GENES INVOLUCRADOS EN

LA FORMACIÓN DE
MERISTEMOS

Dra. Antonietta Gutiérrez-Rosati

 ¿QUE ES UN MERISTEMO?

 ¿DONDE SE ENCUENTRAN?

 ACTIVIDAD MERISTEMÁTICA

 CLASIFICACION

 CARACTERÍSTICAS CITOLOGICAS Y
DE CRECIMIENTO
¿QUE ES UN MERISTEMO?
 tejidos perpetuamente jóvenes
 crecimiento de la planta en el sentido
amplio del término: aumento de masa,
tamaño u ambos
 crecimiento con división celular y
engrandecimiento celular limitado
 crecimiento sin división celular y
engrandecimiento celular pronunciado
 El cambio es más o menos gradual
¿DONDE SE ENCUENTRAN
LOS MERISTEMOS?
Actividad meristemática
 AUMENTAN EL NUMERO DE
CÉLULAS DE LA PLANTA
 SE PERPETÚAN POR SÍ MISMOS
 DIFERENCIACION GRADUAL
(SINTETIS DE PROTOPLASMA,
AUMENTO DE TAMAÑO Y DIVISIÓN)
 DESDIFERENCIACIÓN Y
REDIFERENCIACIÓN
 Clasificación de los meristemos
S E G Ú N L A P O S IC IÓ N E N E L C U E R P O D E L A P L A N T A :
M E R IS T E M O S A P IC A L E S
M E R IS T E M O S L A T E R A L E S
E J .: C A M B IU M V A S C U L A R Y C A M B IU M S U B E R O S O
M E R IS T E M O S IN T E R C A L A R E S
E J .: E N T R E N U D O S Y V A IN A S D E G R A M Í N E A S
SEG Ú N LA N A TUR A LEZA D E LA S C ÉLULA S:
M E R IS T E M O S P R IM A R IO S
M E R IS T E M O S S E C U N D A R I O S
P R O M E R IS T E M A
P R O C A M B IU M O P R O V A S C U L A R
P R O T O D E R M IS
M E R IS T E M O F U N D A M E N T A L
 Características citológicas y de
crecimiento
E U M E R IS T E M O
L A A U S E N C IA D E U N A F R A N C A V A C U O L IZ A C IÓ N
C É L U L A S P E Q U E Ñ A S Y E S E N C IA L M E N T E IS O D IA M É T R IC A S
M EM B R A N A S D ELG A D A S
A B U N D A N T E C IT O P L A S M A

D IV IS IO N E S
A N T IC L IN A L E S O R A D I A L
P E R IC L IN A L E S O T A N G E N C IA L E S .

M E R IS T E M O S E S P E C IA L E S
M E R IS T E M O E N M A S A : E J . D U R A N T E L A F O R M A C IÓ N D E E S P O R A S Y
ENDOSPERM O.
M E R IS T E M O E N F IL A : E J . E N E L D E S A R R O L L O D E L C Ó R T E X D E L A R A Í Z
Y EN EL D E LA M ÉD ULA Y C Ó R TEX D EL TA LLO .
M E R IS T E M O L A M IN A R : E J . L IM B O F O L IA R D E L A S A N G IO S P E R M A S .
Meristemos apicales
 Son células iniciales o derivadas inmediatas
 Incluyen también longitudes variables de la
raíz y del tallo (ápice de la raíz y ápice del
tallo)
Protomeristemo
 Parte distal del meristemo y menos
diferenciada
 Incluye células iniciales y derivadas mas
recientes
Promeristemo
 Incluye solo células iniciales

