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Regulação da lipólise nos adipócitos

pela degradação da perilipina

ANNA FRANCHETTI
ERIKA OLIVEIRA
G A B R I E L A VA L I M
GABRIELLA GAMA
Artigo
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Contém cerca de 95% dos lipídeos presente no corpo
Sua principal função é a reserva de energia
Tecido Adiposo
Localiza-se na camada abaixo da pele chamada hipoderme
Podem ser classificados em tecido adiposo unilocular e tecido
adiposo multilocular

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Degradação dos adipócitos em ácidos graxos livres e glicerol
Sua função é manter o nível de energia no corpo
Lipólise É ativada por hormônios como a adrenalina e glucagon
Inativada por insulina

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Esquema da
Lipólise

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Proteína que reveste a superfície das gotículas de lipídeos
Atuam como barreiras para as lipases, restringindo o acesso às
gotículas de lipídeos
Sob estímulos hormonais sofre fosforilação resultando em um
Perilipina aumento da lipólise

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Investigar os mecanismos celulares pelos quais o inibidor da
protease do vírus da imunodeficiência humana, Nelfinavir, reduz a
Objetivo proteína perilipina dos adipócitos.
Investigar se essa diminuição de perilipina associada ao Nelfinavir
desempenha um papel causal no aumento da lipólise basal.

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Procedimento experimental
• Adipócitos diferenciados (3T3-L1), adipócitos derivados de fibroblastos embrionários de
camundongos do tipo selvagens e knock-out (MEF +/+ and MEF -/-)
• Incubação com e sem Nelfinavir variando o período de tempo

• Incubação com e sem leupeptina, NH4Cl e MG-132


• Determinação da concentração de proteína por Bradford e eletroforese em gel
• Determinação da concentração de ácidos graxos livres e glicerol

• RNA isolado das células tratadas com Nelfinavir


• Ensaios com imunofluorescência

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Resultados e Discussão
§A diminuição da perilipina nos adipócitos precede o aumento
na taxa de lipólise basal induzida pelo Nelfinavir
§Após 8h de tratamento houve uma redução de 50% do
conteúdo de perilipina

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Resultados e
Discussão
§A diminuição do conteúdo de perilipina ao
longo do tempo foi uma resposta específica ao
Nelfinavir
§LHS (Lipase Hormônio Sensível) e β-actina não
foram alteradas

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Resultado e Discussão
§Através da imunofluorescência pode-se determinar que não
ocorreram alterações na morfologia da célula

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Resultados e Discussão
§As células de MEF +/+ exibiram um aumento significativo na
lipólise basal depois do tratamento com o Nelfinavir, enquanto
apenas pequenos aumentos foram observados nas células do
MEF -/-

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Resultados e Discussão
§Inibidores da degradação proteica lisossomal, leupeptina e
NH4Cl, impedem a degradação da perilipina induzida pelo
Nelfinavir

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Conclusão

01 02 03
A diminuição de perilipina O estudo da regulação da Estudos futuros poderão
desempenha um papel na taxa lipólise pelo Nelfinavir inibidor determinar se a degradação
lipolítica basal de protease do HIV lisossômica de perilipina é
proporcionou novas perspectivas importante em estados
sobre a degradação de proteínas fisiológicos, tais como a
de perilipina como um obesidade.
mecanismo celular que
provavelmente envolve a
degradação lisossomal.

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Referências

Kovsan, J; Romano, B. R; Souza, C. S; Greenberg, S. A; Rudich. A. Regulation of Adipocyte


Lipolysis by Degradation of the Perilipin Protein. Journal of biological chemistry, 2007.
Nelson, D. L.; Cox, M. M. Lehninger: Princípios de Bioquímica. 6ª ed., Sarvier, 2013.

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Obrigado!

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