscaban otros
parámetros más prácticos como la estabilidad del mecanismo (dado lo
onerosos que han sido siempre), la necesidad de aprovechar la visión
stereoscópica del ser humano, el desarrollo de la ergonomía, que exige
cada día adaptar los artilugios creados por la humanidad a la mayor
comodidad y a la anatomía del individuo, el rápido avance de la
electricidad, electrónica, computación y cibernética, que se han
aprovechado en microscopía para crear nuevas aplicaciones de ésta.

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Historia de la Microscopía 41
Microscopio monocular óptico de campo claro

Historia de la Microscopía 42
Microscopio binocular

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Historia de la Microscopía 44
Historia de la Microscopía 45
Historia de la Microscopía 46
Microscopio óptico binocular BBT Krauss. 1960

Historia de la Microscopía 47
Microscopio óptico trinocular BBT Krauss. Cuenta con un
tercer ocular para sistema de cámara fotográfica o de video.
1960.

Historia de la Microscopía 48
Microscopio óptico trinocular Fratelli-Koristka. 1960.

Historia de la Microscopía 49
Microscopio óptico Coocke-McArthur. 1960.

Historia de la Microscopía 50
Microscopio óptico binocular Nachet. 1960.

Historia de la Microscopía 51
Microscopio óptico binocular Stiassnie. 1960.

Historia de la Microscopía 52
Microscopio óptico binocular Reichert. 1960.

Historia de la Microscopía 53
Microscopio de tambor. Inglaterra, mediados del siglo XIX.

Historia de la Microscopía 54
Microscopio Confocal Leica. 1994.

Historia de la Microscopía 55
Historia de la Microscopía 56
Microscopio Hitachi

Historia de la Microscopía 57
Microscopio OPL. 1960

Historia de la Microscopía 58
Historia de la Microscopía 59
Historia de la Microscopía 60
Historia de la Microscopía 61
Historia de la Microscopía 62
Historia de la Microscopía 63
Historia de la Microscopía 64
Historia de la Microscopía 65
Historia de la Microscopía 66
Historia de la Microscopía 67
Microscopio Electrónico de Alto Voltaje, JEOL. 1960-70

Historia de la Microscopía 68
Microscopio Electrónico de Alto Voltaje

Historia de la Microscopía 69
Robert Hooke sometime in the 1660s

Robert Hooke, 1660

Historia de la Microscopía 70
Las lentes biconvexas

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Historia de la Microscopía 72
Equipos anexos al microscopio

Historia de la Microscopía 73
Microscopía
• El microscopio marcó un hito en los estudios, ya que hay que considerar
que el ojo desnudo aprecia como independientes a dos puntos separados
por 0,1mm (poder separador) y el mejor microscopio óptico presenta un
límite de resolución de 0,2 µm y un aumento máximo de 1500-2000X, que
resulta de multiplicar el aumento del ocular (10-20X) por el del objetivo (5,
10, 20 aumentos, los comunes y x 100, el objetivo de inmersión en aceite).

• Como las bacterias presentan aproximadamente un diámetro de 1µm, con


los microscopios ópticos sólo se pueden apreciar la forma general y las
características morfológicas principales, pero no se aprecian estructuras
subcelulares.
• La estructura interna detallada de los microorganismos fue visible con
el microscopio electrónico, desarrollado a partir de la década del 30
del siglo XX y que presenta un poder separador aproximadamente
1000 veces superior al del microscopio óptico y puede distinguir
puntos separados por 0,5nm (aumento eficaz 250.000X). Se emplean
los microscopios electrónicos de transmisión y de barrido
MICROSCOPIA
• Es el conjunto de técnicas y métodos destinados a hacer visible los
objetos de estudio que por su pequeñez están fuera del rango de
resolución del ojo normal.

• Conjunto de métodos y técnicas afines pero extrínsecas al aparato.

• Algunas de ellas son, técnicas de preparación y manejo de los objetos


de estudio, técnicas de salida, procesamiento, interpretación y
registro de imágenes, etc.
• Microscopía óptica (microscopía de luz clásica), consiste en hacer
pasar luz visible de una fuente (difractada, reflejada o refactada en el
sujeto de estudio) a través de lentes ópticos simples o múltiples, para
lograr una vista ampliada de la muestra.
EL MICROSCOPIO
• La parte mecánica del microscopio
• Comprende el pie, el tubo, el revólver, el asa, la platina, el
carro, el tornillo macrométrico y el tornillo micrométrico.

