Células plasmáticas

• Migración a sangre periférica (RIP: en pocos días)

• Células plasmática de memoria: son de alta afinidad
• Sobreviven en médula ósea por señales en nichos específicos:
• Pueden encontrarse en bazo o intestino
• Generan entre el 80 y 90 % del repertorio de anticuerpos circulantes.
Células B DE MEMORIA
• Pueden encontrarse en
bazo, médula ósea,
mucosas o intestino.
• 0.005-0.2% de sangre
periférica y de 10-100
veces más en bazo
• Sobreviven por décadas o
incluso de por vida.
• Hay más, proliferan mas
rápido, suelen haber
madurado afinidad.
Anticuerpos

• 1890. Emil Adolf Behring y

Shibasaburo Kitasato
•Difteria y tétanos
•Anticuerpos en “humores”
•Seroterapia

• 1930. Arne W. Tiselius desarrolló el

método de electroforesis libre para la
separación de proteínas en solución

• 1936. Heidelberger. •Purificación de

anticuerpos • Son proteínas
Anticuerpos
• Tiselius y Kabat en 1939.
• electroforesis libre a
muestras de suero
sanguíneo y lograron la
separación en 4 grupos de
proteínas:
Albúmina
α globulinas
β globulinas
γ globulinas
Anticuerpos
• Al inmunizar un conejo con
ovoalbúmina:
La concentración de la
fracción de γ globulina se
incrementaba
La fracción β de las
globulinas, se incrementaba

• Surge el término de
inmunoglobulinas para
referirse a los anticuerpos
Ubicación de las Inmunoglobulinas o
Anticuerpos
• Secreciones
• Mucosas: – IgA primordialmente – IgM
• Calostro: – IgG primordialmente – IgM e IgA
• Leche: – IgA – IgG (rumiantes)
Efectos biológicos de las Inmunoglobulinas
Efectos biológicos de las Inmunoglobulinas
Efectos biológicos de las Inmunoglobulinas
Neutralización
Fijación del Complemento
Fijación del Complemento
Opsonización
Citotoxicidad celular dependiente de
anticuerpo
Eosinófilos
• IgE
• Liberación de enzimas
proteolíticas
• Eliminar parásitos
(nematodos), dañando
su cutícula
Degranulación de células cebadas
• IgE
• Liberación de sustancias
vasoactivas como la
histamina
• Eliminar parásitos
(nematodos), al aumentar la
producción de moco y el
peristaltismo intestinal
• Hipersensibilidad tipo I
• Estructuralmente, las inmunoglobulinas de
cerdo, al igual que en otras especies, son
glicoproteínas formadas básicamente por
cuatro cadenas polipeptídicas. Dos de ellas,
denominadas PESADAS o cadenas H (Heavy:
pesado), con un peso molecular de entre 55
a 77 kilodalton (kDa) y dos LIGERAS o L
(Light: Ligera) con un peso molecular de
entre 23 a 26 kDa. Las dos cadenas H y las
dos L mantienen idéntica estructura entre
ellas. Las dos cadenas pesadas se unen entre
si covalentemente mediante puentes de
azufre y la cadena pesada se une a la ligera
mediante un puente disulfuro. Cada una de
las cadenas consta de una región constante y
otra variable
• Si una molécula de inmunoglobulina es tratada por
proteasas, como la pepsina o la papaina, se parte en dos
fragmentos denominados: Fab, de las palabras inglesas
"antigen binding Fragment" y Fc (Crystalizable Fragment).
En el primer fragmento (Fab), reside la especificidad de
la inmunoglobulina, y por tanto su capacidad para
reaccionar con el antígeno, mientras que el segundo
fragmento (Fc) realiza las funciones efectoras de las
inmunoglobulinas (fijación del complemento, receptores
celulares, etc.)
• Tanto las cadenas pesadas como las ligeras, están
formadas por unas estructuras proteicas conservadas
denominadas "Dominio de Inmunoglobulinas". Estos
dominios están formados por aproximadamente 110
aminoácidos. Las cadenas ligeras están formadas por dos
dominios, uno variable (VL) y otro constante (CL) y las
cadenas pesadas por una parte variable (VH) y tres (IgG
e IgA) o cuatro (IgM e IgE) constantes (CH1, CH2, CH3 y
CH4). Los dominios son idénticos en las dos cadenas
ligeras entre si y en las dos cadenas pesadas.
• En las cadenas H también existe una región adicional,
que no forma parte de los dominios, denominada
región bisagra. La región bisagra está localizada
entre los dominios CH1 y CH2 y permite la movilidad
a las inmunoglobulinas.
• El análisis de aminoácidos de la región bisagra
demuestra que está formada por un gran numero del
aminoácido prolina lo que permite su flexibilidad,
pero también su susceptibilidad al ataque de
proteasas, de ahí, su fragmentación en Fab y Fc.
• Los dominios variables (VL y VH) tienen como
función la unión al antígeno y por tanto, son los
responsables de la especificidad de la
inmunoglobulina, mientras que los dominios
constantes permiten la diferenciación de los cinco
isotipo de cadenas pesadas (m,g,e,a,d) que
formaran las inmunoglobulinas (IgM, IgG, IgE, IgA e
IgD) y de los dos tipos de cadenas ligeras: capa (K) y
landa (l). Así como, son los responsables de las
funciones efectoras de las inmunoglobulinas
(fijación del complemento, receptores celulares,
etc.)