Células iniciales
 Se dividen en dos células hermanas:
 Una permanece en el meristemo apical
 La otra se suma a los tejidos caracteristicos de
la planta
 Depende de su posición en el
protomeristemo
 Son de numero variable en raíz y tallo.
 Células apicales iniciales:
 Presentan una o más filas:
• 1 fila: Todas las células de la planta derivan de ella
• Más filas. Diferentes partes de la planta derivan de
diferentes grupos de células iniciales
Células apicales en brotes y
rizomas
A. Células
piramidales
B. Células
lenticulares
C. Células apicales
del brote
D. Células
apicales del
rizoma
Apices de brotes de Datura sp.
Teoría “Célula apical”
 Célula apical: Unidad funcional y
estructural constante de los meristemos
apicales que gobierna el proceso total de
crecimiento.
 Surge: Teoría del histógeno (Hanstein)
 Cuerpo principal de la planta se origina de
una masa meristemática (histógeno) que
tiene tres partes:
 Dermatógeno: Capa mas alta (epidermis
primordial)
 Periblema: Da origen al cortex
 Pleroma: Forma la masa interna del eje.
Teoría “Cuerpo-túnica”(Schmidt-
1924)
 Angiospermas:
 Meristemo apical: Dos zonas de tejidos
• Túnica: Una o más capas periféricas de células.
Divisiones anticlinales.
• Cuerpo: Masa celular rodeada por la túnica.
Divisiones en varios planos.
 Gimnospermas:
 Capa de multiplicación independiente (parecido
túnica).
 Zonación: Basados en planos de división y en
diferenciación histológica y citológica. Grado
de actividad meristemática de los componentes
celulares
Delimitación de zonas y modo de
crecimiento en el ápice del brote
de Ginkgo biloba
Esquema del ápice de un brote de
Pinus strobus
DIFERENCIACION
 Evolución de las células derivadas de los
meristemos en elementos de diversos
sistemas de tejidos de la planta
 Comprende procesos de naturaleza
morfológica y fisiológica que determina la
especialización de las células
 Diferenciado: Cierto grado de desarrollo.
Presencia de variaciones en la estructura y
función por desarrollo de célula, tejido,
sistema u órgano.
Base celular de la diferenciación
 Ocurren alteraciones en el contenido de
células como aumento del contenido
vacuolar, desarrollo de plastidios y
adquisición de color
 En membrana: aumento de espesor primario
o secundario, composición química varia
por lignificación y suberificación.
 Una mayor diferencia entre células es la
desigualdad entre su crecimiento
Causas de la diferenciación
 Crecimiento y diferenciación durente el
desarrollo están regulados para que la planta
tenga una forma especifica, es decir,
presente morfogénesis.
 Morfogénesis se refiere al desarrollo
externo e interno.
Mutaciones que trastornan el
desarrollo de órganos vegetativos
 MUTACION CURLY (crL)
 No hay obvias alteraciones en el meristemo
apical
 Hojas se expanden anormalmente
 Lesiones en el ápice que no muestra
alteraciones en el meristemo, pero si en
primordio.
 Mutaciones que desorganizan el meristemo
apical de la yema vegetativa
 A diferencia de la mutación crL, muchas otras
mutaciones que alteran el ápice de la yema
vegetativa, también desorganizan el meristema
apical.
 Mutante forever young (fey)
• Desorganización en el ápice de la yema, pero los
cotiledones son normales
• el hipocotilo y las raíces son iguales al de la
variedad wild, indicando una lesión primaria del
meristemo y/o del ápice.
 • Cuando la planta crece a 18°C el fenotipo fey es
menos severo pero se distingue del wild
• A 25°C, el fenotipo es mas diferenciable del
silvestre y se forman primordios florales anormales.
• Mutación fey es sensible a la temperatura.
• El meristemo apical afectado tiene una forma
aplanada y sus células desorganizadas
 Mutante fully fasciated (fuf)
• Desorganización en el ápice e incremento en el
numero de órganos.
• Fenotipo de la mutación es un tallo fusionado y
aplanado
• Incremento en el tamaño apical vegetativo con un
diámetro casi el doble que el silvestre
 Mutante disrupted (dip)
• Perturba el ápice y el meristemo que es deformado.
• Hojas arrugadas angostas y alargadas con células
desorganizadas
• Frecuentemente altera la forma del cotiledón
 Mutante schiziode (shz)
• Alteraciones en la zona de la nervadura
• A los diez días se observan alteraciones intra e
intercelulares
• A los 16 días, las células del tallo principal muestran
necrosis
Conclusiones
 Se dividen en tres clases:
 Lesiones en el ápice, que no muestra
alteraciones aparentes en el meristemo apical,
pero afecta el proimordio (crL)
 Lesiones en el meristemo apical que también
afecta el primordio (dip, fey y shz)
 Lesiones en el meristemo apical que altera el
tamaño del meristemo y el numero de hojas,
pero no su morfología (fuf)
Formation of the shoot apical
meristem in Arabidopsis thaliana:
an
analysis of development in the wild
type and in the shoot meristemless
mutant
Sumario
 Meristema apical del brote primario se
inicia en la embriogénesis tardía
 Gen SHOOT MERISTEMLESS
 shoot meristemless-1 bloquea la iniciación
del meristemo apical del brote (SAM) sin
mayores efectos en el desarrollo
 relacionado con el meristema del brote del
embrión.
INTRODUCCION
 Tejidos de células en plantas maduras derivan de
células especializadas (meristemas).
 Meristemos de brote apical (SAM): Montículo de
citoplasma denso no diferenciado, responsable de
grandes porciones de la planta (tallos, hojas, flores)
 Angiospermas: Teoría Túnica- Corpus