• Estos elementos sostienen la parte óptica y de iluminación,


además permite los desplazamientos necesarios para el
enfoque del objeto.

• El pie. Constituye la base sobre la que se apoya el microscopio


y tiene por lo general forma de Y o bien es rectangular

• El tubo. Tiene forma cilíndrica y está ennegrecido


internamente para evitar las molestias que ocasionan los
reflejos de la luz. En su extremidad superior se colocan los
oculares.
• El revólver. Es una pieza giratoria provista de orificios en los cuales se
enroscan los objetivos. Al girar el revólver, los objetivos pasan por el
eje del tubo y se colocan en posición de trabajo, la cual se nota por el
ruido de un piñón que lo fija.

• La columna, llamada también asa o brazo, es una pieza colocada en la


parte posterior del aparato. Sostiene el tubo en su porción superior y
por el extremo inferior se adapta al pie.
• La platina.
Es una pieza metálica plana en la que se coloca la
preparación u objeto que se va a observar. inmóvil; en
otros casos puede ser giratoria, es decir, mediante
tornillos laterales puede centrarse o producir
movimientos circulares.

• Carro. Es un dispositivo colocado sobre la platina que


permite deslizar la preparación con movimiento
ortogonal de adelante hacia atrás y de derecha a
izquierda.
• El tornillo macrométrico. Girando este tornillo,
asciende o desciende el tubo del microscopio,
deslizándose en sentido vertical gracias a una
cremallera.

• Estos movimientos largos permiten el enfoque rápido


de la preparación.

• El tornillo micrométrico. Mediante el movimiento


casi imperceptible que produce al deslizar el tubo o la
platina, se logra el enfoque exacto y nítido de la
preparación.
Sistema óptico
OCULAR:
Lente situada cerca del ojo del observador.
Amplía la imagen del objetivo.

OBJETIVO:
Lente situada cerca de la preparación.
Amplía la imagen de ésta.

CONDENSADOR:
Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación.

DIAFRAGMA:
Regula la cantidad de luz que entra en el condensador.

FOCO:Dirige los rayos luminosos hacia el condensador


Tipos de microscopios
• Microscopio electrónico de barrido.
• Microscopio óptico
• Microscopio simple
• Microscopio compuesto
• Microscopio de luz ultravioleta
• Microscopio de fluorescencia
• Microscopio petrográfico
• Microscopio en campo oscuro
• Microscopio de contraste de fase
• Microscopio de luz polarizada
Microscopio de campo oscuro

Se utiliza para analizar elementos


biológicos transparentes y sin
pigmentar, invisibles con iluminación
normal, sin fijar la muestra.

El objetivo recibe la luz dispersa o


refractada por las estructuras del
espécimen.

Está equipado con un condensador


especial que ilumina la muestra con luz
fuerte indirecta.
• Microscopio confocal
• Microscopio electrónico
• Microscopio electrónico de transmisión
• Microscopio electrónico de barrido
• Microscopio de iones en campo
• Microscopio de sonda de barrido
• Microscopio de efecto túnel
• Microscopio de fuerza atómica
• Microscopio virtual
• Microscopio de antimateria
• Microscopio reflector
Microscopios electrónicos:

Estos microscopios son grandes y complejos. Utilizan


electrones en vez de luz y aumentan los objetos hasta
250.000 veces.

Las imágenes que se producen son en blanco y negro


y muchas veces tienen colores falsos.
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO
MICROSCOPIO ELECTRONICO DE BARRIDO
El microscopio electrónico
de transmisión (MET)
Trabaja “iluminando”, un
ejemplar en la platina con un
haz de electrones y
enfocando y aumentando la
“imagen” con lentes
magnéticas.

Esta imagen electrónica, que


es invisible, se transforma en
una imagen normal, visible
mediante una pantalla
especial.
MICROSCOPIO ELECTRÓNICO DE TRANSMISIÓN