Estructura de los dominios de las inmunoglobulinas. En las cadenas

ligeras existen dos dominios,uno variable (VL) y otro constante
(CL). Las cadenas pesadas presentan un dominio variable (VH)y tres
o cuatro constantes (CH).
• La variabilidad observada en las zonas
variables de ambas cadenas (L y H) se
localiza en tres segmentos, de alrededor
de 10 aminoácidos, denominados
regiones hipervariables, también
conocidos como: CDR1, CDR2 y CDR3
(Complementary Determining Regions o
Región determinante de
Complementariedad). Estos segmentos
forman el denominado sitio de unión con
el antígeno. Por lo tanto, cada molécula
de inmunoglobulina tiene dos sitios de
unión con el antígeno.
• Por otra parte, en la estructura de las
inmunoglobulinas también juega un papel
importante los hidratos de carbono, sobre
todo en la región constante de las cadenas
pesadas, y en particular en la zona CH2 y
en la región bisagra, aunque en las regiones
variables de las cadenas pesadas sólo
representa alrededor de un 15%. El papel
de los azucares no esta del todo claro, pero
parece ligado a su catabolismo y también
afecta a alguna de sus funciones, así se ha
podido comprobar que las IgG
deglicosiladas pierden o disminuyen su
capacidad para unirse a receptores
celulares e inducir ADCC, así como para Esquema dela reacción de citotoxicidad mediada por
activar el complemento. anticuerpos. La especificidad la proporciona el
anticuerpo y la acción citotóxica la célula
 ¿Cómo se regula la formación de inmunoglobulinas?

• ¿Sería lógico disponer de tantos genes predeterminados como epítopos estarán en contacto a lo largo de la vida de un cerdo?
¿Como se podría conocer a priori qué antígenos afectarán a un animal?
¿Cuantos miles de millones de genes serían necesarios?

• Los dominios variables y constantes de las inmunoglobulinas están codificados por genes
distintos, pero no suficientes para la enorme diversidad de inmunoglobulinas que se producen en
la respuesta inmune.