 Arabidopsis thaliana: Túnica (2 capas) sobre corpus.
Organización del meristemo es consecuencia de
diferenciaciones en la configuración de la división
celular.
 Meristemos del brote apical de Angiospermas se
forman bajo 3 condiciones:
a) Durante la embriogénesis
b) En las axilas de las hojas
c) De manera adventicia
 Aún se desconoce el mecanismo de iniciación
meristemática y de los factores de crecimiento que
regulan la formación de meristemos adventicios in
vitro.
 DESARROLLO DEL TRABAJO:
 Para entender el mecanismo de iniciación
meristemática se ha caracterizado la anatomía de
desarrollo de la iniciación meristemática en
Arabidopsis thaliana y se investigan las mutaciones
de este proceso.
 Se describe la iniciación de meristemos apicales en
embriones de Arabidopsis thaliana de tipo silvestre y
se describe el efecto de una mutación recesiva,
inducida por EMS, logrando una mutación en el gen
SHOOT MERISTEMLESS (stm).
 Se presenta esta mutación específica, bloqueando la
iniciación del SAM sin afectar el crecimiento o
viabilidad del embrión.
Puntos preliminares
 Se conocía bien el desarrollo del embrión,
pero no del meristema precisamente
 No hay migración de células en plantas, la
forma de las paredes puede servir como
marco para el análisis.
 Los patrones de desarrollo embrionario en
Brassicaceae son conocidos y predecibles.
Desarrollo
Desarrollo
El locus SHOOT
MERISTEMLESS
 Mutantes jóvenes stm-1 carecen de SAM,
fuera de esto son normales.
 A los dos días no hay evidencia de SAM
 Las células que deberían formar el SAM
son más pequeñas, pero parecidas a las del
cotiledón y el hipocotilo.
Embrión maduro
2 días postgerminación
 Las células
meristemáticas son
más densas, teñidas
más intensamente
 En ausencia de SAM,
los cotiledones están
yuxtapuestos (flecha)
4 días postgerminación
 El homocigota para el
gen mutante stm-1 no
presenta hojas en la
junción de los
cotiledones, indicando
la carencia de SAM.
 Derecha: control wild.
 Si el efecto de la mutación en stm es durante
o justo después del estadío torpedo, no se
podría distinguir diferencias en los torpedos
(17/17)
 La evidencia estaría en el siguiente estadío:
Doblez del cotiledón (4/17). En los
normales, el SAM comienza a formarse, en
los stm-1, el arreglo es igual que en el
torpedo.
Diferencias entre wild y mutante:
 La dirección del doblez del
cotiledón superior sobre el embrión.
 El radio de curvatura de las paredes
que delimitarían las tres capas
 El número de células que muestran
cuerpos intracelulares
Tinción con Azul de Metileno
Muerte celular?
 Si el SAM se formara
para morir, quedarían
paredes celulares
vacías, pero en una
muestra de 50
embriones, todos se
teñían con azul de
metileno (nucleo y
nucleolo por pH)
 Analizando el torpedo y el doblez del
cotiledón en embriones de stm/+ se refuerza
la hipótesis del bloqueo de SAM entre estas
etapas de la embriogénesis
 El bloqueo puede ser por:
 Incapacidad de células de SAM para dividirse
 Falla en las ápice de tres capas para mantener el
patrón de división de capas paralelas
Efecto secundario
14 días de edad:
 Hojas secundarias
emergen de estas hojas
 Causado por la
imposibilidad de
inhibición por un
SAM, ya que este no
existe.
Formación de brotes adventicios
 Se cultivan explantes de raíz de plantas stm-
1 y wild
 Ambos forman callos y nódulos verdes
 Wild: Formación de brotes florales normales
como de brotes y hojas anormales
 stm-1: Formación de brotes y hojas anormales,
pocos produjeron estructuras casi normales;
pero de estas no se consiguió ningún brote
floral
 La interferencia de stm-1es en la iniciación
del SAM durante embriogénesis y también
la iniciación del brote en cultivo.
 Si stm-1 es una mutación de pérdida de
función (como sugiere su carácter recesivo)
se define la existencia de un locus requerido
para la iniciación del SAM embrionaria y
postembrionariamente.
DISCUSIÓN DE RESULTADOS
Y CONCLUSIONES
 El meristemo apical del brote primario en
Arabidopsis thaliana es iniciado durante la
embriogénesis.
 Los meristemos del brote apical adicionales son
formados post embrionariamente (axila de hoja o
adventicios de explantes de raíces cultivadas in
vitro).
 Mutación stm-1(naturaleza recesiva): impide la
formación del SAM primario durante la
embriogénesis de SAM adventicio.
 Hipótesis de trabajo:
Producto del gen SHOOT MERISTEMLESS de
tipo silvestre es requerido para la iniciación del
SAM (embrionaria y post-embrionariamente).
 Los productos claves en la regulación de este
sistema (producto génico STM) controlan tanto la
iniciación del meristemo como el mantenimiento.
 Defecto en stm es específico para SAM: el gen
STM funciona en el desarrollo del meristemo
apical del brote.
 SHOOT MERISTEMLESS carece del meristemo
apical del brote: se podrían producir estructuras
con características de brote, sugiriendo un modelo
de control de desarrollo de brote específico
 Mutaciones como Topless o Gurke (carentes de
cotiledones) y SAM: pueden definir genes cuyos
productos génicos son requeridos para formación del
brote.
 La iniciación de SAM es un evento tardío en la
embriogénesis.
 Mutantes stm en Arabidopsis thaliana: bloquean el
desarrollo del SAM en el estado torpedo.
 2 hipótesis:
a) Diferente configuración de las 3 capas
b) Primera estructura formada por SAM son los
cotiledones.
 SAM: arreglo de células definido por Túnica Corpus
no aparece hasta después de la iniciación de los
cotiledones.