UNIVERSIDADE ESTADUAL DE CAMPINAS

FACULDADE DE ENGENHARIA DE ALIMENTOS

DEPARTAMENTO DE CIÊNCIA DE ALIMENTOS - DCA
 
ANÁLISE DE ALIMENTOS POR ESPECTROMETRIA
 
Fábio Fernandes de Araújo/RA: 209392
 Introdução

 A ocratoxina A (OTA) é uma micotoxina natural produzida por vários

tipos de fungos, particularmente por aqueles pertencentes a Aspergillus e
Penicillium.

 Após a ingestão de alimentos contaminados, OTA tem efeitos

nefrotóxicos e neurotóxicos e é acumulado em tecidos adiposos com
taxas de remoção muito baixas.
 Introdução

 Além disso, a OTA foi classificada como um potencial carcinógeno para

seres humanos.

 A existência de resíduos de OTA no vinho é tida como um problema

mundial, com níveis quantificáveis ​relatados em vinhos produzidos em
diferentes áreas, da Ásia, América do Sul e África do Sul.
Introdução

 A espectrometria de massa LC (MS / MS) pode ser considerada uma

excelente técnica para determinação de ocratoxina, pois apresenta
sensibilidade e seletividade do monitoramento de reações múltiplas,
permitindo uma redução significativa na preparação da amostra.
 Objetivo

O objetivo deste estudo foi estabelecer se o QTOFMS híbrido, após a

separação LC, poderia ser usado para a seleção e determinação quantitativa
de níveis de OTA em vinhos com diferentes características (vinhos secos e
doces) depois do enriquecimento da amostra utilizando cartuchos SPE de
fase reversa.
 Objetivo

O Q-TOF é um espectrômetro de massas com alta resolução e exatidão de

massa. Possui um quadrupolo como “filtro de massa” e uma célula de
colisão para experimentos de MS/MS, que proporciona uma maior exatidão
e confiabilidade de massa na fragmentação de íons e nos resultados de
procura em banco de dados.
 Material e Métodos

Padrões e solventes

 O padrão de OTA foi comprado da Sigma Aldrich (Milwaukee, WI, EUA).

 O vinho sintético consistiu em solução etanólica a 12%, contendo 3,5 mg mL de
ácido tartárico, ajustado a pH 3,5.
 Foram utilizado cartuchos de fase reversa e modo misto contendo 60 mg de
sorvente.
 Vinhos comercializados, de diferentes denominações geográficas, produzidos na
Espanha foram utilizados neste estudo.
 Material e Métodos

Condições de determinação

 Os compostos foram determinados usando um sistema LC-ESI-QTOF-

MS adquirido da Agilent Technologies (Wilmington, DE, EUA).

 O espectrômetro de massas era um modelo Agilent 6520, equipado com

uma fonte ESI de dupla pulverização e uma célula de colisão hexapole.
Material e Métodos

 A fonte ESI usou nitrogênio (99,999%) para nebulização (30 psi) e

também como gás de secagem (330? C, 10 L min). Os analitos foram
ionizados em ESI (+), aplicando uma tensão capilar de 3500 V.

 Espectros de varredura MS (m / z de 100 a 1400 unidades) foram

gravadas simultaneamente, na mesma taxa, ao longo de toda a corrida
cromatográfica.
 Material e Métodos

Eficiência de extração e quantificação de amostras

A eficiência de extração (EE) do processo SPE foi calculada como a relação

entre as respostas (áreas de pico sem correção IS) medido para amostras de
vinho com ponta e os extratos de a mesma amostra (fortificada depois de
terminar o passo SPE) multiplicada por 100.
 Material e Métodos

Eficiência de extração e quantificação de amostras

As recuperações globais (R) do procedimento foram definidas como R =

[(Cs- Cb) / Ct] x 100. Cs e Cb foram determinados contra a calibração
curvas obtidas para soluções padrões preparadas em acetonitrilo: água (1:
1), contendo um 0,1% de ácido fórmico.
Resultados e
Discussão
Resultados e
Discussão
Resultados e
Discussão
Resultados e
Discussão
Resultados e
Discussão
Resultados e
Discussão
Resultados e
Discussão
Resultados e
Discussão
Resultados e
Discussão
 Conclusões

LC-QTOF-MS, seguindo de SPE de fase reversa fornece uma LOQ

suficientemente baixa para a determinação de OTA em amostras de vinho,
com características diferentes, em níveis abaixo do limite estabelecido para
esta micotoxina em vinho seco.
O procedimento desenvolvido neste estudo alcança recuperações
quantitativas com pequenas mudanças na eficiência da ionização ESI entre
padrões puros e extratos de vinho.
 Conclusões

Além disso, a capacidade precisa da LC-QTOF-MS permitiu a triagem de

amostras de vinhos processados ​para análogos de OTA para quais os
padrões comerciais não estão disponíveis. A OTA foi notada em vários
vinhos doces, a níveis abaixo da concentração máxima permitida em vinhos
secos, juntamente com o seu derivado etilado (OTC).
OBRIGADO PELA ATENÇÃO