Cromatografia de Afinidade

Aline Cardoso Bárbara Alamis Gabriel Branzani Isabela Rovero Marcos Maldonado Rafael Medeiros 3º A ± Farmácia FMU - Liberdade

O que é? Cromatografia de afinidade é uma técnica que utiliza propriedades físico-químicas para separação dos componentes de uma mistura protéica. .

Como funciona? A Cromatografia de Afinidade se baseia numa especificidade biológica da proteína que se pretende analisar. tal como a afinidade de uma enzima a um substrato ou a ligação entre antígeno e anticorpo. .

e outra. .Como funciona? Consiste na separação de proteínas de uma mistura e é dividida em duas fases: uma estacionária. aonde há a eluição das proteínas indesejadas restando somente aquela a ser estudada. aonde a proteína a se analisar se liga a polímeros com ligantes específicos contidos na parede do tubo.

que serão filtradas do tubo. que logo atrairá a proteína A para si. que se liga facilmente com glicose. Portanto. a proteína de interesse se liga ao composto contido no tubo.Fase Estacionária Na fase estacionária. C e D. B. a parede do tubo aonde essa mistura será despejada conterá glicose. desejamos estudar a proteína A. conseqüentemente separando-a das demais. . Por exemplo: numa mistura de proteínas A.

guanidina. sendo despejada. é adicionado uma solução de resíduos de glicose que fazem com que a proteína A se desprenda da parede do tubo. em meio a solução. etc) desprendendo a proteína da parede do tubo. No exemplo. .Eluição Após restar no tubo apenas os ligante com as proteínas de interesse. é despejado no tubo uma solução contendo os mesmos ligantes contidos na parede do tubo ou reagente desnaturantes (uréia. em outro tubo para estudo.

Resumo .

Aplicações Purificar e concentrar uma substância de uma mistura em uma solução tampão. y Entender as ligações entre compostos biológicos e determinadas substâncias. y . como as drogas. y Purificar e concentrar uma solução enzimática. y Reduzir a quantidade de uma substância em uma mistura.

pdf y .quimica.ufscar.ac.Referências Bibliográficas http://www.ls.bio.pdf08-1007.br/ignez/Aula0 8-extracao-3Dy http://teachline.il/72682/Bookle ts/PHARMACIA-AffinityManual.davidson.edu/courses/gen omics/method/Affinity.html y http://www.huji.

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