MÉTODOS DE

ESTUDO EM
PATOLOGIA
Descritivo, Interpretativo,
Investigativo.

Dinâmico
(Experimenta
l)
Patologia Geral Patologia Geral Patologia Geral Patologia Geral Patologia Geral Patologia Geral

ANTES DE TUDO, É BOM SABER:

O QUE FAZ UM PATOLOGISTA?

Um clínico geral usa termômetro, estetoscópio,

plexímetro, etc.

Um cirurgião usa bisturi, pinças, porta-agulhas,

etc.

Um patologista usa:

•Mala (e técnica) de necropsia + olhos treinados

e atentos.

•Microscópio óptico + lâminas

Professor João Paulo de tecidos lesados
Machado – jpmvet@gmail.com
Todo profissional da área da saúde deve
saber:

O IMPORTANTE NÃO É OLHAR

SIMPLESMENTE,

MAS SIM

ENXERGAR!
Existem diversos métodos para o
estudo da patologia

–Estudo morfológico
–Imunoistoquímica
–Cultura celular
Microbiologia
–Citologia
–Histologia e Histoquímica
–Morfometria
–Microscopia Eletrônica
–Técnicas de biologia molecular
Método de apoio ao estudo em Patologia
1) Estudo Morfológico

O estudo morfológico envolve a avaliação

macroscópica dos tecidos e, subsequentemente,
a retirada de amostras (biopsias) para avaliação
microscópicas (HISTOPATOLOGIA).
primeiro grande passo é saber descrever uma lesã
 Formas de obtenção de amostras:

Biópsias
•Ablativas ou excisional: retirada completa da lesão
•Incisional: retirada de parte da lesão
•Aspirativa: aspiração utilizando uma agulha (em
órgãos internos e geralmente guiada por ultrasson)

Peças cirúrgicas
Remoção cirúrgica de tumores (neoplásicos ou não)

Necropsia ou autópsia
Exame post-mortem dos órgãos para examinar e
detectar a causa da morte
Pode ser completa ou parcial
Existem roteiros para se realizar necropsias em
Os tecidos obtidos devem ser processados
histologicamente.

Fixação (formol a 4%)

↓
Desidratação
↓
Diafanização
↓
Inclusão em parafina
↓
Microtomia
↓
Reidratação
↓
Coloração
↓
Montagem
↓
Observação ao microscópio

–Coloração universal: HE (Hematoxilina e Eosina)

Método de apoio ao estudo em Patologia
2) Imunoistoquímica

Nesta técnica são utilizados anticorpos

específicos para um determinado antígeno.

Estes anticorpos são marcados com substâncias

que produzem cor.

Os anticorpos são colocados para reagir com os

tecidos em cortes histológicos.
 Exemplo: Vamos procurar a “proteína X” (presente
apenas no linfoma). Então, foi produzido um anticorpo em
coelho capaz de se ligar especificamente a ela.

Peroxidase (substância que

produz cor)secundario possui um sítio de
O anticorpo
ligação para a substância que possui cor

Anticorpo
(cabra anti-IgG de coelho)
secundário

Antígenos Anticorpo
(proteína X) primário
(IgG de coelho anti-proteína X do
linfoma)

Tecido
Exemplo: Imunoistoquímica para RAIVA
Neurônios e células da glia marcados em
marrom, onde vírus está presente.
Método de apoio ao estudo em Patologia
3) Cultivo Celular
O cultivo de células é muito importante para se
estudar:

•Mecanismos de infecção dos microrganismos

(interações entre hospedeiros e patógenos);
•Cicatrização;
•Pesquisas com células tronco;
•Expressão de proteínas celulares;
•Mecanismos relacionados a inflamação;
•Etc.
 Método de apoio ao estudo em Patologia
4) Cultivo Celular (Microbiológico)

Serve para isolar (identificar) ou ate mesmo

proliferar vírus, bactérias e fungos. Isso permite
o diagnóstico de doenças e até mesmo o estudo
do comportamento dos agentes infecciosos.
Exemplo: Isolamento de Mycobacterium tuberculosis
dos pulmões de paciente com tuberculose.
 Método de apoio ao estudo em Patologia
5) Citologia

Por meio de raspados, aspirações de tecidos,

esfregaços, etc., podemos avaliar a morfologia
das células e emitir diagnósticos de neoplasias,
inflamações, etc.
Método de apoio ao estudo em Patologia
6) Histoquímica e Citoquímica
COVER ILLUSTRATION: Renal glomerulus; dog. Type IV collagen (green) and type III collagen
(red) in glomerular tufts localized along the epithelial and luminal sides respectively, with a linear
appearance. Indirect double immunofluorescence, using primary antibodies for type III or type IV
collagen and RITC or FITC conjugated second antibodies (see Kamiie et al. pp. 688-692. Vet Pathol
July 2009, Vol. 46, No. 4).
Método de apoio ao estudo em Patologia
7) Morfometria
Método de apoio ao estudo em Patologia
8) Microscopia eletrônica
Célula 10-20m
Núcleo 5-7m
Mitocôndria 1m
Lisossoma 0,5m = 500nm
Microtúbulo 24nm ___
Glicogênio 40nm ___
Membrana 10nm ___
Microfilamento 5-10nm
Ribossoma 14nm
Tamanhos regulares – podem ser utilizados como
referência em microscopia eletrônica
Método de apoio ao estudo em Patologia
9) Técnicas Moleculares (PCR)
Reacção em cadeia da polimerase (em inglês
Polymerase Chain Reaction - PCR) é um método de
amplificação (de criação de múltiplas cópias) de DNA
(ácido desoxirribonucleico) sem o uso de um
organismo vivo, por exemplo, Escherichia coli
(bactéria) ou leveduras.

Inventada em 1983 por Kary Mullis, a PCR é uma das

técnicas mais comuns utilizadas em laboratórios de
pesquisas médicas e biológicas para diversas tarefas,
como o sequenciamento de genes e diagnóstico de
doenças hereditárias, identificação de fingerprint
genético (usado em testes de paterninade e na
medicina forense), detecção de diagnóstico de
 Campanha 15 minutos

Gaste 15 minutos do seu dia

folheando a matéria dada em
sala de aula (APENAS 15
MINUTOS!)

Você não vai deixar de fazer

nada do que gosta por isso e vai
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