• Para resolver esta aparente limitación, la producción de inmunoglobulinas dispone de una

organización especial del genoma y diferentes mecanismos de expresión, que permiten producir
gran diversidad, con menos genes fijos.
• Organización genética de las inmunoglobulinas porcinas.
• La organización genética para la formación de inmunoglobulinas está muy
bien estudiada en la especie humana y múrina, siendo en la especie
porcina cada vez más conocida.
• A diferencia de la mayoría las proteínas que son codificadas por genes
únicos (copia materna y paterna) las inmunoglobulinas disponen de
múltiples versiones de los diferentes genes. Cada precursor de linfocito B
podrá elegir cualquiera de las diferentes versiones de disponibles que
codifican para las diferentes regiones. Este fenómeno, que es totalmente
aleatorio, es la base principal que permite al sistema inmune producir
anticuerpos con gran diversidad.
• En definitiva, por un lado los genes pueden reordenarse de forma
aleatoria para la síntesis de anticuerpos, y por otra parte, en los
precursores de los linfocitos B pueden producirse procesos de
hipermutación, lo que unido a las múltiples combinaciones entre las
cadenas pesadas y ligeras, permite, que con relativamente pocos genes
fijos, se pueda expresar o codificar la enorme diversidad de anticuerpos
inducidos en la respuesta inmune
 LA DIVERSIDAD DE ANTICUERPOS se puede
producir gracias a:
• Existencia de múltiples genes fijos V, D y J
en la célula madre.
• Modificación del ADN en el paso de
precélulas B a célula B madura.
• Múltiples posibilidades de recombinación
de los cadenas pesadas con la cadenas
ligeras.
• Mutaciones somáticas.
• Recombinaciones múltiples.
Genes de las inmunoglobulinas

• Existen tres grupos de genes ligados a la codificación de las inmunoglobulinas,

localizados en distintos cromosomas.
• Los genes que codifican las regiones constantes y variables de las
inmunoglobulinas se encuentran muy separados en el genoma de todas las
células del organismo, excepto en los linfocitos B. La aproximación de estos
genes durante el proceso de maduración de las células B es lo que les permite
llevar a cabo los procesos de recombinación somática al azar y aumentar las
posibilidades de diversidad
Estos genes están formando por Locus H.
Codifican:
Dominio
variable
V
D

tres locus distintos, denominados Cadenas

pesadas,
J

Locus. dominios Dominio Cm

Es la posición del ADN en el cromosoma, en la cual se encuentra un gen o varios genes que
codifican una o varias proteínas relacionadas. variables y
constante Ca
constantes Cg

Ce

Locus Kappa V
(K). J
Codifican:
Cadenas
ligeras K
Locus V
Lambda (l). J
Codifican:
Cadenas
ligeras l
• El locus H codifica las cadenas pesadas de las inmunoglobulinas. Está formado por dos grupos de
genes. Un grupo codifica los dominios variables de las cadenas pesadas y está formado por tres
genes diferentes:
• GENES V
• GENES D
• GENES J

• Los genes V. Denominados así porque codifican variabilidad.

• Los genes D. Codifican la diversidad.
• Los genes J. Unión.
• Los genes V, son los más abundantes,
codifican la mayor parte de los
dominios variables, en la especie
porcina sólo se ha identificado una
familia de este gen.
• Los genes D son muy diversos
habiéndose descrito desde 1 a más de
15 segmentos son muy variables,
presentando el mayor número de
variaciones en la secuencia de sus
nucleótidos de los tres tipos de genes
del locus H.
• Los genes J codifican la región variable,
en el cerdo sólo se ha encontrado un
segmento J (en el ratón hay cuatro y en
el hombre, nueve).
• La parte constante de las cadenas pesadas está codificada
por los genes Cm, Ce, y Ca, de los que en el cerdo sólo se ha
encontrado un tipo de gen y que codificarían las cadenas
pesadas de las inmunoglobulinas IgM, IgE e IgA,
respectivamente. Sin embargo se han descrito ocho copias de
genes correspondientes al gen Cg. El estudio de estos genes ha
puesto de manifiesto, que en el cerdo, al menos existen cinco
subclases de IgG, que estarían codificadas por los genes Cg1,
Cg2a, Cg2b, Cg3 y Cg4.
• El Locus Kappa (K) sólo presenta un segmento
denominado CK. El locus lambda (l) está formado por
dos genes y dos segmentos. Los genes localizados en
estos locus son los responsables de la codificación de
las cadenas ligeras Kappa y Lambda.

