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BIORREACTORES

(biorreactor = recipiente en el cual se cultivan los


microorganismos)

(biomasa = concentración de microorganismos expresada


en gramos de células secas / litro de cultivo),
REQUERIMIENTOS FÌSICOS

 Temperatura
 pH
 Actividad de Agua

CONDICIONES ÓPTIMAS  Presión Osmótica


PARA EL CRECIMIENTO
REQUERIMIENTOS QUÌMICOS
MICROBIANO
AERÓBICO (CONSUMO
 Carbono
DE O2 )
 Nitrógeno
 Azufre
 Fosforo
 Oligoelementos
 Oxígeno
CONDICIONES ÓPTIMAS
PARA EL CRECIMIENTO
MICROBIANO
AERÓBICO (CONSUMO
DE O2 )

 El consumo de O2 en biorreactores está dado por el


número de mos existentes en el fermentador en un
momento determinado y por su consumo unitario.
 Está directamente relacionado con la población inicial
en cada ciclo y el tiempo durante el cual, ésta
población se encuentra en condiciones de
desarrollarse.
 Es necesario conocer previamente las fases del
crecimiento de los mos
TRANSFERENCIA DE MATERIA (O2 Y CO2)

 En un reactor biológico las células toman al oxigeno que


se encuentra disuelto en el medio acuoso.
 La transferencia de masa (oxígeno) de la fase gaseosa
al líquido es de vital importancia.
 El modelo que representa la transferencia de masa del
gas al líquido.

Los factores que afectan a la demanda de oxígeno en un fermentador


son los siguientes:
a) La especie celular.
b) Las propiedades del medio de cultivo.
c) La naturaleza de la fuente de carbono en el medio.
d) La fase de crecimiento celular.
Figura 2. Técnicas de cultivo y crecimiento celular
Demanda de Oxígeno: rO2

La velocidad de transferencia de 02 (r02) desde el seno de la fase


gaseosa (burbujas) hasta la fase líquida (medio líquido) está
determinada por la siguiente ecuación: rO2 = KLa (C*- C)
Donde: KLa es el coeficiente volumétrico de transferencia de oxígeno.
C la concentración de 02 disuelto en el seno del líquido.
C* la concentración de O2 disuelto en equilibrio con la presión parcial de
oxígeno de la fase gaseosa.
Velocidad especifica de consumo de oxígeno Es la velocidad con
la que una célula consume oxigeno (q0 ). Esta variable depende
principalmente de la naturaleza bioquímica de la célula y del medio
de cultivo.

Si 𝑄0 es la velocidad de consumo de oxígeno por volumen de


caldo, se tiene una ecuación matemática que es:

Donde:

𝑥: es la concentración celular Cuando la concentración de oxígeno


en el medio cae por debajo de cierto valor, la velocidad de
consumo empieza a depender de la concentración de oxígeno.
Para el caso de fermentadores sumergidos en estado estacionario no
hay acumulación de oxígeno en ninguna parte de fermentador, por lo
tanto, la transferencia de oxígeno de las burbujas debe ser igual a la
cantidad de oxígeno consumido por las células. De forma matemática
el enunciado se ve de la siguiente manera:

Donde
𝐾LA: es el coeficiente global de transferencia de masa en cuanto al
oxígeno.
𝐶𝐴𝐿 *: es la concentración de oxígeno en la interfase La concentración
celular que se puede soportar con ciertas condiciones de transferencia
dadas es:
Donde:
𝐾LA: Es el coeficiente global de transferencia de masa en cuanto al
oxígeno.
𝐶𝐴𝐿 : Es la concentración de oxígeno en el líquido.
𝑥: Es la concentración celular.
qo: Es la velocidad con la que una célula consume oxigeno.
𝐶𝐴𝐿 *: Es la concentración de oxígeno en la interfase La concentración
celular que se puede soportar con ciertas condiciones de transferencia
dadas es:
Para el cálculo del coeficiente de transferencia de masa crítica está dada
por:

Medición experimental de 𝐾LA:


a) Método del balance de oxígeno: se mide el contenido de oxígeno
a la entrada y salida del fermentador, con lo que se puede obtener la
cantidad de oxígeno transferido por balance de materia de oxígeno.
Se modela de la siguiente manera:

Dónde:

𝑉L: Volumen del líquido

𝐹G: Flujo del gas

𝐶AG: Concentración del gas


b) Método dinámico: en este método solo es necesario medir la
concentración de oxígeno en el fermentador a lo largo de un tiempo
determinado. De la ecuación diferencial:

Para el estado estacionario:

sustituyendo 𝑞0X en la ecuación diferencial queda como


Integrando para un tiempo determinado queda la fórmula para
calcular el coeficiente global de transferencia de oxígeno (masa) en
un fermentador:

A continuación Ejemplo de Aplicación


Ejemplo de Aplicación 1: Disponemos de un fermentador de 50 m2 de
sección transversal en el que tiene lugar un proceso aerobio. Se ha
empleado una columna de burbujeo para el suministro de oxígeno,
observándose que el medio de cultivo empleado favorece la
coalescencia de las burbujas. Sabiendo que kLa = 0,05 s-1, calcular el
flujo de gas vG necesario para la aireación y el caudal G. Suponiendo
que la concentración celular máxima es de 8 Kg cél/m3, determine la
velocidad de consumo de oxígeno por parte de los microorganismos.
SOLUCIÓN
Para la determinación del flujo de gas, emplearemos la ecuación siguiente:

k L a  0,32(vs )0,7
Sustituyendo el valor de kLa y despejando vG, se obtiene que vG = 0,0705 m/s

Para el cálculo del caudal empleado,


G
sabemos que vG = Por tanto, G = vG S = 3,526 m3/s
S
kL a(c*A )
La concentración celular máxima viene dada por: X max 
q
Suponiendo que cA* = 10 g O2/m3

y puesto que Xmáx = 8 Kg cél/m3 despejamos q.

La velocidad de consumo de los microorganismos es, por tanto, q = 6,25x10-5 kg


O2/ Kg X s, o bien, q = 0,225 kg O / Kg X h
2
Ejemplo de Aplicación 2: Una cepa de Azotobacter vinelandii esta
siendo cultivada en un fermentador agitado de 15m3 para la
producción de alginato. Bajo las condiciones normales de operación,
KLa es 0,17s-1. La solubilidad del oxigeno en el caldo es
aproximadamente 8x10-3 kg.m-3.

a) La velocidad especifica de consumo de oxigeno es 12.5mmol/gr.h.


Cual es la máxima concentración de células posible.
b) La bacteria sufre una inhibición del crecimiento después de verter
accidentalmente sulfato de cobre al caldo de fermentación, lo que
produce una disminución en la velocidad de consumo de oxigeno
hasta 3mmol/gr.h. Que concentración máxima de células puede
soportar ahora el fermentador.
Solución
a) De la ecuación

b) Se supondrá que el sulfato de cobre añadido no afecta al valor de


C*AL ni a kLa. Si qo se reduce por un factor de 12,5/3= 4,167, Xmax
aumenta hasta:
Ejemplo de Aplicación 3: Un fermentador agitado de 20L que contiene
un cultivo de Bacillus Thuringiensis a 30 °C se utiliza para la producción de un
insecticida microbiano. El valor de KLa se determina mediante el método
dinámico. Se corta aire durante unos pocos minutos disminuyendo el nivel
de oxígeno disuelto y posteriormente se vuelve a restablecer. Cuando se
alcanza el estado estacionario, la tensión del oxígeno disuelto es el 78% de
aire. Se obtuvieron los siguientes datos : F Tiempo

Tensión 5 15
de
50 66
oxígeno

a) Calcular KLa
b) Se comete un error en la determinación del nivel de oxígeno disuelto en
estado estacionario, de manera que en vez del 78% se ha tomado un valor del
70%. Cuál es el porcentaje de error en KLa como resultado de este 8% de error
en la medición de CAL.
Solución:

a) CAL = 78% de saturación de aire. Si se define t1= 5s, CAL1


= 66%.

KLa = Ln (78-50 / 78-66) / (15-5)s

KLa = 0.085 s-1

b) Si CAL se considera ser el 70% de saturación de aire

KLa = Ln (70-50 / 70-66) / (15-5)s

KLa = 0.16 s-1

El error en KLa es casi del 100%. Esto muestra la importancia


de tener datos
Ejemplo de Aplicación 4: Se utiliza el método dinámico para medir
KLa en un fermentador que opera a 30C. Los datos de concentración
de oxigeno disuelto en función del tiempo durante la etapa de re
oxigenación son los siguientes:

La concentración de equilibrio del oxigeno en el caldo es 7,9x10^-3 kg/m3.


Calcular KLa.
Solución
El KLa se calcula mediante la ecuación siguiente:

Tomando como t1= 10 segundos y


CAL=43% de saturación de aire. El estado
estacionario de oxigeno disuelto es 73,5%.
Los valores de In y t se muestran en la
siguiente tabla:
Con los datos obtenidos en la tabla anterior procedemos a
realizar la grafica:

El valor de la pendiente es igual al KLa en este caso es de 0,069 s-1.

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