ClaseAI-I-16 - Turbidimetria y Nefelometria

Análisis Instrumental
Turbidimetría y nefelometría
Turbidimetría y nefelometria
Temas:
- Introducción y fundamentos
- Métodos basados en la dispersión
- Turbidimetría (Instrumentación, determinación, análisis cuantitativo y
aplicaciones)
- Nefelometría (Instrumentación, determinación, análisis cuantitativo y
aplicaciones)
Turbidimetría y Nefelometría
Introducción y fundamentos
Dispersión de la radiación
dispersión por moléculas o

agregados de moléculas de
Dispersión Rayleigh dimensiones menores que la
longitud de onda de la radiación.
dispersión por moléculas de

Tipos de Dispersión por dimensiones coloidales
dispersión moléculas grandes
La radiación dispersada sufre

cambios cuantizados de
Dispersión Raman frecuencia, debido a transiciones
entre niveles de energía
vibracional de la molécula
Dispersión de la radiación monocromática por

partículas en solución.
 La  de la radiación incidente, dispersada y

transmitida es la misma.
 La intensidad de la radiación dispersada no es la
misma en todas las direcciones
 La cantidad de radiación dispersada depende de la
concentración de las partículas en solución.
Métodos basados en la dispersión

Concentración Dispersión Puede medirse Turbidimetría
alta alta P y Po
Concentración Dispersión No puede Nefelometría

baja baja medirse P y Po
Turbidimetría
Instrumentación para Turbidimetría
Turbidímetros
Fuente: Lámpara de wolframio

Arco de mercurio
Filtro: Absorción
Cubeta: Cilíndricas o de caras
planas
Espectrofotómetros Detector: fototubos
fotodiodo semiconductor
Determinación de la Turbidimetría
Determinación de la Turbidimetría
P f
 log  bc
Po 2.303
f
T Turbidancia
 f cte dependiente del tamaño 2.303
de la partícula a una  dada
P
 b espesor de la cubeta
 log  Tbc
Po
 c concentración de partículas
dispersantes
Análisis cuantitativo por Turbidimetría
 Determinar la T de soluciones con concentraciones conocidas
 Construir la curva patrón T vs c
 Determinar la T para la muestra de concentración desconocida
 Determinar la concentración por interpolación

Aplicaciones de la Turbidimetría
 Análisis orgánico:
Medición de la transparencia de alimentos (melazas, jugos y
bebidas alcohólicas)
 Análisis inorgánico:
Concentración de humos, polvo, nieblas, aerosoles
Tratamiento de aguas (medir la transparencia)
 Análisis bioquímico:
Crecimiento bacteriano (sensibilidad a antibióticos)
Medición de la coagulación de la sangre
Nefelometría
Instrumentación para Nefelometría
Fuente: Laser Helio-Neón

Lámparas de halógeno
Lámparas de Xenón
Filtro: Monocromador
Cubeta: Cilíndrica o de caras
planas de cuarzo
Detector: Tubos
fotomultiplicadores
Angulo de dispersión: 30 a 70 º
Determinación de la Nefelometría
Determinación de la Nefelometría
No hay una ecuación teórica
sencilla que relacione la intensidad
de la luz dispersada con la
concentración.
La intensidad de la luz dispersada

depende de:
De forma empírica
 Propiedades de la suspensión
Ps  ksPoc  ángulo de dispersión
 geometría del instrumento usado


 Determinar Ps/Po de soluciones con concentraciones conocidas
 Construir la curva patrón Ps/Po (o también log Ps/Po) vs c
 Determinar la Ps/Po para la muestra de concentración desconocida
 Determinar la concentración por interpolación

Aplicaciones de la Nefelometría
 Análisis bioquímico:
Análisis de proteínas
Análisis de enzimas
Determinación de glicógeno en suero sanguíneo
Determinación de ribonucleasa
Medición de complejos antígeno-anticuerpo
Conteo de células sanguíneas

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Análisis Instrumental

dispersión por moléculas o

dispersión por moléculas de

La radiación dispersada sufre

Dispersión de la radiación monocromática por

 La  de la radiación incidente, dispersada y

Métodos basados en la dispersión

Concentración Dispersión No puede Nefelometría

Fuente: Lámpara de wolframio

Análisis cuantitativo por Turbidimetría

 Determinar la T de soluciones con concentraciones conocidas

 Construir la curva patrón T vs c

 Determinar la T para la muestra de concentración desconocida

 Determinar la concentración por interpolación

Fuente: Laser Helio-Neón

La intensidad de la luz dispersada

 geometría del instrumento usado

Análisis cuantitativo por Turbidimetría

 Construir la curva patrón Ps/Po (o también log Ps/Po) vs c

 Determinar la Ps/Po para la muestra de concentración desconocida

 Determinar la concentración por interpolación

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