Esquema de la producción de la
cadena ligera de las inmunoglobulinas
porcinas
• Genéticamente también se regula el cambio de Isotipo de las inmunoglobulinas. Generalmente, la
respuesta inmune comienza con la producción de IgM para después pasar a IgG o IgA o IgE, cuyo fragmento
Fc tiene distintas propiedades biológicas. En el extracto 5' de todos los genes CH, existe una secuencia
denominada S que es la que permite el cambio de isotipo. La diferencia está producida por la delección de
genes.
 Variantes de las inmunoglobulinas encontradas.
Gracias a los anticuerpos monoclonales se han podido estudiar la
variabilidad genética de las inmunoglobulinas porcinas, pudiéndose
diferenciar tres tipos:
• Variantes ISOTÍPICAS
• Variantes ALOTÍPICAS
• Variantes IDIOTÍPICAS

Las variantes Isotípicas están codificadas por genes que se

encuentran en la misma especie animal, por lo que ese tipo
de inmunoglobulinas será común entre todos los miembros
de la especie porcina. La parte de la molécula de una
inmunoglobulina que permite diferenciar los distintos
isotipos se localiza en las regiones constantes de las cadenas
pesadas. En el cerdo se han caracterizado cuatro isotipos
principales de inmunoglobulinas denominados IgM, IgA, IgG
e IgE.
• Las variantes Alotípicas se
encuentran solamente en las
inmunoglobulinas de algunos
animales de la especie porcina, es
como un marcador alélico que se
expresa en las zonas constantes de
las cadenas pesada y ligeras de las
inmunoglobulinas de algunos
animales de esa misma especie
• La variantes Idiotípicas se
pueden encontrar en un solo
individuo de una misma especie
o en varios, dependiendo si
estuvieron o no en contacto con
el mismo antígeno. Están
inducidas por los diferentes
epítopes de los antígenos y se
localizan en las zonas
hipervariables de las cadenas
pesadas y ligeras
Citocinas:

• Glicoproteínas
• Producidas por distintas células
• Vida media corta (30 min)
• Alta actividad biológica
• Tienen receptores específicos en muchas células

• Productos de secreción de los leucocitos y algunas otras células

• Participan en los procesos de la respuesta inmunitaria al generar una
intercomunicación entre los linfocitos, células fagocíticas y células
hematopoyéticas
Propiedades de las citocinas

• Se unen a receptores específicos en las membranas de las células blanco

• Su efectividad en muy alta (Pm)
• Al unirse a su receptor, activan una serie de eventos celulares que
culminan con la activación de un gene
• Regulan la intensidad y duración de las respuesta inmunitarias mediante
- Pleiotropía
- Redundancia
- Sinergismo
- Antagonismo
- Efecto en cascada
Clasificación según su efecto
• Antivirales
• Pro inflamatorias
• Reguladoras de la respuesta adaptativa
• Hematopoyéticas
Interferones: principal mecanismo
de inmunidad innata contra virus
• Tipo I
IFN alfa
IFN alfa - Producido por los leucocitos
IFN beta - Propiedades antivirales y
antitumorales
IFN omega
IFN βeta
IFN tau - Producido por fibroblastos y células nucleadas
- Propiedades antivirales
IFN kappa - Induce la expresión de otras citocinas

• Tipo II
IFN gama
Clasificación según su efecto:
• Pro-inflamatorias:
TNF alfa, IL1, IL6, IL8
Inducen moléculas de adhesión en endotelios vasculares
Favorecen la producción de proteínas de fase aguda en el hígado
- Proteína C reactiva
- Factor amiloide sérico
- Ceruloplasmina
- Fibrinógeno
Clasificación según su efecto:
• Hematopoyéticas
IL3, IL5, IL6, IL7, GM-
CSF
Clasificación según su efecto
• Moduladoras de la
respuesta inmune
especifica:
- IFNg, IL12
- IL2, IL4, IL6
- IL 25, IL27
- TGFb, IL10, IL17
Linfocitos T cooperadores
• Son linfocitos
productores de
citocinas
• Se clasifican de acuerdo
a las citocinas que
producen
• Su principal función es
la de regular las
respuestas inmunitarias