MÉTODO DE ANÁLISIS :

ELECTROFORÉTICO
ELECTROFORESIS

• La electroforesis es un método de laboratorio en el que se utiliza una

corriente eléctrica controlada con la finalidad de separar biomoléculas
según su tamaño y carga eléctrica a través de una matriz gelatinosa.
La velocidad de migración
• Inversamente proporcional a la viscosidad del medio.

• Proporcional a la fuerza aplicada al campo.

• Proporcional a la carga neta de la molécula.

• Inversamente proporcional al tamaño de la molécula.

• Inversamente proporcional al coeficiente de fricción.

MOVILIDAD
PARÁMETROS EXTERNOS.
PARÁMETROS EXTERNOS.
- Campo eléctrico.
- Campo eléctrico.
- Temperatura.
- Temperatura.
 PARÁMETROS RELACIONADOS CON EL SOLVENTE Y CON EL SISTEMA DE
 PARÁMETROS RELACIONADOS CON EL SOLVENTE Y CON EL SISTEMA DE
ELECTROFORESIS.
ELECTROFORESIS.
- Viscosidad.
- Viscosidad.
- Fuerza iónica.
- Fuerza iónica.
- La naturaleza de los iones componentes.
- La naturaleza de los iones componentes.
- El pH.
- El pH.
 PARÁMETROS RELACIONADOS CON EL SOLUTO.
 PARÁMETROS RELACIONADOS CON EL SOLUTO.
- La carga.
- La carga.
- La forma y tamaño de los iones.
- La forma y tamaño de los iones.
 EQUIPOS
COMPONENTES
 Fuente de alimentación.

 Dos electrodos.
Ánodo (+)
Cátodo ( - )
 Cubeta.

 Tampón de electroforesis.

 Soporte electroforético (gel).

PRINCIPAL IMPORTANCIA

 La electroforesis es una técnica habitual en el laboratorio

clínico.

 Permite separar especies químicas.

 Los ácidos nucleicos, ADN y ARN, tienen por naturaleza carga

negativa.
VENTAJAS

 Requiere un pequeño volumen de la muestra.

 Rápida separación de la muestra (1min – 45 min).

 Aplicable a todo tipo de sustancias.

 Automatización.
DESVENTAJAS
• Si el papel es fino, se puede desgarrar con facilidad.

• Si el papel es grueso, las bandas se distorsionan.

• Se produce interacción entre las proteínas y los grupos

hidroxilos de la celulosa del papel, por lo tanto la migración se
frena.

• Calidad del papel: 90% de celulosa, absorción de agua y

conductividad eléctrica.

• Efecto electro osmótico ánodo – cátodo.

APLICACIONES
 La primera aplicación en la caracterización y análisis cuantitativo de
moléculas biológicas, principalmente proteínas, péptidos y aminoácidos.

 También encuentra aplicación para la separación de otras sustancias

bioquímicas (insulina, histonas, fibrinógeno, lipoproteínas, enzimas….).

 Aplicación de los geles de poliacrilamida en electroforesis es la

separación de moléculas circulares y lineales de ADN.
GRACIAS